293T

Este artículo puede ser demasiado técnico para que la mayoría de los lectores lo comprendan . Ayude a mejorarlo para que sea comprensible para los no expertos , sin eliminar los detalles técnicos. ( Agosto de 2016 ) ( Obtenga información sobre cómo y cuándo eliminar este mensaje de plantilla )

293T (o HEK 293T ) es una línea celular humana , derivada de la línea celular HEK 293 , que expresa una versión mutante del antígeno T grande de SV40 . Se utiliza con mucha frecuencia en biología para la expresión de proteínas y la producción de retrovirus recombinantes .

Origen

293T se creó en el laboratorio de Michele Calos en Stanford mediante la transfección estable de la línea celular HEK 293 con un plásmido que codifica un mutante sensible a la temperatura del antígeno T grande de SV40; originalmente se lo denominó 293 / tsA1609neo . ^[1] La primera referencia a la línea celular como "293T" puede ser su uso para crear la línea celular de empaquetamiento BOSC23 para producir partículas retrovirales. ^[2]

Caracteristicas

La transfección utilizada para crear 293T (que implica el plásmido pRSV-1609) confirió resistencia a neomicina / G418 y expresión del alelo tsA1609 del antígeno T grande de SV40; este alelo está completamente activo a 33 ° C (su temperatura permisiva ), tiene una función sustancial a 37 ° C y está inactivo a 40 ° C. ^[3] 293T es transfectable de manera muy eficiente con ADN (como su padre HEK 293). Debido a la expresión del antígeno T grande de SV40, los ADN plasmídicos transfectados que portan el origen de replicación de SV40 pueden replicarse en 293T y mantendrán transitoriamente un alto número de copias; esto puede aumentar en gran medida la cantidad de proteína recombinante o retrovirus que se puede producir a partir de las células.

Genoma

Se han determinado las secuencias del genoma completo de tres aislados diferentes de 293T. Son bastante similares entre sí, pero muestran una divergencia detectable de la línea celular HEK 293 parental. ^[4]

Referencias

^ DuBridge RB, Tang P, Hsia HC, Leong PM, Miller JH, Calos MP (enero de 1987). "Análisis de mutación en células humanas mediante el uso de un sistema lanzadera del virus de Epstein-Barr" . Mol. Celda. Biol . 7 (1): 379–387. doi : 10.1128 / MCB.7.1.379 . PMC 365079 . PMID 3031469 .
^ Pear WS, Nolan GP, Scott ML, Baltimore D (15 de septiembre de 1993). "Producción de retrovirus libres de ayudantes de alto título por transfección transitoria" . Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 90 (18): 8392–8396. doi : 10.1073 / pnas.90.18.8392 . PMC 47362 . PMID 7690960 .
^ Rio DC, Clark SG, Tjian R (4 de enero de 1985). "Un sistema de vector-huésped de mamífero que regula la expresión y amplificación de genes transfectados por inducción de temperatura". Ciencia . 227 (4682): 23-28. doi : 10.1126 / science.2981116 . PMID 2981116 .
^ Lin YC, Boone M, Meuris L, Lemmens I, Van Roy N, Soete A, Reumers J, Moisse M, Plaisance S, Drmanac R, Chen J, Speleman F, Lambrechts D, Van de Peer Y, Tavernier J, Callewaert N (3 de septiembre de 2014). "Dinámica del genoma del linaje de riñón embrionario humano 293 en respuesta a manipulaciones de biología celular" . Nat. Comun . 5 . 4767. doi : 10.1038 / ncomms5767 . PMC 4166678 . PMID 25182477 .

enlaces externos

Entrada ATCC para 293T
Entrada Cellosaurus para 293T

[1] DuBridge RB, Tang P, Hsia HC, Leong PM, Miller JH, Calos MP (enero de 1987). "Análisis de mutación en células humanas mediante el uso de un sistema lanzadera del virus de Epstein-Barr" . Mol. Celda. Biol . 7 (1): 379–387. doi : 10.1128 / MCB.7.1.379 . PMC 365079 . PMID 3031469 .

[2] Pear WS, Nolan GP, Scott ML, Baltimore D (15 de septiembre de 1993). "Producción de retrovirus libres de ayudantes de alto título por transfección transitoria" . Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 90 (18): 8392–8396. doi : 10.1073 / pnas.90.18.8392 . PMC 47362 . PMID 7690960 .

[3] Rio DC, Clark SG, Tjian R (4 de enero de 1985). "Un sistema de vector-huésped de mamífero que regula la expresión y amplificación de genes transfectados por inducción de temperatura". Ciencia . 227 (4682): 23-28. doi : 10.1126 / science.2981116 . PMID 2981116 .

[4] Lin YC, Boone M, Meuris L, Lemmens I, Van Roy N, Soete A, Reumers J, Moisse M, Plaisance S, Drmanac R, Chen J, Speleman F, Lambrechts D, Van de Peer Y, Tavernier J, Callewaert N (3 de septiembre de 2014). "Dinámica del genoma del linaje de riñón embrionario humano 293 en respuesta a manipulaciones de biología celular" . Nat. Comun . 5 . 4767. doi : 10.1038 / ncomms5767 . PMC 4166678 . PMID 25182477 .

[1]