En biología de membranas , la fusión es el proceso mediante el cual dos bicapas lipídicas inicialmente distintas fusionan sus núcleos hidrófobos , lo que da como resultado una estructura interconectada. Si esta fusión procede completamente a través de ambas valvas de ambas bicapas, se forma un puente acuoso y los contenidos internos de las dos estructuras pueden mezclarse. Alternativamente, si solo una valva de cada bicapa está involucrada en el proceso de fusión, se dice que las bicapas están hemifundidas. En la hemifusión, los componentes lipídicos de la valva exterior de las dos bicapas pueden mezclarse, pero las valvas internas siguen siendo distintas. Los contenidos acuosos encerrados por cada bicapa también permanecen separados.
La fusión está involucrada en muchos procesos celulares, particularmente en eucariotas, ya que la célula eucariota está ampliamente subdividida por membranas de bicapa lipídica. La exocitosis , la fertilización de un óvulo por el esperma y el transporte de productos de desecho al lisosoma son algunos de los muchos procesos eucariotas que dependen de alguna forma de fusión. La fusión también es un mecanismo importante para el transporte de lípidos desde su sitio de síntesis hasta la membrana donde se necesitan. Incluso la entrada de patógenos puede regirse por la fusión, ya que muchos virus recubiertos de bicapa tienen proteínas de fusión dedicadas para entrar en la célula huésped.
Mecanismo lipídico
Hay cuatro pasos fundamentales en el proceso de fusión, aunque cada uno de estos pasos en realidad representa una secuencia compleja de eventos. [1] Primero, las membranas involucradas deben agregarse, acercándose entre sí dentro de varios nanómetros. En segundo lugar, las dos bicapas deben entrar en contacto muy estrecho (en unos pocos angstroms). Para lograr este estrecho contacto, las dos superficies deben deshidratarse al menos parcialmente, ya que el agua superficial unida normalmente presente hace que las bicapas se repelan fuertemente a esta distancia. En tercer lugar, debe desarrollarse una desestabilización en un punto entre las dos bicapas, induciendo una reordenación muy localizada de las dos bicapas. Finalmente, a medida que crece este defecto puntual, los componentes de las dos bicapas se mezclan y difunden lejos del lugar de contacto. Dependiendo de si se produce hemifusión o fusión completa, el contenido interno de las membranas también puede mezclarse en este punto.
Los mecanismos exactos detrás de esta compleja secuencia de eventos siguen siendo un tema de debate. Para simplificar el sistema y permitir un estudio más definitivo, se han realizado muchos experimentos in vitro con vesículas lipídicas sintéticas. Estos estudios han demostrado que los cationes divalentes juegan un papel crítico en el proceso de fusión al unirse a lípidos cargados negativamente como fosfatidilserina , fosfatidilglicerol y cardiolipina . [2] Una función de estos iones en el proceso de fusión es proteger la carga negativa en la superficie de la bicapa, disminuyendo la repulsión electrostática y permitiendo que las membranas se acerquen entre sí. Sin embargo, este no es claramente el único papel, ya que existe una diferencia ampliamente documentada en la capacidad del Mg 2+ frente al Ca 2+ para inducir la fusión. Aunque el Mg 2+ inducirá una agregación extensa, no inducirá la fusión, mientras que el Ca 2+ inducirá ambos. [3] Se ha propuesto que esta discrepancia se debe a una diferencia en el grado de deshidratación. Según esta teoría, los iones de calcio se unen con más fuerza a los lípidos cargados, pero con menos fuerza al agua. El desplazamiento resultante de calcio por agua desestabiliza la interfaz lípido-agua y promueve el contacto íntimo entre las capas. [4] Una hipótesis alternativa propuesta recientemente es que la unión del calcio induce una tensión lateral desestabilizadora . [5] Cualquiera que sea el mecanismo de fusión inducida por calcio, la interacción inicial es claramente electrostática, ya que los lípidos bipolares no son susceptibles a este efecto. [6] [7]
En el proceso de fusión, el grupo de lípidos no solo participa en la densidad de carga, sino que también puede afectar la deshidratación y la nucleación de defectos. Estos efectos son independientes de los efectos de los iones. La presencia del grupo de cabeza sin carga fosfatidiletanolamina (PE) aumenta la fusión cuando se incorpora a una bicapa de fosfatidilcolina. Este fenómeno ha sido explicado por algunos como un efecto de deshidratación similar a la influencia del calcio. [8] El grupo de cabeza PE se une al agua con menos fuerza que el PC y, por lo tanto, puede permitir una aposición cercana más fácilmente. Una explicación alternativa es que la naturaleza física más que química de la PE puede ayudar a inducir la fusión. Según la hipótesis de fusión del tallo, se debe formar un puente muy curvado entre las dos bicapas para que se produzca la fusión. [9] Dado que el PE tiene un grupo de cabezas pequeño y forma fácilmente fases de micelas invertidas , debería, de acuerdo con el modelo de tallo, promover la formación de estos tallos. [10] Otra evidencia citada a favor de esta teoría es el hecho de que se ha demostrado que ciertas mezclas de lípidos solo apoyan la fusión cuando se elevan por encima de la temperatura de transición de estas fases invertidas. [11] [12] Este tema también sigue siendo controvertido, e incluso si hay una estructura curva presente en el proceso de fusión, existe un debate en la literatura sobre si se trata de una fase extendida cúbica, hexagonal o más exótica. [13]
Proteínas de fusión
La situación se complica aún más cuando se considera la fusión in vivo, ya que la fusión biológica casi siempre está regulada por la acción de proteínas asociadas a la membrana . Las primeras de estas proteínas que se estudiaron fueron las proteínas de fusión viral, que permiten que un virus envuelto inserte su material genético en la célula huésped (los virus envueltos son aquellos rodeados por una bicapa lipídica; algunos otros tienen solo una cubierta proteica). En términos generales, hay dos clases de proteínas de fusión viral: ácidas e independientes del pH. [1] Las proteínas de fusión independientes del pH pueden funcionar en condiciones neutrales y fusionarse con la membrana plasmática , lo que permite la entrada del virus en la célula. Los virus que utilizan este esquema incluyen el VIH , el sarampión y el herpes . Las proteínas de fusión ácidas, como las que se encuentran en la influenza , solo se activan cuando se encuentran en el pH bajo de los endosomas ácidos y primero deben endocitosarse para ingresar a la célula.
Las células eucariotas utilizan clases completamente diferentes de proteínas de fusión, las mejor estudiadas de las cuales son las SNARE . Las proteínas SNARE se utilizan para dirigir todo el tráfico intracelular vesicular . A pesar de años de estudio, todavía se desconoce mucho sobre la función de esta clase de proteínas. De hecho, todavía existe un debate activo sobre si las SNARE están vinculadas al acoplamiento temprano o si participan más tarde en el proceso de fusión facilitando la hemifusión. [15] Incluso una vez que se aclare el papel de las SNARE u otras proteínas específicas, es poco probable una comprensión unificada de las proteínas de fusión, ya que existe una enorme diversidad de estructura y función dentro de estas clases, y se conservan muy pocos temas. [dieciséis]
Fusión en la práctica de laboratorio
En estudios de biología molecular y celular, a menudo es deseable inducir artificialmente la fusión. Aunque esto se puede lograr con la adición de calcio como se discutió anteriormente, este procedimiento a menudo no es factible porque el calcio regula muchos otros procesos bioquímicos y su adición sería un factor de confusión importante. Además, como se mencionó, el calcio induce agregación masiva y fusión. La adición de polietilenglicol (PEG) provoca una fusión sin agregación significativa o alteración bioquímica. Este procedimiento ahora se usa ampliamente, por ejemplo, fusionando células B con células de mieloma . [17] El " hibridoma " resultante de esta combinación expresa un anticuerpo deseado según lo determinado por la célula B involucrada, pero se inmortaliza debido al componente de mieloma. El mecanismo de fusión de PEG no se ha identificado definitivamente, pero algunos investigadores creen que el PEG, al unir una gran cantidad de moléculas de agua, disminuye efectivamente la actividad química del agua y, por lo tanto, deshidrata los grupos de lípidos. [18] La fusión también se puede inducir artificialmente mediante electroporación en un proceso conocido como electrofusión. Se cree que este fenómeno es el resultado de los bordes energéticamente activos formados durante la electroporación, que pueden actuar como el punto de defecto local para el crecimiento del tallo nucleado entre dos bicapas. [19]
Alternativamente, se pueden usar sistemas modelo inspirados en SNARE para inducir la fusión de la membrana de las vesículas lipídicas. En esos sistemas, el ADN complementario anclado a la membrana, [20] [21] PNA, [22] péptidos, [23] u otras moléculas [24] se "comprimen" juntas y acercan las membranas. Estos sistemas podrían tener aplicaciones prácticas en el futuro, por ejemplo, en la administración de fármacos. [25] El sistema probablemente mejor investigado [26] consiste en péptidos formadores de espirales de carga complementaria (uno suele llevar un exceso de lisinas cargadas positivamente y, por lo tanto, se denomina péptido K, y el otro, ácidos glutámicos cargados negativamente, llamado péptido E). [27] Curiosamente, se descubrió que no solo la formación de espirales entre los dos péptidos es necesaria para que se produzca la fusión de la membrana, sino también que el péptido K interactúa con la superficie de la membrana y causa defectos locales. [28]
Ensayos para medir la fusión de membranas
Hay dos niveles de fusión: mezcla de lípidos de membrana y mezcla de contenidos. Los ensayos de fusión de membranas informan sobre la mezcla de lípidos de membrana o la mezcla de los contenidos acuosos de las entidades fusionadas.
Ensayos para medir la mezcla de lípidos
Los ensayos que evalúan la mezcla de lípidos utilizan efectos dependientes de la concentración, como la transferencia de energía no radiativa, la extinción de la fluorescencia y la formación de exímeros de pireno.
- Transferencia de energía de NBD-rodamina: [29] En este método, la membrana marcada con NBD (donante) y rodamina (aceptor) se combinan con una membrana no etiquetada. Cuando NBD y Rhodamine están dentro de una cierta distancia, ocurre la transferencia de energía de resonancia de Förster (FRET). Después de la fusión, la transferencia de energía de resonancia (FRET) disminuye cuando aumenta la distancia promedio entre las sondas, mientras que aumenta la fluorescencia NBD.
- Formación de excímeros de pireno: las longitudes de onda de emisión de excímeros y monómeros de pireno son diferentes. La longitud de onda de emisión del monómero es de alrededor de 400 nm y la del excímero es de alrededor de 470 nm. En este método, la membrana etiquetada con pireno se combina con la membrana no etiquetada. El pireno se autoasocia en la membrana y luego el pireno excitado excita a otros pirenos. Antes de la fusión, la mayor parte de la emisión es emisión de excímeros. Después de la fusión, la distancia entre las sondas aumenta y la proporción de emisión de excímeros disminuye. [ cita requerida ]
- Auto-apagado de octadecil rodamina B : [30] Este ensayo se basa en el auto-apagado de octadecil rodamina B. El auto-apagado de octadecil rodamina B ocurre cuando la sonda se incorpora a los lípidos de la membrana en concentraciones de 1 a 10 por ciento en moles [31] porque Los dímeros de rodamina apagan la fluorescencia. En este método, la rodamina marcada con una membrana se combina con una membrana sin marcar. La fusión con membranas no marcadas da como resultado la dilución de la sonda, que se acompaña de un aumento de la fluorescencia. [32] [33] El principal problema de este ensayo es la transferencia espontánea.
Ensayos para medir la mezcla de contenido
La mezcla de contenidos acuosos de vesículas como resultado de lisis, fusión o permeabilidad fisiológica puede detectarse fluorométricamente usando trazadores solubles de bajo peso molecular.
- Ensayos de extinción de fluorescencia con ANTS / DPX: [34] [35] ANTS es un fluoróforo polianiónico, mientras que DPX es un extintor catiónico. El ensayo se basa en la extinción por colisión de ellos. Las poblaciones de vesículas separadas se cargan con ANTS o DPX, respectivamente. Cuando ocurre la mezcla de contenido, ANTS y DPX chocan y la fluorescencia de ANTS se monitorea a 530 nm, con excitación a 360 nm se apaga. Este método se realiza a pH ácido y alta concentración.
- Ensayos de mejora de la fluorescencia con Tb 3+ / DPA: [36] [37] Este método se basa en el hecho de que el quelato de Tb 3+ / DPA es 10.000 veces más fluorescente que el Tb 3+ solo. En el Tb 3+ ensayo / DPA, las poblaciones de vesículas separadas se cargan con TBCL 3 o DPA. La formación de quelato de Tb 3+ / DPA puede usarse para indicar la fusión de vesículas. Este método es bueno para membranas sin proteínas. [ cita requerida ]
- Ensayo de ADN de molécula única. [38] Se encapsuló en la vesícula v-SNARE una horquilla de ADN compuesta por un tallo de 5 pares de bases y un bucle de politimidina que está marcado con un donante (Cy3) y un aceptor (Cy5) en los extremos del tallo. Encapsulamos por separado múltiples cadenas de ADN de poliadenosina sin marcar en la vesícula t-SNARE. Si las dos vesículas, ambas de ~ 100 nm de diámetro, se acoplan y se forma un poro de fusión lo suficientemente grande entre ellas, las dos moléculas de ADN deben hibridar, abriendo la región del tallo de la horquilla y cambiando la eficiencia de transferencia de energía de resonancia de Förster (FRET) ( E) entre Cy3 y Cy5 de un valor alto a uno bajo.
Ver también
- Fuerzas entre capas en la fusión de membranas
- Mecanismo de fusión
- Fusión celular
Referencias
- ↑ a b Yeagle, PL (1993). Las membranas de las células (2ª ed.). San Diego: Prensa académica.[ página necesaria ]
- ^ Papahadjopoulos, Demetrios; Nir, Shlomo; Düzgünes, Nejat (1990). "Mecanismos moleculares de fusión de membranas inducida por calcio". Revista de Bioenergética y Biomembranas . 22 (2): 157–79. doi : 10.1007 / BF00762944 . PMID 2139437 . S2CID 1465571 .
- ^ Leventis, Rania; Gagne, Jeannine; Fuller, Nola; Rand, R .; Silvius, J. (1986). "Fusión inducida por catión divalente y segregación lateral de lípidos en vesículas de ácido fosfatidilcolina-fosfatídico". Bioquímica . 25 (22): 6978–87. doi : 10.1021 / bi00370a600 . PMID 3801406 .
- ^ Wilschut, Jan; Duezguenes, Nejat; Papahadjopoulos, Demetrios (1981). "Especificidad calcio / magnesio en la fusión de membranas: cinética de agregación y fusión de vesículas de fosfatidilserina y el papel de la curvatura bicapa". Bioquímica . 20 (11): 3126–33. doi : 10.1021 / bi00514a022 . PMID 7248275 .
- ^ Chanturiya, A; Scaria, P; Woodle, MC (2000). "El papel de la tensión lateral de la membrana en la fusión de membranas inducida por calcio". The Journal of Membrane Biology . 176 (1): 67–75. doi : 10.1007 / s00232001076 . PMID 10882429 . S2CID 2209769 .
- ^ Pannuzzo, Martina; Jong, De; Djurre, H .; Raudino, Antonio; Marrink Siewert, J. (2014). "Simulación de fusión de membranas mediada por calcio y polietilenglicol" (PDF) . J. Chem. Phys . 140 (12): 124905. Código Bibliográfico : 2014JChPh.140l4905P . doi : 10.1063 / 1.4869176 . hdl : 11370 / 78e66c44-d236-4336-9b4a-151d52ffa961 . PMID 24697479 .
- ^ Papahadjopoulos, D .; Poste, G .; Schaeffer, BE; Vail, WJ (1974). "Fusión de membranas y segregación molecular en vesículas de fosfolípidos". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranas . 352 (1): 10-28. doi : 10.1016 / 0005-2736 (74) 90175-8 . PMID 4859411 .
- ^ Düzgünes, Nejat; Wilschut, Jan; Fraley, Robert; Papahadjopoulos, Demetrios (1981). "Estudios sobre el mecanismo de fusión de membranas. Papel de la composición del grupo de cabeza en la fusión inducida por calcio y magnesio de vesículas de fosfolípidos mixtos". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranas . 642 (1): 182–95. doi : 10.1016 / 0005-2736 (81) 90148-6 . PMID 7225377 .
- ^ Markin, VS; Kozlov, MM; Borovjagin, VL (1984). "Sobre la teoría de la fusión de membranas. El mecanismo del tallo" (PDF) . Fisiología general y biofísica . 3 (5): 361–77. PMID 6510702 .
- ^ Chernomordik, Leonid V .; Kozlov, Michael M. (2003). "Interacción proteína-lípido en la fusión y fisión de membranas biológicas" . Revisión anual de bioquímica . 72 : 175–207. doi : 10.1146 / annurev.biochem.72.121801.161504 . PMID 14527322 .
- ^ Nir, S .; Bentz, J .; Wilschut, J .; Duzgunes, N. (1983). "Agregación y fusión de vesículas de fosfolípidos". Progreso en ciencia de superficies . 13 (1): 1–124. Código Bibliográfico : 1983PrSS ... 13 .... 1N . doi : 10.1016 / 0079-6816 (83) 90010-2 .
- ^ Ellens, Harma; Bentz, Joe; Szoka, Francis C. (1986). "Fusión de liposomas que contienen fosfatidiletanolamina y mecanismo de transición de fase L.alpha.-HII". Bioquímica . 25 (14): 4141–7. doi : 10.1021 / bi00362a023 . PMID 3741846 .
- ^ Holopainen, Juha M .; Lehtonen, Jukka YA; Kinnunen, Paavo KJ (1999). "Evidencia de la conformación de fosfolípidos extendida en fusión de membranas y hemifusión" . Revista biofísica . 76 (4): 2111–20. Código Bibliográfico : 1999BpJ .... 76.2111H . doi : 10.1016 / S0006-3495 (99) 77367-4 . PMC 1300184 . PMID 10096906 .
- ^ Georgiev, Danko D .; Glazebrook, James F. (2007). "Procesamiento subneuronal de información por ondas solitarias y procesos estocásticos" . En Lyshevski, Sergey Edward (ed.). Manual de electrónica nano y molecular . Serie Nano y Microingeniería. Prensa CRC. págs. 17–1–17–41. doi : 10.1201 / 9781420008142.ch17 (inactivo 2021-01-10). ISBN 978-0-8493-8528-5.Mantenimiento de CS1: DOI inactivo a partir de enero de 2021 ( enlace )
- ^ Chen, Yu A .; Scheller, Richard H. (2001). "Fusión de membranas mediada por SNARE". Nature Reviews Biología celular molecular . 2 (2): 98–106. doi : 10.1038 / 35052017 . PMID 11252968 . S2CID 205012830 .
- ^ White, JM (1990). "Proteínas de fusión de membranas celulares y virales". Revisión anual de fisiología . 52 : 675–97. doi : 10.1146 / annurev.ph.52.030190.003331 . PMID 2184772 .
- ^ Köhler, G .; Milstein, C. (1975). "Cultivos continuos de células fusionadas que secretan anticuerpos de especificidad predefinida". Naturaleza . 256 (5517): 495–7. Código Bibliográfico : 1975Natur.256..495K . doi : 10.1038 / 256495a0 . PMID 1172191 . S2CID 4161444 .
- ^ Lentz, Barry R. (1994). "Fusión de membrana inducida por polímeros: mecanismo potencial y relación con los eventos de fusión celular". Química y Física de Lípidos . 73 (1-2): 91-106. doi : 10.1016 / 0009-3084 (94) 90176-7 . PMID 8001186 .
- ^ Jordan, CA; Neumann, E .; Sembradoras, AE, eds. (1989). Electroporación y electrofusión en biología celular . Saltador. ISBN 978-0-306-43043-5.[ página necesaria ]
- ^ Löffler, Philipp MG; Ries, Oliver; Rabe, Alexander; Okholm, Anders H .; Thomsen, Rasmus P .; Kjems, Jørgen; Vogel, Stefan (2017). "Una cascada de fusión de liposomas programada por ADN" . Angewandte Chemie International Edition . 56 (43): 13228-13231. doi : 10.1002 / anie.201703243 . ISSN 1521-3773 . PMID 28598002 .
- ^ Stengel, Gudrun; Zahn, Rafael; Höök, Fredrik (1 de agosto de 2007). "Fusión programable inducida por ADN de vesículas de fosfolípidos" . Revista de la Sociedad Química Estadounidense . 129 (31): 9584–9585. doi : 10.1021 / ja073200k . ISSN 0002-7863 . PMID 17629277 .
- ^ Lygina, Antonina S .; Meyenberg, Karsten; Jahn, Reinhard; Diederichsen, Ulf (2011). "Híbrido de ácido nucleico péptido / péptido de dominio transmembrana como modelo de una proteína SNARE en fusión de vesículas" . Angewandte Chemie International Edition . 50 (37): 8597–8601. doi : 10.1002 / anie.201101951 . hdl : 11858 / 00-001M-0000-000F-41FF-2 . ISSN 1521-3773 . PMID 21786370 .
- ^ Litowski, JR; Hodges, RS (4 de octubre de 2002). "Diseño de bobinas helicoidales α-helicoidales heterodiméricas de dos hebras: EFECTOS DE LA HIDROFOBICIDAD Y LA PROPENSIDAD α-HELICOIDAL SOBRE EL PLEGADO, ESTABILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE LAS PROTEÍNAS" . Revista de Química Biológica . 277 (40): 37272–37279. doi : 10.1074 / jbc.M204257200 . ISSN 0021-9258 . PMID 12138097 . S2CID 84379119 .
- ^ Kumar, Pawan; Guha, Samit; Diederichsen, Ulf (2015). "Fusión de membrana mediada por análogos de proteína SNARE" . Revista de ciencia de péptidos . 21 (8): 621–629. doi : 10.1002 / psc.2773 . ISSN 1099-1387 . PMID 25858776 . S2CID 23718905 .
- ^ Yang, Jian; Bahreman, Azadeh; Daudey, Geert; Bussmann, Jeroen; Olsthoorn, René CL; Kros, Alexander (28 de septiembre de 2016). "Entrega de fármacos a través de la fusión de la membrana celular usando liposomas modificados con lipopeptidos" . Ciencia Central ACS . 2 (9): 621–630. doi : 10.1021 / acscentsci.6b00172 . ISSN 2374-7943 . PMC 5043431 . PMID 27725960 .
- ^ Robson Marsden, Hana; Elbers, Nina A .; Bomans, Paul HH; Sommerdijk, Nico AJM; Kros, Alexander (2009). "Un modelo de SNARE reducido para la fusión de membranas" . Angewandte Chemie International Edition . 48 (13): 2330–2333. doi : 10.1002 / anie.200804493 . ISSN 1521-3773 . PMID 19222065 .
- ^ Lindhout, Darrin A .; Litowski, Jennifer R .; Mercier, Pascal; Hodges, Robert S .; Sykes, Brian D. (2004). "Estructura de la solución de RMN de una bobina en espiral heterodimérica de novo altamente estable" . Biopolímeros . 75 (5): 367–375. doi : 10.1002 / bip.20150 . ISSN 1097-0282 . PMID 15457434 . S2CID 28856028 .
- ^ Rabe, Martin; Aisenbrey, Christopher; Pluhackova, Kristyna; De Wert, Vincent; Boyle, Aimee L .; Bruggeman, Didjay F .; Kirsch, Sonja A .; Böckmann, Rainer A .; Kros, Alejandro; Raap, Jan; Bechinger, Burkhard (15 de noviembre de 2016). "Un péptido en espiral que forma bicapas lipídicas tras la fusión" . Revista biofísica . 111 (10): 2162–2175. Código Bibliográfico : 2016BpJ ... 111.2162R . doi : 10.1016 / j.bpj.2016.10.010 . ISSN 0006-3495 . PMC 5113151 . PMID 27851940 .
- ^ Golpeado, Douglas K .; Hoekstra, Dick; Pagano, Richard E. (1981). "Uso de transferencia de energía de resonancia para monitorear la fusión de membranas". Bioquímica . 20 (14): 4093–9. doi : 10.1021 / bi00517a023 . PMID 7284312 .
- ^ Hoekstra, Dick; De Boer, Tiny; Klappe, Karin; Wilschut, enero (1984). "Método de fluorescencia para medir la cinética de fusión entre membranas biológicas". Bioquímica . 23 (24): 5675–81. doi : 10.1021 / bi00319a002 . PMID 6098295 .
- ^ MacDonald, Ruby I (1990). "Características del autoapagado de la fluorescencia de la rodamina conjugada con lípidos en membranas" . La revista de química biológica . 265 (23): 13533–9. doi : 10.1016 / S0021-9258 (18) 77380-8 . PMID 2380172 .
- ^ Rubin, RJ; Chen, YD (1990). "Difusión y redistribución de moléculas lipídicas entre membranas en sistemas de fusión de células de virus y células de células" . Revista biofísica . 58 (5): 1157–67. Código Bibliográfico : 1990BpJ .... 58.1157R . doi : 10.1016 / S0006-3495 (90) 82457-7 . PMC 1281061 . PMID 2291940 .
- ^ Chen, YD; Rubin, RJ; Szabo, A. (1993). "Cinética de extinción de fluorescencia de complejos de fusión unicelular-célula" . Revista biofísica . 65 (1): 325–33. Código Bibliográfico : 1993BpJ .... 65..325C . doi : 10.1016 / S0006-3495 (93) 81076-2 . PMC 1225727 . PMID 8369440 .
- ^ Smolarsky, Moshe; Teitelbaum, Dvora; Sela, Michael; Gitler, Carlos (1977). "Un método fluorescente simple para determinar la lisis inmune de liposomas mediada por complemento". Revista de métodos inmunológicos . 15 (3): 255–65. doi : 10.1016 / 0022-1759 (77) 90063-1 . PMID 323363 .
- ^ Ellens, H; Bentz, J; Szoka, FC (1985). "Fusión y desestabilización de liposomas inducida por H + - y Ca2 +". Bioquímica . 24 (13): 3099–106. doi : 10.1021 / bi00334a005 . PMID 4027232 .
- ^ Wilschut, Jan; Papahadjopoulos, Demetrios (1979). "Fusión inducida por Ca2 + de vesículas de fosfolípidos monitoreada por mezcla de contenidos acuosos". Naturaleza . 281 (5733): 690–2. Código bibliográfico : 1979Natur.281..690W . doi : 10.1038 / 281690a0 . PMID 551288 . S2CID 4353081 .
- ^ Wilschut, Jan; Duzgunes, Nejat; Fraley, Robert; Papahadjopoulos, Demetrios (1980). "Estudios sobre el mecanismo de fusión de membranas: cinética de la fusión inducida por iones calcio de vesículas de fosfatidilserina seguida de un nuevo ensayo para mezclar el contenido de vesículas acuosas". Bioquímica . 19 (26): 6011-21. doi : 10.1021 / bi00567a011 . PMID 7470445 .
- ^ Diao, Jiajie; Su, Zengliu; Ishitsuka, Yuji; Lu, Bin; Lee, Kyung Suk; Lai, Ying; Shin, Yeon-Kyun; Ja, Taekjip (2010). "Un ensayo de mezcla de contenido de vesícula única para la fusión de membrana mediada por SNARE" . Comunicaciones de la naturaleza . 1 (5): 1–6. Código Bibliográfico : 2010NatCo ... 1E..54D . doi : 10.1038 / ncomms1054 . PMC 3518844 . PMID 20975723 .