ADN recombinante
Las moléculas de ADN recombinante ( ADNr ) son moléculas de ADN formadas por métodos de laboratorio de recombinación genética (como la clonación molecular ) que reúnen material genético de múltiples fuentes, creando secuencias que de otro modo no se encontrarían en el genoma .
El ADN recombinante es el nombre general de una pieza de ADN que se ha creado mediante la combinación de al menos dos fragmentos de dos fuentes diferentes. El ADN recombinante es posible porque las moléculas de ADN de todos los organismos comparten la misma estructura química y difieren solo en la secuencia de nucleótidos dentro de esa estructura general idéntica. Las moléculas de ADN recombinante a veces se denominan ADN quimérico , porque pueden estar hechas de material de dos especies diferentes, como la quimera mítica . La tecnología R-DNA utiliza secuencias palindrómicas y conduce a la producción de extremos pegajosos y romos .
Las secuencias de ADN utilizadas en la construcción de moléculas de ADN recombinante pueden proceder de cualquier especie . Por ejemplo, el ADN vegetal se puede unir al ADN bacteriano, o el ADN humano se puede unir al ADN fúngico. Además, las secuencias de ADN que no se encuentran en ninguna parte de la naturaleza pueden crearse mediante la síntesis química de ADN e incorporarse a moléculas recombinantes. Usando tecnología de ADN recombinante y ADN sintético, literalmente cualquier secuencia de ADN puede crearse e introducirse en una amplia gama de organismos vivos.
Las proteínas que pueden resultar de la expresión de ADN recombinante dentro de células vivas se denominan proteínas recombinantes . Cuando el ADN recombinante que codifica una proteína se introduce en un organismo huésped, la proteína recombinante no se produce necesariamente. [1] La expresión de proteínas extrañas requiere el uso de vectores de expresión especializados y, a menudo, necesita una reestructuración significativa por parte de secuencias de codificación extrañas. [2]
El ADN recombinante se diferencia de la recombinación genética en que el primero resulta de métodos artificiales en el tubo de ensayo, mientras que el segundo es un proceso biológico normal que resulta en la remezcla de secuencias de ADN existentes en prácticamente todos los organismos.
La clonación molecular es el proceso de laboratorio utilizado para crear ADN recombinante. [3] [4] [5] [6] Es uno de los dos métodos más utilizados, junto con la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para dirigir la replicación de cualquier secuencia de ADN específica elegida por el experimentador. Hay dos diferencias fundamentales entre los métodos. Una es que la clonación molecular implica la replicación del ADN dentro de una célula viva, mientras que la PCR replica el ADN en el tubo de ensayo, libre de células vivas. La otra diferencia es que la clonación implica cortar y pegar secuencias de ADN, mientras que la PCR amplifica copiando una secuencia existente.
