Los anticuerpos recombinantes son fragmentos de anticuerpos producidos mediante el uso de genes codificantes de anticuerpos recombinantes . [1] En su mayoría consisten en una cadena ligera y pesada de la región variable de inmunoglobulina . Los anticuerpos recombinantes tienen muchas ventajas tanto en aplicaciones médicas como de investigación, lo que los convierte en un tema popular de exploración y nueva producción contra objetivos específicos. La forma más utilizada es el fragmento variable de cadena única (scFv), que ha mostrado los rasgos más prometedores que se pueden explotar en la medicina y la investigación humanas. [2] A diferencia de los anticuerpos monoclonalesproducido por tecnología de hibridomas , que puede perder la capacidad de producir el anticuerpo deseado con el tiempo o el anticuerpo puede sufrir cambios no deseados, que afectan su funcionalidad, los anticuerpos recombinantes producidos en la presentación de fagos mantienen un alto estándar de especificidad y baja inmunogenicidad . [3] [4]
Hay varios formatos conocidos de anticuerpos recombinantes que se producen comúnmente. Estos son los anticuerpos recombinantes Fab , scFv y diacuerpos. [4] [5] [3] Cada uno de los formatos tiene un potencial de aplicaciones ligeramente diferente y se puede utilizar en varios campos de investigación, así como en la medicina humana y animal. [6] Otra posibilidad investigada es el desarrollo de anticuerpos antiidiotípicos . Los anticuerpos antiidiotípicos se unen a un paratopo de otro anticuerpo específico. Por lo tanto, se puede utilizar para medir la presencia de anticuerpos y cargas de fármacos en el suero de los pacientes . [7]En función de su especificidad de unión se pueden distinguir 3 tipos de anticuerpos antiidiotípicos, que se superponen parcialmente con los formatos mencionados anteriormente: los clásicos, un grupo que incluye los anticuerpos del fragmento Fab, los anticuerpos que se unen al idiotopo fuera del sitio de unión del fármaco y los anticuerpos, que sólo se unen al complejo de fármaco ya ensamblado unido al objetivo. [7] Los más utilizados son scFv, fragmentos Fab y anticuerpos biespecíficos.
scFv es el más pequeño de los formatos de anticuerpos recombinantes, que es capaz de unirse al antígeno . [8] Tienen un peso molecular de aproximadamente 27 kDa. [9] Están formados por cadenas ligeras y pesadas de la región variable de una inmunoglobulina. Las dos cadenas están unidas por un péptido enlazador flexible . [2] El enlazador de péptido flexible generalmente consiste en una repetición de secuencia corta . La secuencia se compone de cuatro glicinas y una serina [5] y sirve para estabilizar el fragmento. [8] [10]La funcionalidad se puede mejorar mediante modificaciones químicas específicas del sitio, añadiendo una etiqueta peptídica o mediante la fusión con un gen para lograr la producción de anticuerpos recombinantes bifuncionales. [9] Es importante establecer la actividad vinculante para garantizar la buena funcionalidad del producto. Para determinar la actividad de unión, se realiza de forma rutinaria un ensayo ELISA . [11]
Estructuralmente, los fragmentos Fab constan de dos conjuntos de componentes variables y constantes, que crean dos cadenas de polipéptidos. Juntos forman una estructura estable. [5] Como miembro de los anticuerpos antiidiotípicos, los anticuerpos recombinantes del fragmento Fab se unen directamente al paratopo del anticuerpo diana. Eso significa que compiten con el fármaco por el sitio de unión y tienen una función inhibidora. Los anticuerpos del fragmento Fab se pueden utilizar para la detección de fármacos no unidos o fármacos libres en el suero. [7] También se han utilizado anticuerpos Fab para evitar los efectos adversos causados por la unión inespecífica de la porción Fc del anticuerpo, que falta en el fragmento Fab. [5] En caso de que la IgGLa inmunoglobulina era más adecuada para el tratamiento o alguna otra aplicación particular, también se han realizado experimentos en los que los fragmentos Fab recombinantes se convirtieron en forma de IgG recombinante. Esta posibilidad amplía aún más el conjunto de posibles estructuras objetivo. [12]