El ensayo de proteínas de Lowry es un ensayo bioquímico para determinar el nivel total de proteína en una solución . La concentración de proteína total se muestra mediante un cambio de color de la solución de muestra en proporción a la concentración de proteína, que luego se puede medir utilizando técnicas colorimétricas . Lleva el nombre del bioquímico Oliver H. Lowry que desarrolló el reactivo en la década de 1940. Su artículo de 1951 que describe la técnica es el artículo más citado en la literatura científica, citado más de 300.000 veces. [1] [2] [3]
El método combina las reacciones de los iones de cobre con los enlaces peptídicos en condiciones alcalinas ( prueba de Biuret ) con la oxidación de residuos de proteínas aromáticas . El método de Lowry se basa en la reacción de Cu + , producido por la oxidación de enlaces peptídicos, con el reactivo de Folin-Ciocalteu (una mezcla de ácido fosfotúngstico y ácido fosfomolíbdico en la reacción de Folin-Ciocalteu). El mecanismo de reacción no se comprende bien, pero implica la reducción del reactivo de Folin-Ciocalteu y la oxidación de residuos aromáticos (principalmentetriptófano , también tirosina ). Los experimentos han demostrado que la cisteína también es reactiva al reactivo. Por lo tanto, los residuos de cisteína en la proteína probablemente también contribuyan a la absorbancia observada en el ensayo de Lowry. [4] El resultado de esta reacción es una molécula de color azul intenso conocida como azul de heteropolimolibdeno. [5] La concentración del reactivo de Folin reducido (azul de heteropolimolibdeno) se mide por absorbancia a 660 nm. [6] Como resultado, la concentración total de proteína en la muestra se puede deducir de la concentración de residuos de triptófano y tirosina que reducen el reactivo de Folin-Ciocalteu.
El método fue propuesto por primera vez por Lowry en 1951. El ensayo del ácido bicinconínico y el ensayo Hartree-Lowry son modificaciones posteriores del procedimiento original de Lowry.