La nefelometría es una técnica utilizada en inmunología para determinar los niveles de varias proteínas del plasma sanguíneo. Por ejemplo, los niveles totales de anticuerpos isotipos o clases: inmunoglobulina M , inmunoglobulina G , y la inmunoglobulina A . [1] Es importante en la cuantificación de cadenas ligeras libres en enfermedades como el mieloma múltiple . La cuantificación es importante para la clasificación de la enfermedad y para el seguimiento de la enfermedad una vez que se ha tratado a un paciente (una mayor desviación de la relación entre las cadenas ligeras kappa y lambda después de que se ha tratado a un paciente es una indicación de la recurrencia de la enfermedad).
Se realiza midiendo la luz dispersa en un ángulo de la muestra que se está midiendo. [2] En nefelometría diagnóstica, la rama ascendente de la curva de Heidelberger-Kendall se extiende optimizando el curso de la reacción para que la mayoría de las señales de medición de proteínas plasmáticas (de sangre humana) caigan en el lado izquierdo de la curva de Heidelberger-Kendall, incluso a concentraciones muy elevadas. [3]
Esta técnica se utiliza mucho en los laboratorios clínicos porque se automatiza con relativa facilidad. Se basa en el principio de que una suspensión diluida de partículas pequeñas dispersará la luz (generalmente un láser) que la atraviese en lugar de simplemente absorberla. La cantidad de dispersión se determina recolectando la luz en un ángulo (generalmente entre 30 y 90 grados).
El anticuerpo y el antígeno se mezclan en concentraciones tales que solo se forman pequeños agregados que no se depositan rápidamente en el fondo. La cantidad de dispersión de luz se mide y se compara con la cantidad de dispersión de mezclas conocidas. La cantidad de desconocido se determina a partir de una curva estándar.
La nefelometría se puede utilizar para detectar antígeno o anticuerpo, pero generalmente se realiza con el anticuerpo como reactivo y el antígeno del paciente como desconocido. [4] En el Laboratorio Médico de Inmunología, se pueden ejecutar dos tipos de pruebas: "nefelometría de punto final" y "nefelometría cinética (de frecuencia)".
Las pruebas de nefelometría de punto final se ejecutan permitiendo que la reacción anticuerpo / antígeno se complete (hasta que todos los anticuerpos reactivos presentes y los antígenos presentes de la muestra del paciente que pueden agregarse lo hayan hecho y no se puedan formar más complejos). Sin embargo, las partículas grandes caerán de la solución y causarán una lectura de dispersión falsa, por lo que se ideó la nefelometría cinética.
En la nefelometría cinética, la tasa de dispersión se mide justo después de agregar el reactivo. Siempre que el reactivo sea constante, la tasa de cambio puede verse directamente relacionada con la cantidad de antígeno presente.
Ver también
Referencias
- ^ Enciclopedia MedlinePlus : 003545
- ^ Descripción general en mcg.edu Archivado el 4 de septiembre de 2006 en Wayback Machine.
- ^ "Reacción de precipitina (biología molecular)" . what-when-how.com . Consultado el 28 de mayo de 2019 .
- ^ Inmunología clínica y seriología 3ra Ed., Stevens, pág 127, FA Davis Company