placa de agar
Una placa de agar es una placa de Petri que contiene un medio de crecimiento solidificado con agar , que se utiliza para cultivar microorganismos . A veces, se agregan compuestos selectivos para influir en el crecimiento, como los antibióticos . [1]
Los microorganismos individuales colocados en la placa se convertirán en colonias individuales , cada una de las cuales es un clon genéticamente idéntico al organismo ancestro individual (excepto por la baja e inevitable tasa de mutación ). Por tanto, la placa puede usarse para estimar la concentración de organismos en un cultivo líquido o una dilución adecuada de ese cultivo usando un contador de colonias , o para generar cultivos genéticamente puros a partir de un cultivo mixto de organismos genéticamente diferentes.
Hay varios métodos disponibles para distribuir las células. Una técnica se conoce como " rayado ". En esta técnica, una gota del cultivo en el extremo de un lazo de alambre delgado y estéril , a veces conocido como inoculador, se raya a través de la superficie del agar dejando organismos, un número más alto al comienzo de la racha y un número más bajo al final. En algún momento durante una "racha" exitosa, el número de organismos depositados será tal que en esa área crecerán colonias individuales distintas que pueden eliminarse para un cultivo adicional, utilizando otro bucle estéril.
Otra forma de sembrar organismos, además de las rayas, en placas de agar es el análisis de manchas . Este tipo de análisis se usa a menudo para verificar la viabilidad de las células y se realiza con pinners (a menudo también llamados froggers). Una tercera técnica utilizada es el uso de perlas de vidrio estériles para colocar las células en placas. En esta técnica, las células se cultivan en un cultivo líquido del que se pipetea un pequeño volumen en la placa de agar y luego se extiende con las perlas. La placa de réplica es otra técnica para colocar las células en placas de agar. Estas cuatro técnicas son las más comunes, pero también son posibles otras. Es fundamental trabajar de forma estéril para evitar la contaminación en las placas de agar. [1] Por lo tanto, el enchapado se realiza a menudo en uncabina de flujo laminar o en la mesa de trabajo junto a un mechero Bunsen . [2]
En 1881, Fanny Hesse , que trabajaba como técnica para su esposo Walther Hesse en el laboratorio de Robert Koch , sugirió el agar como un agente de fraguado eficaz, ya que había sido un lugar común en la elaboración de mermeladas durante algún tiempo. [3]
Al igual que otros medios de crecimiento , las formulaciones de agar utilizadas en placas pueden clasificarse como "definidas" o "indefinidas"; un medio definido se sintetiza a partir de sustancias químicas individuales requeridas por el organismo, por lo que se conoce la composición molecular exacta, mientras que un medio indefinido se elabora a partir de productos naturales como el extracto de levadura , cuya composición precisa se desconoce. [4]
