La proteína L se aisló por primera vez de la superficie de la especie bacteriana Peptostreptococcus magnus y se encontró que se une a las inmunoglobulinas a través de la interacción de la cadena L , a partir de la cual se sugirió el nombre. [2] Consta de 719 residuos de aminoácidos. [3] El peso molecular de la proteína L purificada de las paredes celulares de Peptostreptoccus magnus se estimó por primera vez en 95 kD mediante SDS-PAGE en presencia del agente reductor 2-mercaptoetanol, mientras que el peso molecular se determinó en 76 kD mediante cromatografía en gel en presencia de guanidina HCl 6 M. La proteína L no contiene bucles de disulfuro entre cadenas, ni consta de subunidades unidas por disulfuro. Es una molécula ácida con un pIde 4.0. [4] A diferencia de la proteína A y la proteína G , que se unen a la región Fc de las inmunoglobulinas ( anticuerpos ), la proteína L se une a los anticuerpos a través de interacciones de cadenas ligeras . Dado que ninguna parte de la cadena pesada está involucrada en la interacción de unión, la proteína L se une a una gama más amplia de clases de anticuerpos que la proteína A o G. La proteína L se une a representantes de todas las clases de anticuerpos, incluidas IgG , IgM , IgA , IgE e IgD . Los fragmentos variables de cadena única ( scFv ) y los fragmentos Fab también se unen a la proteína L.
Dominio de proteína L b1 | ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
![]() Estructura de la unión de la proteína L a la cadena ligera de un Fab murino. [1] | ||||||||||
Identificadores | ||||||||||
Símbolo | PpL | |||||||||
Pfam | PF02246 | |||||||||
InterPro | IPR003147 | |||||||||
SCOP2 | 1MHH / SCOPe / SUPFAM | |||||||||
|
A pesar de este amplio rango de unión, la proteína L no es una proteína de unión a anticuerpos universal . La unión a la proteína L está restringida a aquellos anticuerpos que contienen cadenas ligeras kappa. En humanos y ratones, la mayoría de las moléculas de anticuerpos contienen cadenas ligeras kappa (κ) y el resto tiene cadenas ligeras lambda (λ). La proteína L solo es eficaz para unirse a ciertos subtipos de cadenas ligeras kappa. Por ejemplo, se une a los subtipos VκI, VκIII y VκIV humanos pero no se une al subtipo VκII. La unión de inmunoglobulinas de ratón está restringida a aquellas que tienen cadenas ligeras VκI. [5]
Dados estos requisitos específicos para una unión eficaz, la principal aplicación de la proteína L inmovilizada es la purificación de anticuerpos monoclonales de ascitis o sobrenadantes de cultivos celulares que se sabe que tienen la cadena ligera kappa . La proteína L es extremadamente útil para la purificación de anticuerpos monoclonales que contienen VLκ del sobrenadante del cultivo porque no se une a las inmunoglobulinas bovinas , que a menudo están presentes en el medio como un suplemento de suero . Además, la proteína L no interfiere con el sitio de unión al antígeno del anticuerpo, lo que la hace útil para ensayos de inmunoprecipitación , incluso usando IgM.
Gen de la proteína L
El gen de la proteína L contiene cinco componentes: una secuencia señal de 18 aminoácidos; una región NH2-terminal ("A") de 79 residuos; cinco repeticiones "B" homólogas de 72-76 aminoácidos cada una; una región terminal COOH de dos repeticiones "C" adicionales (52 aminoácidos cada una); una supuesta región hidrófila rica en prolina que abarca la pared celular ("W") después de que se repite la C; un ancla de membrana hidrofóbica ("M"). Se encontró que las repeticiones B (36 kD) eran responsables de la interacción con las cadenas ligeras de Ig. [2]
Otras proteínas de unión a anticuerpos
Además de la proteína L, otras proteínas bacterianas que se unen a inmunoglobulinas, como la proteína A , la proteína G y la proteína A / G, se utilizan comúnmente para purificar, inmovilizar o detectar inmunoglobulinas. Cada una de estas proteínas de unión a inmunoglobulina tiene un perfil de unión de anticuerpo diferente en términos de la porción del anticuerpo que se reconoce y la especie y tipo de anticuerpos que se unirá.
Referencias
- ^ Graille M, Harrison S, Crump MP, Findlow SC, Housden NG, Muller BH, Battail-Poirot N, Sibaï G, Sutton BJ, Taussig MJ, Jolivet-Reynaud C, Gore MG, Stura EA (diciembre de 2002). "Evidencia de plasticidad y mimetismo estructural en la interfaz L de cadena ligera de inmunoglobulina-proteína" . J Biol Chem . 277 (49): 47500–6. doi : 10.1074 / jbc.M206105200 . PMID 12221088 .
- ^ Björck L (febrero de 1988). "Proteína L. Una nueva proteína de la pared celular bacteriana con afinidad por las cadenas L de Ig". J. Immunol . 140 (4): 1194–7. PMID 3125250 .
- ^ Kastern W, Sjöbring U, Björck L (junio de 1992). "Estructura de la proteína L peptestreptocócica e identificación de un dominio de unión de cadena ligera de inmunoglobulina repetido". J. Biol. Chem . 267 (18): 12820–5. PMID 1618782 .
- ^ Akerström B, Björck L (noviembre de 1989). "Proteína L: una proteína bacteriana de unión a la cadena ligera de inmunoglobulina. Caracterización de las propiedades de unión y fisicoquímicas". J. Biol. Chem . 264 (33): 19740–6. PMID 2479638 .
- ^ Nilson BH, Lögdberg L, Kastern W, Björck L, Akerström B (agosto de 1993). "Purificación de anticuerpos utilizando estructuras de marco de unión a proteína L en el dominio variable de cadena ligera". J. Immunol. Métodos . 164 (1): 33–40. doi : 10.1016 / 0022-1759 (93) 90273-a . PMID 8360508 .