La floxina B (comúnmente conocida simplemente como floxina ) es un tinte rojo soluble en agua que se usa para colorear medicamentos y cosméticos en los Estados Unidos [2] y para colorear alimentos en Japón . [3] Se deriva de la fluoresceína , pero se diferencia por la presencia de cuatro átomos de bromo en las posiciones 2, 4, 5 y 7 del anillo xanteno y cuatro átomos de cloro en el anillo carboxifenilo . [4] Tiene un máximo de absorción alrededor de 540 nm y una emisiónmáximo alrededor de 564 nm. [5] Aparte del uso industrial, la floxina B tiene funciones como sustancia antimicrobiana , colorante de viabilidad y colorante biológico . [6] Por ejemplo, se utiliza en la tinción con hematoxilina-floxina-azafrán ( HPS ) para colorear el citoplasma y el tejido conectivo en tonos de rojo. [7]
Nombres | |
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Nombre IUPAC preferido 2 ′, 4 ′, 5 ′, 7′-tetrabromo-4,5,6,7-tetracloro-3-oxo- 3H- espiro [[2] benzofuran-1,9′-xanteno] -3 ′ disódico, 6′-bis (olate) | |
Otros nombres Cianosina; Cianosina; Eosina azulado; Azul de eosina; Cianosina B; Azul de eosina; Phloxine P; Floxina B; Eosina I Azulado; Rojo ácido 92; CI 45410; D & C Rojo no. 28 | |
Identificadores | |
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Modelo 3D ( JSmol ) | |
CHEBI | |
Tarjeta de información ECHA | 100.038.490 |
PubChem CID | |
UNII | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
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Propiedades | |
C 20 H 2 Br 4 Cl 4 Na 2 O 5 | |
Masa molar | 829,63 g · mol −1 |
Apariencia | Polvo rojo a marrón |
Soluble | |
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa). | |
verificar ( ¿qué es ?) | |
Referencias de Infobox | |
Propiedades antimicrobianas
Niveles de dosis letales
En presencia de luz , floxina B tiene un bactericida efecto sobre gram-positivas cepas, tales como Bacillus subtilis , Bacillus cereus , y varios meticilina resistente a Staphylococcus aureus ( MRSA ) cepas. [8] A una concentración inhibitoria mínima de 25 µM, el crecimiento se reduce 10 veces en 2,5 horas. A concentraciones de 50 μM y 100 μM, el crecimiento se detiene por completo y los recuentos de células disminuyen en un factor de 10 4 a 10 5 . [6] Para los seres humanos, la Administración de Drogas y Alimentos considera que la floxina B es segura hasta una dosis diaria de 1,25 mg / kg. [2]
Mecanismo de acción
Las bacterias expuestas a la floxina B mueren por daño oxidativo . La floxina B se ioniza en agua para convertirse en un ion cargado negativamente que se une a componentes celulares cargados positivamente [ cita requerida ] . Cuando la floxina B se somete a la luz, se produce la desbromación y se forman radicales libres y oxígeno singlete . Estos compuestos causan un daño irreversible a las bacterias, lo que provoca la detención del crecimiento y la muerte celular. [8] Las bacterias gramnegativas son resistentes a la floxina B debido a la membrana celular externa que las rodea. Esta bicapa lipídica recubierta de polisacárido crea una barrera de permeabilidad que evita la absorción eficiente del compuesto. La adición de EDTA , que se sabe que elimina los lipopolisacáridos y aumenta la permeabilidad de la membrana , [9] elimina la resistencia a la floxina B y permite la muerte de las bacterias gramnegativas.
Medida de viabilidad
La floxina B se puede utilizar para teñir células muertas de varias levaduras , incluidas Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe . Cuando se diluye en medio de crecimiento de levadura , el tinte no puede ingresar a las células debido a sus membranas. Las células de levadura muertas pierden la integridad de la membrana, por lo que la floxina B puede entrar y teñir los compuestos citosólicos intracelulares. Por lo tanto, la tinción es una medida de muerte celular. En los ensayos de recuento de células, el número de células fluorescentes (es decir, muertas) observadas a través de un hemocitómetro se puede comparar con el número total de células para dar una medida de la mortalidad. [10] El mismo principio se puede aplicar a un mayor rendimiento mediante citometría de flujo activada por fluorescencia ( FACS ), donde se cuentan todas las células teñidas con floxina B en una muestra. [11] [Nota: algunos informes sugieren que la floxina B se extrae de las células de levadura vivas, pero se retiene en las células de levadura muertas / moribundas (Kwolek-Mirek M et al. Investigación de levadura FEMS. 14, 1068-79, 2014 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25154541 , PMID: 25154541 DOI: 10.1111 / 1567-1364.12202}; Minois et al. Proc Natl Sci USA 102, 402-6, 2005 https: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15625107 , PMCID: PMC544282 DOI: 10.1073 / pnas.0408332102}). Sin embargo, aún se necesitan pruebas definitivas para cualquiera de los modelos.]
Referencias
- ^ Floxina B (rojo ácido 92)
- ^ a b Administración de Drogas y Alimentos (2001). El Código de Regulaciones Federales de los Estados Unidos de América, Título 21, Parte 74.1328 . Oficina de Imprenta del Gobierno de EE. UU. pag. 296 . Consultado el 15 de abril de 2016 .
- ^ Kamikura, M. (1970). "Cromatografía de capa fina de tintes sintéticos (X)" . Ciencias de la higiene y la seguridad de los alimentos (Shokuhin Eiseigaku Zasshi) . 11 (4): 242–248. doi : 10.3358 / shokueishi.11.242 .
- ^ Duarte, Paulo; Ferreira, Diana P .; Ferreira Machado, Isabel; Filipe, Luis; Ferreira, Vieira; Rodríguez, Hernan B .; San Román, Enrique (2012). "Floxina B como sonda de atrapamiento en celulosa microcristalina" . Moléculas . 17 (2): 1602-1616. doi : 10,3390 / moléculas17021602 .
- ^ Coppeta, J .; Rogers, C. (1998). "Fluorescencia inducida por láser de emisión dual para medidas directas del comportamiento escalar planar". Experimentos en fluidos . 25 (1): 1-15. doi : 10.1007 / s003480050202 .
- ^ a b Rasooly, Avraham; Weisz, Adrian (2002). "Actividades antibacterianas in vitro de la floxina B y otras fluoresceínas halogenadas contra Staphylococcus aureus resistente a la meticilina" . Agentes antimicrobianos y quimioterapia . 46 (11): 3650–3653. doi : 10.1128 / AAC.46.11.3650-3653.2002 . PMC 128710 . PMID 12384384 .
- ^ Borgerink, Hermina. "Tinción HPS" . Archivo de listas de distribución de Narkive . Consultado el 18 de abril de 2016 .
- ^ a b Rasooly, Reuven (2005). "Expandiendo la acción bactericida del aditivo colorante alimentario floxina B a bacterias gramnegativas" . Inmunología FEMS y Microbiología Médica . 45 (2): 239–244. doi : 10.1016 / j.femsim.2005.04.004 . PMID 15949926 .
- ^ Leive, Loretta; Kollin, Virginia (1967). "Control del tratamiento con EDTA para producir procesos metabólicos normales con permeables". Comunicaciones de investigación bioquímica y biofísica . 28 (2): 229-236. doi : 10.1016 / 0006-291X (67) 90434-2 . PMID 4166571 .
- ^ Noda, Takeshi (2008). "Ensayos de viabilidad para monitorizar la autofagia de levaduras". Métodos en enzimología . 451 : 27–31. doi : 10.1016 / S0076-6879 (08) 03202-3 . PMID 19185710 .
- ^ Guérin, Reneé; Beauregard, Pascale B .; Leroux, Alexandre; Rokeach, Luis A. (2009). "Calnexin regula la apoptosis inducida por inositol en la levadura de fisión" . PLoS ONE . 4 (7): e6244. doi : 10.1371 / journal.pone.0006244 . PMC 2705804 . PMID 19606215 .