Fluo-3


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Fluo-3 es un indicador de fluorescencia del calcio intracelular (Ca 2+ ). Se utiliza para medir Ca 2+ dentro de células vivas en citometría de flujo y microscopía de barrido láser confocal utilizando excitación de luz visible (compatible con fuentes de láser de argón que operan a 488 nm). Fluo-3 es un compuesto esencialmente no fluorescente, pero tras la unión de Ca 2+ su fluorescencia aumenta bruscamente con un máximo de emisión a 525 nm adecuado para detectores de uso convencional diseñados para isotiocianato de fluoresceína.(FITC) medidas. Este gran cambio en la fluorescencia junto con un buen rendimiento de fotones proporciona un contraste muy alto que permitió la detección de eventos microscópicos de liberación de Ca 2+ dentro de las células llamadas " chispas de calcio ". [1] Mientras que las sales de fluo-3 no pueden penetrar en las células, la carga se puede lograr utilizando su derivado de éster acetoximetil (AM) . Una vez dentro de la célula, las esterasas inespecíficas escinden el éster atrapando eficazmente el fluo-3. [2]

Dado que el calcio es un segundo mensajero clave dentro de las células, las propiedades específicas del fluo-3 permiten a los investigadores investigar la dinámica de transducción de señales intracelulares resuelta en el tiempo en una amplia gama de células. [3] [4]

Referencias

  1. ^ Cheng, H .; Lederer, WJ; Cannell, MB (1993). "Chispas de calcio - eventos elementales subyacentes al acoplamiento excitación-contracción en corazón-músculo". Ciencia . 262 (5134): 740–744. doi : 10.1126 / science.8235594 . PMID  8235594 .
  2. ^ Haugland, RP. Manual de sondas fluorescentes y productos de investigación . Sondas moleculares, 2010
  3. ^ Gamsjäger, T. Citometría de flujo de calcio intracelular en plaquetas . Grin, 2012
  4. ^ Lambert, DG. Protocolos de señalización de calcio . Prensa de Humana, 2006