En contextos biomédicos, un biomarcador o marcador biológico es un indicador medible de algún estado o condición biológica. Los biomarcadores a menudo se miden y evalúan utilizando sangre, orina o tejidos blandos [1] para examinar procesos biológicos normales , procesos patógenos o respuestas farmacológicas a una intervención terapéutica . [2] Los biomarcadores se utilizan en muchos campos científicos .
Los biomarcadores digitales son un nuevo campo emergente de biomarcadores, en su mayoría recopilados por biosensores inteligentes . [3] Hasta ahora, los biomarcadores digitales se han centrado en el seguimiento de parámetros vitales como los datos del acelerómetro y la frecuencia cardíaca [4] [5], pero también el habla . [6] Los nuevos biomarcadores digitales moleculares no invasivos están cada vez más disponibles registrados, por ejemplo, mediante análisis del sudor en la piel ( Sudorología habilitada por Internet ), que pueden considerarse biomarcadores digitales de próxima generación . [7] Los biomarcadores digitales se pueden compartir fácilmente con el médico responsable y se pueden desarrollar enfoques de diagnóstico novedosos utilizando inteligencia artificial.
Medicamento
Los biomarcadores utilizados para la medicina, o la medicina de precisión, son parte de un conjunto de herramientas clínicas relativamente nuevo. Se clasifican en 3 formas principales de acuerdo con sus aplicaciones clínicas. Se clasifican como biomarcadores moleculares, biomarcadores celulares o biomarcadores de imagen. Los 3 tipos de biomarcadores tienen un papel clínico en la reducción o orientación de las decisiones de tratamiento y siguen una subcategoría de ser predictivos, pronósticos o diagnósticos.
Profético
Los biomarcadores predictivos moleculares, celulares o de imágenes que pasan la validación pueden servir como un método para predecir los resultados clínicos. Los biomarcadores predictivos se utilizan para ayudar a optimizar los tratamientos ideales y, a menudo, indican la probabilidad de beneficiarse de una terapia específica. Por ejemplo, los biomarcadores moleculares situados en la interfaz de la arquitectura del proceso molecular específico de la patología y el mecanismo de acción del fármaco prometen capturar aspectos que permitan la evaluación de una respuesta individual al tratamiento. [8] Esto ofrece un enfoque dual tanto para ver tendencias en estudios retrospectivos como para usar biomarcadores para predecir resultados. Por ejemplo, en el cáncer colorrectal metastásico, los biomarcadores predictivos pueden servir como una forma de evaluar y mejorar las tasas de supervivencia del paciente y, en el escenario individual de cada caso, pueden servir como una forma de evitar a los pacientes la toxicidad innecesaria que surge de los planes de tratamiento del cáncer. [9]
Ejemplos comunes de biomarcadores predictivos son genes como ER, PR y HER2 / neu en cáncer de mama, proteína de fusión BCR-ABL en leucemia mieloide crónica, mutaciones c-KIT en tumores GIST y mutaciones EGFR1 en NSCLC. [10]
Diagnóstico
Los biomarcadores de diagnóstico que cumplen con la carga de la prueba pueden desempeñar un papel en la reducción del diagnóstico. Esto puede conducir a diagnósticos que son significativamente más específicos para pacientes individuales.
Un biomarcador puede ser una sustancia rastreable que se introduce en un organismo como un medio para examinar la función del órgano u otros aspectos de la salud. [11] Por ejemplo, el cloruro de rubidio se utiliza como isótopo radiactivo para evaluar la perfusión del músculo cardíaco.
También puede ser una sustancia cuya detección indica un estado de enfermedad particular, por ejemplo, la presencia de un anticuerpo puede indicar una infección . [11] Más específicamente, un biomarcador indica un cambio en la expresión o el estado de una proteína que se correlaciona con el riesgo o la progresión de una enfermedad, o con la susceptibilidad de la enfermedad a un tratamiento dado. [11]
Un ejemplo de un biomarcador de uso común en medicina es el antígeno prostático específico (PSA). Este marcador se puede medir como un sustituto del tamaño de la próstata con cambios rápidos que podrían indicar cáncer. El caso más extremo sería detectar proteínas mutantes como biomarcadores específicos del cáncer a través de la monitorización de reacciones seleccionadas (SRM), ya que las proteínas mutantes solo pueden provenir de un tumor existente, lo que proporciona en última instancia la mejor especificidad para fines médicos. [12]
Otro ejemplo es KRAS, un oncogén que codifica una GTPasa involucrada en varias vías de transducción de señales . Los biomarcadores para la oncología de precisión se utilizan típicamente en el diagnóstico molecular de la leucemia mieloide crónica , el cáncer de colon , mama y pulmón y en el melanoma . [13]
Pronóstico
Un biomarcador de pronóstico proporciona información sobre el resultado general del paciente, independientemente de la terapia. [10]
Investigar
Los biomarcadores para la medicina de precisión son parte de un conjunto de herramientas clínicas relativamente nuevo. En el caso del cáncer colorrectal metastásico (CCRm), hasta ahora solo se han identificado e implementado clínicamente dos biomarcadores predictivos. [9] En este caso, se sugirió que la falta de datos más allá de los estudios retrospectivos y los enfoques exitosos impulsados por biomarcadores era la causa principal detrás de la necesidad de nuevos estudios de biomarcadores dentro del campo médico debido al grave desgaste que acompaña a los ensayos clínicos.
El campo de la investigación de biomarcadores también se está expandiendo para incluir un enfoque combinatorio para identificar biomarcadores de fuentes multiómicas. La combinación de grupos de biomarcadores de varios datos ómicos permite la posibilidad de desarrollar paneles que evalúen la respuesta al tratamiento basándose en muchos biomarcadores al mismo tiempo. Una de esas áreas de investigación en expansión en biomarcadores multiómicos es la secuenciación del ADN mitocondrial. Se ha demostrado que las mutaciones en el ADN mitocondrial se correlacionan con el riesgo, la progresión y la respuesta al tratamiento del carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello. [14] En este ejemplo, se demostró que una tubería de secuenciación de costo relativamente bajo puede detectar mutaciones de baja frecuencia dentro de las células asociadas a tumores. Esto destaca la capacidad general de instantánea de los biomarcadores basados en el ADN mitocondrial para capturar la heterogeneidad entre los individuos. [14]
Validación reglamentaria para uso clínico
La Red de Investigación de Detección Temprana (EDNR) compiló una lista de siete criterios mediante los cuales se pueden evaluar los biomarcadores para agilizar la validación clínica. [15]
Prueba de concepto
Utilizado previamente para identificar las características específicas del biomarcador, este paso es fundamental para realizar una validación in situ de estos beneficios. El fundamento biológico de un estudio debe evaluarse a pequeña escala antes de que se puedan realizar estudios a gran escala. [15] Muchos candidatos deben someterse a pruebas para seleccionar los más relevantes. [dieciséis]
Validación experimental
Este paso permite el desarrollo del protocolo más adaptado para el uso rutinario del biomarcador. Simultáneamente, es posible confirmar la relevancia del protocolo con varios métodos (histología, PCR, ELISA, ...) y definir estratos en base a los resultados.
Validación de rendimientos analíticos
Uno de los pasos más importantes, sirve para identificar características específicas del biomarcador candidato antes de desarrollar una prueba de rutina. [17] Se consideran varios parámetros, entre ellos:
- sensibilidad
- especificidad
- robustez
- precisión
- reproducibilidad
- practicidad [15]
- ética [18]
Estandarización de protocolos
Esto optimiza el protocolo validado para el uso de rutina, incluido el análisis de los puntos críticos mediante el escaneo de todo el procedimiento para identificar y controlar los riesgos potenciales.
Cuestiones éticas
En 1997, el Instituto Nacional de Salud sugirió la necesidad de desarrollar directrices y legislación que regulen las dimensiones éticas de los estudios de biomarcadores. [15] De manera similar a la forma en que el Proyecto Genoma Humano colaboró con la Oficina de Evaluación de Tecnología de EE. UU., Los estudios de susceptibilidad de biomarcadores deberían colaborar para crear pautas éticas que se puedan implementar en el trabajo de base y los requisitos de la propuesta de los estudios.
Asegurar que todos los participantes que están incluidos en cada paso del proyecto (es decir, planificación, implementación y compilación de los resultados) cuenten con la protección de los principios éticos que se establecen antes de comenzar el proyecto. Estas protecciones éticas no solo deben proteger a los participantes en el estudio, sino también a los no participantes, investigadores, patrocinadores, reguladores y todas las demás personas o grupos involucrados en el estudio. [15] Algunas protecciones éticas podrían incluir, entre otras, las siguientes: [15]
- Consentimiento informado del participante
- Acceso a oportunidades de participación independientes de raza, estatus socioeconómico, género, sexualidad, etc. (dentro del rango permitido por el protocolo experimental)
- Integridad científica
- Confidencialidad de los datos ( anonimato )
- Reconocimiento del conflicto de intereses en términos de financiación y patrocinio por parte de patrocinadores determinados
- Transparencia y reconocimiento de los riesgos sanitarios y legales involucrados en la participación
Biología Celular
En biología celular , un biomarcador es una molécula que permite la detección y aislamiento de un tipo de célula en particular (por ejemplo, la proteína Oct-4 se utiliza como biomarcador para identificar células madre embrionarias ). [19]
En genética , un biomarcador (identificado como marcador genético ) es una secuencia de ADN que causa una enfermedad o está asociada con la susceptibilidad a la enfermedad. Se pueden utilizar para crear mapas genéticos de cualquier organismo que se esté estudiando.
Aplicaciones en química, geología y astrobiología.
Un biomarcador puede ser cualquier tipo de molécula que indique la existencia, pasada o presente, de organismos vivos. En los campos de la geología y la astrobiología , los biomarcadores, frente a los geomarcadores, también se conocen como biofirmas . El término biomarcador también se utiliza para describir la participación biológica en la generación de petróleo . Se utilizaron biomarcadores en la investigación geoquímica de un derrame de petróleo en la bahía de San Francisco, California en 1988. [20] Del 22 al 23 de abril, una refinería y una fábrica liberaron accidentalmente alrededor de 400.000 galones de petróleo crudo en el Valle de San Joaquín. complejo de la Shell Oil Company . El petróleo afectó a muchas áreas circundantes. Se recolectaron muestras de petróleo crudo en las diversas regiones donde se había extendido y se compararon con muestras inéditas en un intento de distinguir entre el petróleo derramado y el fondo petrogénico presente en el área del derrame. [20] Se realizó Mass Spectra para identificar biomarcadores e hidrocarburos alifáticos cíclicos dentro de las muestras. Se encontraron variaciones en la concentración de componentes de las muestras de petróleo crudo y sedimentos. [20]
Ecotoxicologia
Rachel Carson , autora de Silent Spring , planteó el tema del uso de pesticidas organoclorados y discutió los posibles efectos negativos que dichos pesticidas tienen en los organismos vivos. [21] Su libro planteó problemas éticos contra las corporaciones químicas que estaban controlando la recepción general del efecto de los pesticidas en el medio ambiente, lo que fue pionero en la necesidad de estudios ecotoxicológicos . Los estudios ecotoxicológicos podrían considerarse los precursores de los estudios de biomarcadores. [22] Los biomarcadores se utilizan para indicar una exposición o el efecto de los xenobióticos que están presentes en el medio ambiente y en los organismos. El biomarcador puede ser una sustancia externa en sí misma (por ejemplo, partículas de amianto o NNK del tabaco) o una variante de la sustancia externa procesada por el cuerpo (un metabolito ) que normalmente puede cuantificarse.
Historia
El uso generalizado del término "biomarcador" se remonta a 1980. [23] La forma en que se monitoreaba y estudiaba el medio ambiente a fines de la década de 1980 todavía dependía principalmente del estudio de sustancias químicas que se consideraban peligrosas. o tóxico cuando se encuentra en concentraciones moderadas en agua, sedimentos y organismos acuáticos. [22] Los métodos utilizados para identificar estos compuestos químicos fueron cromatografía, espectrofotometría, electroquímica y radioquímica. [22] Aunque estos métodos lograron dilucidar la composición química y las concentraciones presentes en el medio ambiente de los contaminantes y los compuestos en cuestión, las pruebas no proporcionaron datos que fueran informativos sobre el impacto de un determinado contaminante o químico en un organismo vivo. o ecosistema. Se propuso que la caracterización de biomarcadores podría crear un sistema de alerta para controlar el bienestar de una población o un ecosistema antes de que un contaminante o compuesto pudiera causar estragos en el sistema. Ahora, debido al desarrollo de estudios de biomarcadores, los biomarcadores se pueden utilizar y aplicar en los campos de la medicina humana y en la detección de enfermedades. [22]
Definición
El término "marcador biológico" se introdujo en la década de 1950. [24] [25]
- En 1987, los marcadores biológicos se definieron como “indicadores que señalan eventos en sistemas biológicos o muestras” que podrían clasificarse en tres categorías: marcadores de exposición, efecto y susceptibilidad. [26]
- En 1990, McCarthy y Shugart definieron los biomarcadores como "mediciones a nivel molecular, bioquímico o celular en poblaciones silvestres de hábitats contaminados o en organismos expuestos experimentalmente a contaminantes que indican que el organismo ha estado expuesto a sustancias químicas tóxicas, y la magnitud de la respuesta del organismo ”. [27]
- En 1994, Depledge definió un biomarcador como “un cambio bioquímico, celular, fisiológico o de comportamiento que puede medirse en tejidos o fluidos corporales o al nivel de todo el organismo que revela la exposición en / o los efectos de una o más sustancias químicas contaminantes ". [28]
- En 1996, Van Gestel y Van Brummelen intentaron redefinir los biomarcadores para diferenciar de forma inequívoca un biomarcador de un bioindicador. Según Van Gestel y Van Brummelen, un biomarcador por definición debe usarse solo para describir cambios bioquímicos subletales resultantes de la exposición individual a xenobióticos. [29]
- En 1998, el Grupo de Trabajo de Definiciones de Biomarcadores de los Institutos Nacionales de Salud definió un biomarcador como "una característica que se mide y evalúa objetivamente como un indicador de procesos biológicos normales, procesos patógenos o respuestas farmacológicas a una intervención terapéutica". [30] [2]
- En 2000, De Lafontaine definió el término biomarcador como un "cambio o cambios bioquímicos y / o fisiológicos en los organismos expuestos a contaminantes y, por lo tanto, representan las respuestas iniciales a la perturbación y la contaminación ambientales". [31]
Biomonitoreo activo
De Kock y Kramer desarrollaron el concepto de biomonitoreo activo en 1994. El biomonitoreo activo es una comparación de las propiedades químicas / biológicas de una muestra que ha sido reubicada en un nuevo entorno que contiene condiciones diferentes a las de su entorno original. [32]
Ver también
- Bioindicador
- Descubrimiento de biomarcadores
- Biomarcadores (diario)
- Biomarker Insights - una revista
- Biomarcador de imagen
- Endofenotipo
- Marcador molecular
- Prueba de saliva
- Biomarcadores de esponja
Referencias
- ^ Hirsch, Michelle S .; Watkins, Jaclyn (mayo de 2020). "Una revisión exhaustiva del uso de biomarcadores en el tracto ginecológico, incluidos los diagnósticos diferenciales y las dificultades de diagnóstico" . Avances en Patología Anatómica . 27 (3): 164-192. doi : 10.1097 / PAP.0000000000000238 . ISSN 1072-4109 .
- ^ a b Grupo de Trabajo de Definiciones de Biomarcadores (marzo de 2001). "Biomarcadores y criterios de valoración sustitutos: definiciones preferidas y marco conceptual". Farmacología clínica y terapéutica (revisión). 69 (3): 89–95. doi : 10.1067 / mcp.2001.113989 . PMID 11240971 . S2CID 288484 . como se cita en Siderowf A, Aarsland D, Mollenhauer B, Goldman JG, Ravina B (abril de 2018). "Biomarcadores de deterioro cognitivo en los trastornos con cuerpos de Lewy: estado y relevancia para los ensayos clínicos". Trastornos del movimiento (revisión). 33 (4): 528–536. doi : 10.1002 / mds.27355 . PMID 29624752 . S2CID 4634411 .
- ^ Babrak LM, Menetski J, Rebhan M, Nisato G, Zinggeler M, Brasier N, et al. (2019). "Biomarcadores tradicionales y digitales: ¿dos mundos aparte?" . Biomarcadores digitales . 3 (2): 92–102. doi : 10.1159 / 000502000 . PMC 7015353 . PMID 32095769 .
- ^ Rovini E, Maremmani C, Cavallo F (2017). "Cómo los sensores portátiles pueden apoyar el diagnóstico y tratamiento de la enfermedad de Parkinson: una revisión sistemática" . Fronteras en neurociencia . 11 : 555. doi : 10.3389 / fnins.2017.00555 . PMC 5635326 . PMID 29056899 .
- ^ Brasier N, Raichle CJ, Dörr M, Becke A, Nohturfft V, Weber S, et al. (Enero de 2019). "Detección de la fibrilación auricular con la cámara de un teléfono inteligente: primer estudio de validación clínica prospectivo, internacional, de dos centros (DETECT AF PRO)" . Europace . 21 (1): 41–47. doi : 10.1093 / europace / euy176 . PMC 6321964 . PMID 30085018 .
- ^ Low DM, Bentley KH, Ghosh, SS (enero de 2020). "Evaluación automatizada de trastornos psiquiátricos mediante el habla: una revisión sistemática" . Otorrinolaringología Investigativa con Laringoscopio . 5 (1): 96-116. doi : 10.1002 / lio2.354 . PMC 7042657 . PMID 32128436 .
- ^ Brasier N, Eckstein J (2019). "El sudor como fuente de biomarcadores digitales de próxima generación" . Biomarcadores digitales . 3 (3): 155-165. doi : 10.1159 / 000504387 . PMC 7011725 . PMID 32095774 .
- ^ Lukas A, Heinzel A, Mayer B (11 de marzo de 2019). "Biomarcadores para la captura de patología de la enfermedad como hiperestructura de proceso molecular". bioRxiv 10.1101 / 573402 .
- ^ a b Ruiz-Bañobre J, Kandimalla R, Goel A (28/03/2019). "Biomarcadores predictivos en cáncer colorrectal metastásico: una revisión sistemática" . Oncología de precisión JCO . 3 (3): 1–17. doi : 10.1200 / PO.18.00260 . PMC 7446314 . PMID 32914007 .
- ^ a b Oldenhuis CN, Oosting SF, Gietema JA, de Vries EG (mayo de 2008). "Valor pronóstico versus predictivo de biomarcadores en oncología". Revista europea del cáncer . 44 (7): 946–53. doi : 10.1016 / j.ejca.2008.03.006 . PMID 18396036 .
- ^ a b c "Diccionario de términos del cáncer del NCI" . Instituto Nacional del Cáncer . 2011-02-02 . Consultado el 17 de febrero de 2020 .
- ^ Wang Q, Chaerkady R, Wu J, Hwang HJ, Papadopoulos N, Kopelovich L, et al. (Febrero de 2011). "Proteínas mutantes como biomarcadores específicos del cáncer" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 108 (6): 2444–9. Código bibliográfico : 2011PNAS..108.2444W . doi : 10.1073 / pnas.1019203108 . PMC 3038743 . PMID 21248225 .
- ^ Nalejska E, Mączyńska E, Lewandowska MA (junio de 2014). "Biomarcadores pronósticos y predictivos: herramientas en oncología personalizada" . Diagnóstico y terapia molecular . 18 (3): 273–84. doi : 10.1007 / s40291-013-0077-9 . PMC 4031398 . PMID 24385403 .
- ^ a b Schubert AD, Channah Broner E, Agrawal N, London N, Pearson A, Gupta A, et al. (Febrero de 2020). "Descubrimiento de mutación mitocondrial somática mediante secuenciación ultra profunda del genoma mitocondrial revela heterogeneidad tumoral espacial en carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello" . Letras de cáncer . 471 : 49–60. doi : 10.1016 / j.canlet.2019.12.006 . PMC 6980748 . PMID 31830557 .
- ^ a b c d e f La red de investigación de detección temprana: investigación traslacional para identificar el cáncer temprano y el riesgo de cáncer: informe inicial . Washington, DC 2000. hdl : 2027 / mdp.39015049497442 .
- ^ "El estudio de prueba de concepto del desarrollo de biomarcadores en ratones proporciona una hoja de ruta para un enfoque similar en humanos" . www.fredhutch.org . 2011-07-19 . Consultado el 13 de mayo de 2015 .
- ^ Aizpurua-Olaizola O, Toraño JS, Falcon-Perez JM, Williams C, Reichardt N, Boons GJ (marzo de 2018). "Espectrometría de masas para el descubrimiento de biomarcadores de glucanos". Tendencias en química analítica . 100 : 7-14. doi : 10.1016 / j.trac.2017.12.015 .
- ^ "Perspectivas de salud ambiental. 105 / SUPP.4" . HathiTrust . Consultado el 17 de febrero de 2020 .
- ^ Biomarcadores de trastornos psiquiátricos. Editorial: Springer US doi : 10.1007 / 978-0-387-79251-4 Copyright: 2009 ISBN 978-0-387-79250-7 (impreso) 978-0-387-79251-4 (en línea)
- ^ a b c Hostettler FD (1991). Investigación geoquímica de un derrame de petróleo en la Bahía de San Francisco, California . Menlo Park, CA: Departamento del Interior de EE. UU., Servicio geológico. hdl : 2027 / uc1.31210025025220 .
- ^ Carson R (2000). Primavera silenciosa . ISBN 978-0-14-118494-4. OCLC 934630161 .
- ^ a b c d Amiard-Triquet C, Amiard JC, Rainbow PS, eds. (19 de abril de 2016). Biomarcadores ecológicos . Prensa CRC. doi : 10.1201 / b13036 . ISBN 978-0-429-11149-5.
- ^ Aronson JK (mayo de 2005). "Biomarcadores y criterios de valoración sustitutos" . Revista británica de farmacología clínica . 59 (5): 491–4. doi : 10.1111 / j.1365-2125.2005.02435.x . PMC 1884846 . PMID 15842546 .
- ^ Porter KA (agosto de 1957). "Efecto de inyecciones homólogas de médula ósea en conejos irradiados con x" . Revista Británica de Patología Experimental . 38 (4): 401–12. PMC 2082598 . PMID 13460185 .
- ^ Basu PK, Miller I, Ormsby HL (marzo de 1960). "Cromatina sexual como marcador celular biológico en el estudio del destino de los trasplantes de córnea". Revista Estadounidense de Oftalmología . 49 (3): 513-5. doi : 10.1016 / 0002-9394 (60) 91653-6 . PMID 13797463 .
- ^ "Marcadores biológicos en la investigación en salud ambiental. Comité de Marcadores Biológicos del Consejo Nacional de Investigaciones" . Perspectivas de salud ambiental . 74 : 3-9. 1987-10-01. doi : 10.1289 / ehp.87743 . ISSN 0091-6765 .
- ^ McCarthy JF, Shugart LR (18 de enero de 2018). "Marcadores biológicos de contaminación ambiental". Biomarcadores de contaminación ambiental . Prensa CRC. págs. 3-14. doi : 10.1201 / 9781351070263-2 . ISBN 978-1-351-07026-3.
- ^ Agotar MH (2020-01-29). "La base racional para el uso de biomarcadores como herramientas ecotoxicológicas". Biomarcadores no destructivos en vertebrados . Prensa CRC. págs. 271–295. doi : 10.1201 / 9780367813703-20 . ISBN 978-0-367-81370-3.
- ^ Van Gestel CA, Van Brummelen TC (agosto de 1996). "La incorporación del concepto de biomarcadores en ecotoxicología exige una redefinición de términos". Ecotoxicología . 5 (4): 217-25. doi : 10.1007 / bf00118992 . PMID 24193812 . S2CID 195240026 .
- ^ Strimbu K, Tavel JA (noviembre de 2010). "¿Qué son los biomarcadores?" . Opinión actual sobre el VIH y el sida . 5 (6): 463–6. doi : 10.1097 / COH.0b013e32833ed177 . PMC 3078627 . PMID 20978388 .
- ^ Gagné F, Blaise C, Costan G, Gagnon P, Chan HM (agosto de 2000). "Biomarcadores en mejillones cebra (Dreissena polymorpha) para la evaluación y seguimiento de la calidad del agua del río San Lorenzo (Canadá)". Toxicología acuática . 50 (1–2): 51–71. doi : 10.1016 / s0166-445x (99) 00094-6 . PMID 10930650 .
- ^ Smolders R, Voets J, Bervoets L, Blust R, Wepener V (15 de julio de 2005). "Biomonitoreo activo (ABM) por translocación de moluscos bivalvos". Enciclopedia del agua . John Wiley & Sons, Inc. doi : 10.1002 / 047147844x.wq16 . ISBN 0-471-47844-X.