El D-RNA del virus de la bronquitis infecciosa es un elemento de RNA conocido como RNA defectuoso o D-RNA. Se cree que este elemento es esencial para la replicación viral y el empaquetamiento eficiente de las partículas del virus de la bronquitis infecciosa aviar (IBV). [1]
D-RNA del virus de la bronquitis infecciosa | |
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![]() Estructura secundaria prevista y conservación de la secuencia de IBV_D-RNA | |
Identificadores | |
Símbolo | IBV_D-ARN |
Rfam | RF00385 |
Otros datos | |
Tipo de ARN | Cis-reg |
Dominio (s) | Virus |
ENTONCES | Entonces: 0000233 |
Estructuras PDB | PDBe |
El D-ARN de coronavirus , como el del IBV, se produce durante una alta multiplicidad de infección y contiene secuencias que actúan en cis que son necesarias para la replicación viral. [2] [3] Si bien no está claro exactamente cómo se produce el D-ARN del IBV, se cree que se sintetiza de manera similar al ARNm subgenómico (ARNm sg), dejando la mayor parte de la secuencia genómica fuera del producto. [4] Además, el ARNm sg también se puede sintetizar a partir del ARN-D del IBV, aunque el mecanismo de ese proceso aún se desconoce en gran medida. [4]
El ARN-D de IBV se utiliza a menudo en el enfoque de genética inversa para inducir experimentalmente la expresión génica heteróloga y la mutagénesis específica del sitio del genoma del coronavirus. [5] [2] [3] Sin embargo, se necesita una secuencia asociada a la traducción (TAS), que normalmente se utiliza para transcribir ARNm sg y se deriva del gen 5 de la cepa Beaudette del IBV, como promotor para regular la expresión génica heteróloga. . [6] También se cree que TAS puede programar algo de ARN-D de IBV para sintetizar ARNm sg, que son necesarios para la síntesis de proteínas génicas homólogas. [4] En particular, el IBV D-RNA CD-61 se utiliza para producir de forma experimental vacunas de IBV recombinantes . [2] [7] El D-RNA CD-61 se creó a partir del IBV D-RNA CD-91 de origen natural, que se produce mediante múltiples pases de IBV de alta concentración en células de riñón de pollo (CK). [2] El IBV D-RNA CD-61 resultó de mutagénesis por deleción de CD-91 y carece de gran parte del genoma, pero conserva las secuencias necesarias para la replicación y empaquetamiento de partículas virales en presencia de un virus auxiliar . [2]
Un método particularmente prometedor de expresión génica heteróloga mediada por ARN-D del IBV utiliza el sistema dependiente del virus auxiliar para promover la inmunidad al IBV. El virus auxiliar identifica y responde a las señales dentro del D-RNA del IBV que son responsables de la replicación y empaquetamiento de las partículas del IBV. Se cree que esas secuencias están contenidas dentro de las UTR 5 'y 3' del D-RNA. [7] El análisis de las partículas de IBV empaquetadas reveló que el cambio de secuencia líder ocurre entre el D-RNA y los virus auxiliares del IBV, lo que se observó de manera similar en el coronavirus bovino . [6] [8] Además, se encontró que el TAS del D-RNA del IBV contenía una secuencia de consenso que puede aceptar la secuencia líder cambiada y también puede estar involucrada en la expresión del mRNA a partir del D-RNA. [6]
Con el sistema dependiente del virus auxiliar, el D-ARN del IBV que contiene chIFN-gamma se usó con éxito para inducir la expresión de interferón gamma de pollo en células CK infectadas con IBV para producir una posible inmunidad contra el IBV aviar, que es un patógeno altamente infeccioso de pollos que causa complicaciones respiratorias, reproductivas y de crecimiento. [3] También se demostró que el chIFN-gamma biológicamente activo se secreta en el líquido alantónico de embriones de pollo in vivo , lo que demuestra que la inducción de citocinas y, por lo tanto, una respuesta inmune, puede inducirse en organismos vivos además de en células cultivadas. [3] El uso de IBV D-RNA como vector para crear vacunas contra el IBV es de importancia económica. Debido al tropismo del IBV que se dirige específicamente a los pollos, las vacunas recombinantes del IBV pueden proporcionar seguridad económica para las granjas avícolas responsables de la producción de huevos y carne en todo el mundo.
Ver también
- Región 3 del ARN de interferencia (DI) defectuoso del virus del tombus
Referencias
- ^ Dalton K, Casais R, Shaw K, Estribos K, Evans S, Britton P, Brown TD, Cavanagh D (enero de 2001). "Secuencias que actúan en cis necesarias para la replicación y empaquetado defectuoso del ARN del virus de la bronquitis infecciosa por coronavirus" . Revista de Virología . 75 (1): 125-133. doi : 10.1128 / JVI.75.1.125-133.2001 . PMC 113905 . PMID 11119581 .
- ^ a b c d e Britton, Paul; Estribos, Kathleen; Dalton, Kevin; Shaw, Kathleen; Evans, Sharon; Neuman, Benjamin; Paloma, Brian; Casais, Rosa; Cavanagh, Dave (2001). Lavi, Ehud; Weiss, Susan R .; Hingley, Susan T. (eds.). Los Nidovirus . Avances en Medicina y Biología Experimental. 494 . Springer EE. UU. págs. 507–512. doi : 10.1007 / 978-1-4615-1325-4_73 . ISBN 978-1-4613-5498-7. PMID 11774515 .
- ^ a b c d Hackney K, Cavanagh D, Kaiser P, Britton P (mayo de 2003). "Expresión in vitro e in ovo de interferón gamma de pollo por un ARN defectuoso del virus de la bronquitis infecciosa del coronavirus aviar" . Revista de Virología . 77 (10): 5694–5702. doi : 10.1128 / JVI.77.10.5694-5702.2003 . PMC 154032 . PMID 12719562 .
- ^ a b c Dove B, Cavanagh D, Britton P (marzo de 2004). "La presencia de una secuencia del sitio de entrada del ribosoma interno del virus de la encefalomiocarditis en los ARN defectuosos del virus de la bronquitis infecciosa aviar anula el rescate por el virus auxiliar" . Revista de Virología . 78 (6): 2711–2721. doi : 10.1128 / JVI.78.6.2711-2721.2004 . PMC 353753 . PMID 14990691 .
- ^ Evans S, Cavanagh D, Britton P (diciembre de 2000). "Utilización de recombinantes del virus de la viruela aviar para generar ARN defectuosos del virus de la bronquitis infecciosa por coronavirus" . La Revista de Virología General . 81 (Parte 12): 2855–2865. doi : 10.1099 / 0022-1317-81-12-2855 . PMID 11086116 .
- ^ a b c Stirrups K, Shaw K, Evans S, Dalton K, Casais R, Cavanagh D, Britton P (julio de 2000). "Expresión de genes reporteros del ARN defectuoso CD-61 del virus de la bronquitis infecciosa por coronavirus" . La Revista de Virología General . 81 (Pt 7): 1687–1698. doi : 10.1099 / 0022-1317-81-7-1687 . PMID 10859373 .
- ^ a b Estribos, K .; Shaw, K .; Evans, S .; Dalton, K .; Cavanagh, D .; Britton, P. (1998). Rescate de IBV D-RNA por cepas de virus auxiliares heterólogos . Avances en Medicina y Biología Experimental . 440 . págs. 259-264. doi : 10.1007 / 978-1-4615-5331-1_33 . ISBN 978-1-4419-7310-8. ISSN 0065-2598 . PMID 9782290 .
- ^ Stirrups K, Shaw K, Evans S, Dalton K, Cavanagh D, Britton P (marzo de 2000). "El cambio de líder se produce durante el rescate de ARN defectuosos por cepas heterólogas del virus de la bronquitis infecciosa por coronavirus" . La Revista de Virología General . 81 (Parte 3): 791–801. doi : 10.1099 / 0022-1317-81-3-791 . PMID 10675417 .
enlaces externos
- Página de D-RNA del virus de la bronquitis infecciosa en Rfam