El lisado de plaquetas humano (o hPL ) es un suplemento sustituto del suero fetal bovino (FBS) en cultivo celular experimental y clínico. Es un líquido turbio de color amarillo claro que se obtiene de las plaquetas de la sangre humana después de los ciclos de congelación / descongelación. El ciclo de congelación / descongelación hace que las plaquetas se lisen , liberando una gran cantidad de factores de crecimiento necesarios para la expansión celular. Los medios de cultivo celular sin FBS, por ejemplo, con lisado de plaquetas o sin componente animal / definido químicamente , se utilizan para terapia celular o medicina regenerativa . Están disponibles comercialmente en GMP ( buenas prácticas de fabricación) -calidad que generalmente es la base para la aprobación regulatoria. [1]
Proceso
Las plaquetas tienen una vida útil de 5 a 9 días. Debido a esto, la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. (FDA) expira las plaquetas transfundibles 5 días después de la recolección. Normalmente, la hPL se produce a partir de plaquetas caducadas que se han almacenado en condiciones de congelación a más tardar 7 días después de la recolección.
hPL se crea a partir de plaquetas donadas por donantes individuales o agrupadas, aisladas de sangre completa o por aféresis, distribuidas en una bolsa de recolección de plaquetas estándar. Existen algunas diferencias entre los protocolos de fabricación de hPL, pero todos comparten el mismo núcleo de ser congelados a temperaturas muy bajas y descongelados. Este proceso puede repetirse dos o tres veces para provocar una lisis plaquetaria completa. El hPL resultante puede luego someterse a diferentes pasos de fabricación para lograr múltiples grados de hPL.
La forma más común de hPL se somete a pocos pasos de procesamiento, produciendo un producto hecho del sobrenadante después del proceso de congelación / descongelación. Los factores de coagulación incluidos requieren agregar heparina al medio de cultivo celular para evitar la coagulación durante la incubación.
Otra forma de hPL es aquella que se puede usar en cultivo celular sin la necesidad de añadir heparina o cualquier anticoagulante. Este grado de hPL pasa por otros pasos de fabricación para inhibir el efecto que tienen los factores de coagulación.
Muchos laboratorios de todo el mundo están creando pequeñas cantidades de hPL para satisfacer sus necesidades de laboratorio. Las desventajas de este proceso son: costo y consistencia. Al crear lotes pequeños de hPL (un solo donante o pocos donantes agrupados), la consistencia de lote a lote del hPL se vuelve variable. La fabricación a gran escala mediante la combinación de muchos donantes de plaquetas es una necesidad para mitigar la variabilidad de donante a donante. La consistencia es una prioridad máxima para que los diseños experimentales proporcionen resultados reproducibles.
El lisado de plaquetas se usa comúnmente para complementar los medios basales en el cultivo de células madre mesenquimales . Antes del uso, se recomienda el proceso de inactivación de patógenos para prevenir la transmisión de patógenos. [2]
Ventas globales
El lisado de plaquetas humanas está disponible comercialmente a través de AventaCell BioMedical, Mill Creek Life Sciences, Compass Biomedical, Inc., Sexton Biotechnologies, Macopharma SA, iBiologics, PL BioScience GmbH, Life Science Productions Ltd (Reino Unido) y Trinova Biochem GmbH bajo las líneas de productos UltraGRO, PLTMax, PLUS, Stemulate, Human Platelet Lysate, XcytePlus, PLSOLUTION, PLMATRIX y CRUX RUFA Media Supplements. Algunas empresas ofrecen diferentes grados de lisado de plaquetas, incluidas versiones GMP y grado clínico para su uso en ensayos clínicos en humanos. El lisado de plaquetas ofrece una verdadera plataforma de proteínas recombinantes de origen humano . El lisado de plaquetas se ha probado en varias aplicaciones de cultivo celular, incluido el uso en sistemas de biorreactores avanzados . [3]
Ver también
Referencias
- ^ Laner-Plamberger y col. J Transl Med (2015) 13: 354
- ^ Iudicone P (enero de 2014). "Lisado de plaquetas pobre en plasma, libre de patógenos y expansión de células madre mesenquimales humanas". J Transl Med . 12 . doi : 10.1186 / 1479-5876-12-28 . PMC 3918216 . PMID 24467837 .
- ^ El lisado de plaquetas que consiste en un proteoma de reparación natural apoya la proliferación de células madre mesenquimales humanas y la estabilidad cromosómica. Trasplante de células Trasplante de células 2011 19; 20 (6): 797-811. Publicación electrónica del 19 de noviembre de 2010 http://www.bioprocessintl.com/manufacture/cell-therapies/expansion-human-mesenchymal-stem-cells-using-microcarriers-human-platelet-lysate/