Digoxigenina


Nombres

Nombre IUPAC preferido 4 - [(1 R , 3a S , 3b R , 5a R , 7 S , 9a S , 9b S , 11 R , 11a S ) -3a, 7,11-Trihidroxi-9a, 11a-dimetilhexadecahidro- 1H- ciclopenta [ a ] fenantren-1-il] furan-2 (5 H ) -ona
Identificadores
Número CAS	1672-46-4^Y
CHEBI	CHEBI: 42098^Y
CHEMBL	ChEMBL1153^Y
ChemSpider	14728^Y
Tarjeta de información ECHA	100.015.279
PubChem CID	15478
UNII	NQ1SX9LNAU^Y
Tablero CompTox ( EPA )	DTXSID6051778
InChI EnChI = 1S / C23H34O5 / c1-21-7-5-15 (24) 10-14 (21) 3-4-17-18 (21) 11-19 (25) 22 (2) 16 (6-8- 23 (17,22) 27) 13-9-20 (26) 28-12-13 / h9,14-19,24-25,27H, 3-8,10-12H2,1-2H3 / t14-, 15 +, 16-, 17-, 18 +, 19-, 21 +, 22 +, 23 + / m1 / s1^Y Clave: SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N^Y EnChI = 1 / C23H34O5 / c1-21-7-5-15 (24) 10-14 (21) 3-4-17-18 (21) 11-19 (25) 22 (2) 16 (6-8- 23 (17,22) 27) 13-9-20 (26) 28-12-13 / h9,14-19,24-25,27H, 3-8,10-12H2,1-2H3 / t14-, 15 +, 16-, 17-, 18 +, 19-, 21 +, 22 +, 23 + / m1 / s1 Clave: SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNEBN
Propiedades
Fórmula química	C ₂₃ H ₃₄ O ₅
Masa molar	390,51 g / mol
log P	2.57510 ^[1]
Salvo que se indique lo contrario, los datos se proporcionan para materiales en su estado estándar (a 25 ° C [77 ° F], 100 kPa).
Y verificar ( ¿qué es ?)^Ynorte
Referencias de Infobox

La digoxigenina (DIG) es un esteroide que se encuentra exclusivamente en las flores y hojas de las plantas Digitalis purpurea , Digitalis orientalis y Digitalis lanata (dedalera), donde se une a los azúcares para formar los glucósidos (por ejemplo, Lanatoside C ). ^[2]

Uso en biotecnología

La digoxigenina es un hapteno , una molécula pequeña con alta antigenicidad , que se usa en muchas aplicaciones de biología molecular de manera similar a otros haptenos populares como el 2,4-dinitrofenol , la biotina y la fluoresceína . Normalmente, la digoxigenina se introduce químicamente ( conjugación ) en biomoléculas (proteínas, ácidos nucleicos) para ser detectada en ensayos posteriores. La K _d de la interacción digoxigenina-anticuerpo se ha estimado en ~ 12 nM ^[3] (comparar con K _d ~ 0,1 pM para la interacción biotina-estreptavidina ^[4] ).

Proteínas de unión a DIG . Tinberg y col. diseñó proteínas artificiales que se unen a DIG. Su mejor aglutinante, DIG10.3, era una proteína de 141 aminoácidos que se unía a DIG con una constante de disociación (K _d ) de 541 (+/- 193) pM. ^[5]

Los anticuerpos anti-digoxigenina con altas afinidades y especificidad se utilizan en una variedad de inmunoensayos biológicos (por ejemplo, ELISA ). Los anticuerpos se marcan con tintes, enzimas o fluorescencia, de forma directa o secundaria, para su visualización y detección.

Por tanto, la digoxigenina es un inmunomarcador de uso general y, en particular, un marcador inmunohistoquímico estándar para la hibridación in situ . ^[6]^[7] En este caso, se conjuga con una única especie de nucleósido trifosfato de ARN (típicamente uridina ), que luego se incorpora al ARN (una " ribosonda ") a medida que es sintetizado por la maquinaria celular.

Permite realizar:

sondas de hibridación in situ no radiactivas sensibles para detectar ácidos nucleicos en plantas, capaces de detectar 1 µg de ADN plasmídico. ^[8]
conjugados péptido-DIG, es decir, ensayo de bradicinina mediante inmunoensayos de quimioluminiscencia muy sensibles. ^[9]
marcadores fluorescentes y marcados con DIG para inmunoensayos competitivos, es decir, para limitar la detección de digoxina, un fármaco utilizado para curar la arritmia cardíaca, hasta 0,2 ng mL ^-1 . ^[10]
La digoxigenina se puede conjugar con azúcares para estudiar los eventos de glicosilación , ^[11] incluso en sistemas biológicos.

Ver también

Inmunotinción

Referencias

^ "Digoxigenina" . Ficha de seguridad de datos del material . ChemSrc.
^ Polya G (2003). Objetivos bioquímicos de compuestos bioactivos vegetales . Nueva York: CRC Press. ISBN 978-0415308298.
^ Tetin SY, Matayoshi ED (agosto de 2002). "Medición de la afinidad del anticuerpo y realización de inmunoensayo a nivel de molécula única". Bioquímica analítica . 307 (1): 84–91. doi : 10.1016 / S0003-2697 (02) 00011-8 .
^ Duan X. "Cuantificación de las afinidades y cinética de interacciones de proteínas utilizando biosensores de nanocables de silicio" . Nanotecnología de la naturaleza . doi : 10.1038 / nnano.2012.82 . PMC 4180882 .
^ Tinberg CE, Khare SD, Dou J, Doyle L, Nelson JW, Schena A, Jankowski W, Kalodimos CG, Johnsson K, Stoddard BL, Baker D (septiembre de 2013). "Diseño computacional de proteínas de unión a ligando con alta afinidad y selectividad" . Naturaleza . 501 (7466): 212–216. doi : 10.1038 / nature12443 . PMC 3898436 . PMID 24005320 .
^ Eisel D, Grünewald-Janho S, Krushen B, eds. (2002). Aplicación DIG Manual para no radiactivo in situ La hibridación (3ª ed.). Penzberg: Roche Diagnostics.
^ Hauptmann G, Gerster T (agosto de 1994). "Hibridación in situ de montaje completo de dos colores para embriones de vertebrados y Drosophila". Tendencias en Genética . 10 (8): 266. doi : 10.1016 / 0168-9525 (90) 90008-T . PMID 7940754 .
^ Hart SM, Basu C (abril de 2009). "Optimización de un sistema de inmunoensayo basado en digoxigenina para la detección de genes en Arabidopsis thaliana" (pdf) . Revista de Técnicas Biomoleculares . 20 (2): 96–100. PMC 2685603 . PMID 19503620 .
^ Décarie A, Drapeau G, Closset J, Couture R, Adam A (1994). "Desarrollo de péptido marcado con digoxigenina: aplicación al inmunoensayo con quimioluminoenzimas de bradicinina en tejidos inflamados". Péptidos . 15 (3): 511–8. doi : 10.1016 / 0196-9781 (94) 90214-3 . PMID 7937327 .
^ Mayilo S, Ehlers B, Wunderlich M, Klar TA, Josel HP, Heindl D, Nichtl A, Kürzinger K, Feldmann J (julio de 2009). "Inmunoensayo competitivo de digoxigenina homogéneo basado en la extinción de la fluorescencia por nanopartículas de oro". Analytica Chimica Acta . 646 (1–2): 119–22. doi : 10.1016 / j.aca.2009.05.023 . PMID 19523564 .
^ Goodarzi MT, Rafiq M, Turner G (mayo de 1995). "Un inmunoensayo multipocillo mejorado usando lectinas marcadas con digoxigenina para estudiar la glicosilación de glicoproteínas purificadas". Transacciones de la sociedad bioquímica . 23 (2): 168S. doi : 10.1042 / bst023168s . PMID 7672194 .

[chemsrc-1] "Digoxigenina" . Ficha de seguridad de datos del material . ChemSrc.

[2] Polya G (2003). Objetivos bioquímicos de compuestos bioactivos vegetales . Nueva York: CRC Press. ISBN 978-0415308298.

[3] Tetin SY, Matayoshi ED (agosto de 2002). "Medición de la afinidad del anticuerpo y realización de inmunoensayo a nivel de molécula única". Bioquímica analítica . 307 (1): 84–91. doi : 10.1016 / S0003-2697 (02) 00011-8 .

[4] Duan X. "Cuantificación de las afinidades y cinética de interacciones de proteínas utilizando biosensores de nanocables de silicio" . Nanotecnología de la naturaleza . doi : 10.1038 / nnano.2012.82 . PMC 4180882 .

[5] Tinberg CE, Khare SD, Dou J, Doyle L, Nelson JW, Schena A, Jankowski W, Kalodimos CG, Johnsson K, Stoddard BL, Baker D (septiembre de 2013). "Diseño computacional de proteínas de unión a ligando con alta afinidad y selectividad" . Naturaleza . 501 (7466): 212–216. doi : 10.1038 / nature12443 . PMC 3898436 . PMID 24005320 .

[6] Eisel D, Grünewald-Janho S, Krushen B, eds. (2002). Aplicación DIG Manual para no radiactivo in situ La hibridación (3ª ed.). Penzberg: Roche Diagnostics.

[7] Hauptmann G, Gerster T (agosto de 1994). "Hibridación in situ de montaje completo de dos colores para embriones de vertebrados y Drosophila". Tendencias en Genética . 10 (8): 266. doi : 10.1016 / 0168-9525 (90) 90008-T . PMID 7940754 .

[8] Hart SM, Basu C (abril de 2009). "Optimización de un sistema de inmunoensayo basado en digoxigenina para la detección de genes en Arabidopsis thaliana" (pdf) . Revista de Técnicas Biomoleculares . 20 (2): 96–100. PMC 2685603 . PMID 19503620 .

[9] Décarie A, Drapeau G, Closset J, Couture R, Adam A (1994). "Desarrollo de péptido marcado con digoxigenina: aplicación al inmunoensayo con quimioluminoenzimas de bradicinina en tejidos inflamados". Péptidos . 15 (3): 511–8. doi : 10.1016 / 0196-9781 (94) 90214-3 . PMID 7937327 .

[10] Mayilo S, Ehlers B, Wunderlich M, Klar TA, Josel HP, Heindl D, Nichtl A, Kürzinger K, Feldmann J (julio de 2009). "Inmunoensayo competitivo de digoxigenina homogéneo basado en la extinción de la fluorescencia por nanopartículas de oro". Analytica Chimica Acta . 646 (1–2): 119–22. doi : 10.1016 / j.aca.2009.05.023 . PMID 19523564 .

[11] Goodarzi MT, Rafiq M, Turner G (mayo de 1995). "Un inmunoensayo multipocillo mejorado usando lectinas marcadas con digoxigenina para estudiar la glicosilación de glicoproteínas purificadas". Transacciones de la sociedad bioquímica . 23 (2): 168S. doi : 10.1042 / bst023168s . PMID 7672194 .

[1]