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| Nombres | |
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| Nombre IUPAC preferido 3,3 ′, 3 ′ ′ - Ácido fosfanotriiltripropanoico | |
| Otros nombres TCEP Tris (2-carboxietil) fosfina | |
| Identificadores | |
Modelo 3D ( JSmol ) | |
| ChemSpider | |
PubChem CID | |
| UNII | |
Tablero CompTox ( EPA ) | |
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| Propiedades | |
| C 9 H 15 O 6 P | |
| Masa molar | 250,187 g · mol −1 |
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa). | |
 verificar ( ¿qué es ?)  | |
| Referencias de Infobox | |
TCEP ( tris (2-carboxietil) fosfina ) es un agente reductor de uso frecuente en aplicaciones de bioquímica y biología molecular . [1] A menudo se prepara y se utiliza como una sal de hidrocloruro (TCEP-HCl) con un peso molecular de 286,65 gramos / mol. Es soluble en agua y está disponible como solución estabilizada a pH neutro e inmovilizado sobre un soporte de agarosa para facilitar la eliminación del agente reductor.
Aplicaciones [ editar ]
El TCEP se usa a menudo como un agente reductor para romper los enlaces disulfuro dentro y entre las proteínas como un paso preparatorio para la electroforesis en gel .
En comparación con los otros dos agentes más comunes utilizados para este propósito ( ditiotreitol y β-mercaptoetanol ), el TCEP tiene las ventajas de ser inodoro, un agente reductor más poderoso, un agente reductor irreversible (en el sentido de que el TCEP no se regenera, el fin producto de la escisión por disulfuro mediada por TCEP es de hecho dos tioles / cisteínas libres), más hidrófilo y más resistente a la oxidación en el aire. [2] Tampoco reduce los metales utilizados en la cromatografía de afinidad por metales inmovilizados .
El TCEP es particularmente útil cuando se marcan residuos de cisteína con maleimidas . El TCEP puede evitar que las cisteínas formen enlaces disulfuro y, a diferencia del ditiotreitol y el β-mercaptoetanol , no reaccionará tan fácilmente con la maleimida. [2] Sin embargo, se ha informado que el TCEP reacciona con la maleimida en determinadas condiciones. [3] [4]
El TCEP también se utiliza en el proceso de homogeneización de tejidos para el aislamiento de ARN. [5]
Para aplicaciones de espectroscopía ultravioleta visible , el TCEP es útil cuando es importante evitar la interferencia de absorbancia de 250 a 285 nanómetros que puede ocurrir con el ditiotreitol . El ditiotreitol absorberá lentamente con el tiempo más y más luz en este espectro a medida que se produzcan varias reacciones redox.
Referencias [ editar ]
- ^ Ruegg, UT y Rudinger, J. (1977). "Escisión reductora de disulfuros de cistina con tributilfosfina". Métodos Enzymol . Métodos en enzimología. 47 : 111-116. doi : 10.1016 / 0076-6879 (77) 47012-5 . ISBN 978-0-12-181947-7. PMID 927167 .
- ^ a b Información técnica de TCEP , de Interchim
- ^ Shafer, DE; Inman, JK; Lees, A. (2002). "Reacción de Tris (2-carboxietil) fosfina (TCEP) con maleimida y grupos α-haloacilo: elución anómala de TCEP por filtración en gel" . Anal. Biochem . 282 (1): 161-164. doi : 10.1006 / abio.2000.4609 . PMID 10860517 .
- ^ Tyagarajan K, Pretzer E, Wiktorowicz JE (2003). "Tintes reactivos con tiol para el marcaje por fluorescencia de muestras proteómicas". Electroforesis . 24 (14): 2348–2358. doi : 10.1002 / elps.200305478 . PMID 12874870 .
- ^ Rhee, SS; Burke, DH (2004). "Estabilización de tris (2-carboxietil) fosfina de ARN: comparación con ditiotreitol para su uso con química de ácido nucleico y tiofosforilo". Anal. Biochem . 325 (1): 137-143. doi : 10.1016 / j.ab.2003.10.019 . PMID 14715294 .
