Antígeno nuclear de células en proliferación


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Estructura Cryo-EM del complejo procesivo PolD-PCNA unido a ADN

El antígeno nuclear de células proliferantes ( PCNA ) es una pinza de ADN que actúa como factor de procesividad para la ADN polimerasa δ en células eucariotas y es esencial para la replicación. El PCNA es un homotrímero y logra su procesividad rodeando el ADN, donde actúa como un andamio para reclutar proteínas involucradas en la replicación del ADN, la reparación del ADN, la remodelación de la cromatina y la epigenética . [4]

Muchas proteínas interactúan con PCNA a través de dos conocidos motivos de interacción con PCNA, la caja de péptido de interacción con PCNA (PIP) [5] y el motivo de interacción de PCNA homólogo de AlkB 2 (APIM). [6] Las proteínas que se unen a PCNA a través de la caja PIP están implicadas principalmente en la replicación del ADN, mientras que las proteínas que se unen a PCNA a través de APIM son principalmente importantes en el contexto del estrés genotóxico. [7]

Función

La proteína codificada por este gen se encuentra en el núcleo y es un cofactor de la ADN polimerasa delta. La proteína codificada actúa como un homotrímero y ayuda a aumentar la procesividad de la síntesis de la cadena principal durante la replicación del ADN. En respuesta al daño del ADN, esta proteína se ubiquitina y participa en la vía de reparación del ADN dependiente de RAD6. Se han encontrado dos variantes de transcripción que codifican la misma proteína para este gen. Se han descrito pseudogenes de este gen en el cromosoma 4 y en el cromosoma X. [8]

Expresión en el núcleo durante la síntesis de ADN.

El PCNA se identificó originalmente como un antígeno que se expresa en los núcleos de las células durante la fase de síntesis del ADN del ciclo celular . [9] Se secuenció parte de la proteína y esa secuencia se usó para permitir el aislamiento de un clon de ADNc . [10] El PCNA ayuda a mantener la ADN polimerasa delta ( Pol δ ) en el ADN. El PCNA se fija [11] al ADN mediante la acción del factor de replicación C (RFC), [12] que es un miembro heteropentamérico de la clase AAA + de ATPasas. La expresión de PCNA está bajo el control de Complejos que contienen el factor de transcripción E2F . [13] [14]

Papel en la reparación del ADN

Dado que la ADN polimerasa épsilon está involucrada en la resíntesis de hebras de ADN dañadas escindidas durante la reparación del ADN , el PCNA es importante tanto para la síntesis como para la reparación del ADN. [15] [16]

El PCNA también participa en la vía de tolerancia al daño del ADN conocida como reparación posterior a la replicación (PRR). [17] En PRR, hay dos sub-vías: (1) una vía de translesión, que es llevada a cabo por ADN polimerasas especializadas que son capaces de incorporar bases de ADN dañadas en sus sitios activos (a diferencia de la polimerasa replicativa normal, que se estanca) , y por lo tanto evitar el daño, y (2) una ruta propuesta de "cambio de plantilla" que se cree que implica el desvío del daño mediante el reclutamiento de la maquinaria de recombinación homóloga. El PCNA es fundamental para la activación de estas vías y la elección de qué vía utiliza la célula. El PCNA se modifica postraduccionalmente mediante ubiquitina . [18]La monoubiquitina de lisina número 164 en PCNA activa la vía de síntesis de translesión. Se cree que la extensión de esta mono-ubiquitina por una cadena de poli-ubiquitina unida a lisina-63 no canónica en PCNA [18] activa la vía del cambio de plantilla. Además, la sumoilación (mediante un pequeño modificador similar a la ubiquitina, SUMO) de PCNA lisina-164 (y en menor grado, lisina-127) inhibe la vía del cambio de plantilla. [18] Este efecto antagonista se produce porque el PCNA sumoilado recluta una helicasa de ADN llamada Srs2, [19] que tiene un papel en la interrupción de los filamentos de nucleoproteína Rad51 fundamentales para el inicio de la recombinación homóloga.

Proteínas de unión a PCNA

El PCNA interactúa con muchas proteínas. [20]

  • Factores apoptóticos
  • ATPasas
  • Enzimas de reparación de escisión de base
  • Reguladores del ciclo celular
  • Factor remodelador de cromatina
  • Cargador de abrazadera
  • Cohesin
  • ADN ligasa
  • ADN metiltransferasa
  • Polimerasas de ADN
  • E2 SUMO -enzima conjugadora
  • Ligasas de ubiquitina E3
  • Endonucleasa de colgajo
  • Helicases
  • Histona acetiltransferasa
  • histona chaperón
  • Histona desacetilasa
  • Enzimas reparadoras de discrepancias
  • Receptor NKp44
  • Enzima reparadora por escisión de nucleótidos
  • Polimerasa de poli ADP ribosa
  • Procaspasas [21]
  • Proteína quinasas
  • Factor de licencia
  • Dominio de la proteína TCP
  • Topoisomerasa

Interacciones

Se ha demostrado que PCNA interactúa con:

  • Anexina A2 , [22]
  • CAF-1 , [23] [24] [25]
  • CDC25C , [26]
  • CHTF18 , [22]
  • Ciclina D1 , [27] [28]
  • Ciclina O , [22] [29]
  • Quinasa dependiente de ciclina 4 , [28] [30]
  • Inhibidor de quinasa dependiente de ciclina 1C , [31]
  • DNMT1 , [32] [33] [34]
  • EP300 , [35]
  • Establecimiento de Sister Chromatid Cohesion 2 , [36]
  • Endonucleasa 1 de estructura de colgajo , [37] [38] [39] [40] [41] [42] [43]
  • GADD45A , [44] [45] [46] [47] [48]
  • GADD45G , [49] [50]
  • HDAC1 , [51]
  • HUS1 , [52]
  • ING1 , [53]
  • KCTD13 , [54]
  • KIAA0101 , [43]
  • Ku70 , [22] [55]
  • Ku80 , [22] [55] [56]
  • MCL1 , [57]
  • MSH3 , [22] [58] [59]
  • MSH6 , [22] [58] [59]
  • MUTYH , [60]
  • P21 , [31] [39] [43] [61] [62] [63] [64] [65]
  • POLD2 , [66]
  • POLD3 , [22] [67]
  • POLDIP2 , [68]
  • POLH , [69]
  • ENCUESTA , [70] [71] [72]
  • RFC1 , [22] [61] [73] [74] [75]
  • RFC2 , [22] [76] [77]
  • RFC3 , [22] [78]
  • RFC4 , [22] [76]
  • RFC5 , [22] [74] [76]
  • Ubiquitina C [79] [80] [81]
  • Helicasa dependiente de ATP del síndrome de Werner , [82] [83]
  • XRCC1 , [84] y
  • Proteína de unión a caja Y 1 . [85]

Las proteínas que interactúan con PCNA a través de APIM incluyen el homólogo 2 de AlkB humano, TFIIS-L, TFII-I, Rad51B, [6] XPA, [86] ZRANB3, [87] y FBH1. [88]

Usos

Pueden usarse anticuerpos contra el antígeno nuclear de células proliferantes (PCNA) o el anticuerpo monoclonal denominado Ki-67 para la clasificación de diferentes neoplasias , por ejemplo , astrocitoma . Pueden tener valor diagnóstico y pronóstico . La formación de imágenes de la distribución nuclear de PCNA (mediante marcaje de anticuerpos) se puede utilizar para distinguir entre la fase S temprana, media y tardía del ciclo celular. [89] Sin embargo, una limitación importante de los anticuerpos es que las células deben fijarse, lo que da lugar a posibles artefactos.

Por otro lado, el estudio de la dinámica de replicación y reparación en células vivas se puede realizar introduciendo fusiones traslacionales de PCNA. Para eliminar la necesidad de transfección y evitar el problema de las células difíciles de transfectar y / o de vida corta, se pueden usar marcadores de replicación y / o reparación de células permeables. Estos péptidos ofrecen la ventaja distintiva de que pueden usarse in situ en tejido vivo e incluso distinguir las células que experimentan replicación de las células que experimentan reparación. [90]

El PCNA es una diana terapéutica potencial en la terapia del cáncer. [91]

Ver también

  • Ki-67 - marcador celular de proliferación
  • Transcripción

Referencias

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enlaces externos

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