La coagulasa es una enzima proteica producida por varios microorganismos que permite la conversión de fibrinógeno en fibrina . En el laboratorio , se utiliza para distinguir entre diferentes tipos de aislados de Staphylococcus . Es importante destacar que, S. aureus es generalmente de coagulasa positiva, lo que significa que una prueba de coagulasa positivo indicaría la presencia de S. aureus o cualquiera de los otros 11 coagulasa positivos estafilococos . [1] En cambio, una prueba de coagulasa negativa mostraría la presencia de organismos coagulasa negativos como S. epidermidis oS. saprophyticus . Sin embargo, ahora se sabe que no todos los S. aureus son coagulasa positivos. [2] [3]
También es producido por Yersinia pestis . [4]
La coagulasa reacciona con la protrombina en la sangre. El complejo resultante se llama estafilotrombina , que permite que la enzima actúe como una proteasa para convertir el fibrinógeno, una proteína plasmática producida por el hígado, en fibrina. Esto da como resultado la coagulación de la sangre. La coagulasa está fuertemente unida a la superficie de la bacteria S. aureus y puede cubrir su superficie con fibrina al entrar en contacto con la sangre. El coágulo de fibrina puede proteger a la bacteria de la fagocitosis y aislarla de otras defensas del huésped. [5] Por tanto, la capa de fibrina puede hacer que las bacterias sean más virulentas. La coagulasa unida es parte de la familia más grande de proteínas adhesinas MSCRAMM .
Prueba de coagulasa
La prueba de la coagulasa se ha utilizado tradicionalmente para diferenciar Staphylococcus aureus de coagulasa negativos estafilococos . S. aureus produce dos formas de coagulasa (es decir, coagulasa unida y coagulasa libre). La coagulasa unida, también conocida como "factor de aglutinación" , se puede detectar mediante una prueba de coagulasa en portaobjetos, y la coagulasa libre se puede detectar mediante una prueba de coagulasa en tubo.
Prueba de diapositivas
Se realiza una prueba de coagulasa en portaobjetos con un control negativo para descartar la autoaglutinación. Se colocan dos gotas de solución salina en el portaobjetos etiquetado con el número de muestra, Prueba (T) y control (C). Las dos gotas de solución salina se emulsionan con el organismo de prueba usando un bucle de alambre, alambre recto o palo de madera. Se coloca una gota de plasma ( se recomienda plasma de conejo anticoagulado con EDTA ) [6] en la gota de solución salina inoculada correspondiente a la prueba y se mezcla bien, luego el portaobjetos se balancea suavemente durante unos 10 segundos.
- Si es "positivo", se observará aglutinación macroscópica en el plasma en 10 segundos, sin aglutinación en la gota de solución salina.
- Si es 'negativo', no se observarán agrupaciones.
Si la prueba de coagulasa en portaobjetos es negativa, debe realizarse una prueba de tubo como confirmación. La acumulación de ambas gotas es una indicación de autoaglutinación, por lo que se debe realizar una prueba en tubo. La prueba de tubo no se realiza en todas las instituciones, pero la mayor parte del resultado depende de los hemocultivos del laboratorio.
Prueba de tubo
La prueba de tubo utiliza plasma de conejo que ha sido inoculado con una colonia de estafilococos (es decir, cocos grampositivos que son catalasa positivos). A continuación, el tubo se incuba a 37 ° C durante 1,5 horas. Si es negativo, la incubación continúa hasta 18 horas.
- Si es 'positivo' (p. Ej., La colonia sospechosa es S. aureus ), el plasma se coagulará, [7] resultando en un coágulo (a veces el coágulo es tan pronunciado que el líquido se solidificará por completo).
- Si es "negativo", el plasma permanece líquido. El resultado negativo puede ser S. epidermidis, pero solo una prueba de identificación más detallada puede confirmarlo, utilizando pruebas bioquímicas como en los métodos de pruebas de índice de perfil analítico . Se puede percibir un falso negativo si no se deja enfriar la muestra durante unos 30 minutos a temperatura ambiente o 10 minutos en el congelador, dado que el suero puede derretirse. Si es realmente negativo, el suero permanecerá líquido después de enfriarse.
- Lista de estafilococos coagulasa positivos: Staphylococcus aureus subsp. anaerobio , S. aureus subsp. aureus , S. delphini , S. hyicus , S. intermedius , S. lutrae y Staphylococcus schleiferi subsp. coagulanos .
- Lista de estafilococos coagulasa negativos de importancia clínica: S. saprophyticus , S. cohnii subsp. cohnii , S. cohnii subsp. urealyticum , S. captitus subsp. captitus , S. warneri , S.hominis , S.epidermidis , S. caprae y S.lugdunensis
Referencias
- ^ Becker et al., 2014. PMID: 25278577
- ^ Ryan KJ, Ray CG (editores) (2004). Sherris Medical Microbiology (4ª ed.). McGraw Hill. ISBN 0-8385-8529-9 .
- ^ PreTest, Cirugía, 12a ed., P.88
- ^ " coagulasa " en el Diccionario médico de Dorland
- ^ Tortora, Gerard J .; Funke, Berdell R .; Caso, Christine L. (2013). Microbiología: una introducción (11 ed.). Glenview, IL: Pearson Education Inc. pág. 434. ISBN 978-0-321-73360-3.
- ^ A. Forbes, Betty; Daniel F.Sahm; Alice S. Weissfeld (1998). Microbiología diagnóstica de BAILEY & SCOTT (décima ed.). Don Ladig. págs. 430–431 . ISBN 0-8151-2535-6.
- ^ " prueba de coagulasa " en el Diccionario médico de Dorland
enlaces externos
- Prueba de coagulasa en tubo - video de plasma de conejo
- Coagulasa en los encabezados de temas médicos (MeSH) de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE .
- Procedimiento de prueba de coagulasa