NK-92 es una línea celular inmortal que tiene características y características de las células asesinas naturales (NK) que toda persona tiene circulando en la sangre. Las células NK sanguíneas y las células NK-92 reconocen invasores como virus y hongos. Las células NK-92, como las células NK sanguíneas, pueden atacar a las células cancerosas si el tumor no ha crecido fuera de control. Las células NK-92 fueron aisladas y caracterizadas por el laboratorio de Hans Klingemann en la Agencia del Cáncer de la Columbia Británica en Vancouver, Canadá. Las células procedían de un paciente que tenía un linfoma de células NK , un tipo de linfoma poco común . Aunque se han clonado varias otras líneas de células NK, solo las células NK-92 pueden expandirse a números mayores y matar de manera consistente las células tumorales. [ cita requerida] Cuando las células NK-92 se unen a una célula cancerosa o infectada, secretan perforina, que perfora las células diana, seguida de granzimas, que inducen la apoptosis en las células diana. Las células NK-92 también atacan a las células cancerosas a través del sistema de ligando Fas-Fas y son capaces de producir citocinas que por sí mismas pueden matar las células cancerosas (como el TNF-alfa ) o estimular y expandir otras células inmunes como el interferón.
Licencia
La línea celular ha sido autorizada a NantKwest, Inc. y actualmente se está desarrollando en la clínica para terapia intravenosa en neoplasias hematológicas y tumores sólidos, para inyección intratumoral local, como células efectoras para destrucción mediada por anticuerpos a través de células modificadas con CD16 y como células efectoras para la destrucción específica del receptor de antígeno quimérico (CAR). La línea celular ha sido autorizada para aplicaciones no clínicas para Brink Biologics y para aplicaciones veterinarias para Coneksis.
El distribuidor autorizado de NantKwest es Brink Biologics, que hace que las células NK-92 y ciertas variantes genéticamente modificadas estén disponibles para ensayos de laboratorio e investigación in vivo, incluidos los ensayos ADCC que cuantifican la contribución de ADCC en el efecto terapéutico de los anticuerpos monoclonales (Neukopanel de Brink Biologics) y para otras aplicaciones de ensayos no clínicos.
En ensayos clínicos
Hasta ahora, tres ensayos clínicos de fase I, dirigidos por expertos en inmunoterapia adoptiva del cáncer, han arrojado excelentes resultados. Hans Klingemann y Sally Arai completaron el ensayo estadounidense en el Rush University Medical Center ( Chicago ) en pacientes con células renales y melanoma, [1] y Torsten Tonn, MD y Oliver Ottmann, MD completaron el ensayo europeo en la Universidad de Frankfurt en pacientes con varios neoplasias sólidas y hematológicas. [2] Armand Keating está completando [ ¿cuándo? ] la última cohorte de pacientes en el ensayo canadiense en el Hospital Princess Margaret en Toronto en pacientes con linfoma después de autotrasplantes de médula ósea. En los tres programas, las células NK-92 se administraron como una infusión intravenosa simple, se dosificaron dos o tres veces por ciclo de tratamiento y se administraron de forma ambulatoria.
Más importante aún, no hubo efectos secundarios de grado ≥ 2 durante o después de la infusión corta de células NK-92. La dosis máxima administrada en el ensayo de Frankfurt fue de 10-10 células / me2 x 2 infusiones, cada una con 48 horas de diferencia. El estudio de Chicago infundió células NK-92 a un máximo de 5 x 10e células / me2 x 3 infusiones, cada una con 48 horas de diferencia. Este no era el MTD, sino más bien el número de células que podían expandirse en bolsas de cultivo durante un período de cultivo de tres semanas. Las tecnologías alternativas de expansión celular (biorreactores) permitirán ampliar aún más el número de células NK-92 en una "huella" más pequeña. Se han observado informes anecdóticos de actividad antitumoral en los dos estudios de fase I completados en 6/11 pacientes con cáncer renal, 3/4 pacientes con cáncer de pulmón y 1/1 paciente con melanoma, todos con enfermedad muy avanzada. Además de la estabilización de la enfermedad y la regresión de las metástasis en los pulmones y los ganglios linfáticos , se redujo notablemente el dolor intenso asociado con las metástasis tumorales en varios pacientes, que habían sido refractarios a la quimioterapia estándar. El ensayo en curso en Toronto trata a pacientes con linfoma que han recaído después de un autotrasplante de células madre. Los resultados preliminares sugieren un beneficio significativo en varios pacientes.
Ingeniería genética
Las células NK-92 pueden modificarse genéticamente para reconocer y destruir células cancerosas humanas. Los linfocitos T modificados con receptor de antígeno quimérico (CAR) son populares en inmuno-oncología [ cita requerida ] , ya que han demostrado que la infusión de esas células modificadas puede lograr remisiones en algunos pacientes con leucemia aguda y crónica . [3] Por el contrario, las células NK (ya sea de sangre periférica o de cordón) no han generado suficiente interés como células efectoras citotóxicas diseñadas con CAR porque el grado de expansión de las células NK puede depender del donante y porque la eficiencia de la transfección, incluso con lentivirales o vectores retrovirales, es solo moderadamente eficiente. Las células NK-92, por otro lado, tienen una cinética de expansión predecible y se pueden cultivar en biorreactores a miles de millones de células en un par de semanas. Se pueden transfectar fácilmente con sobrenadante viral o con métodos físicos. Incluso el ARNm se puede transportar a las células con alta eficiencia.
Las células NK-92 también se han transfectado con un receptor Fc de alta afinidad (NK-92Fc) que es el principal receptor de los anticuerpos monoclonales para ejecutar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC), incluidos rituximab y ofatumumab . Basándose en esta variante, se ha desarrollado un ensayo llamado Neukopanel para cuantificar la ADCC de los anticuerpos monoclonales, [4] una tecnología que ha llamado la atención de varias empresas biotecnológicas y farmacéuticas [ ¿cuál? ] que utilizan Neukopanel para determinar la contribución de ADCC de sus anticuerpos monoclonales.
Referencias
- ^ Arai S, Meagher R, Swearingen M, et al. Infusión de la línea celular alogénica NK-92 en pacientes concáncer de células renales avanzado o melanoma : un ensayo de fase I. Citoterapia 2008; 10: 625-32
- ^ Tonn T, Becker S, Esser R, Schwabe D, Seifried E. Inmunoterapia celular de neoplasias malignas utilizando la línea celular clonal natural killer NK-92. J Hematother Stem Cell Res 2001; 10: 535-44.
- ^ Porter DL, Levine BL, Kalos M, Bagg A, June CH (agosto de 2011). "Células T modificadas por receptor de antígeno quimérico en leucemia linfoide crónica" . N. Engl. J. Med . 365 (8): 725–33. doi : 10.1056 / NEJMoa1103849 . PMC 3387277 . PMID 21830940 .
- ^ Weitzman J, Betancur M, Boissel L, Rabinowitz AP, Klein A, Klingemann H (agosto de 2009). "Contribución variable de los anticuerpos monoclonales a la ADCC en pacientes con leucemia linfocítica crónica". Leuk. Linfoma . 50 (8): 1361–8. doi : 10.1080 / 10428190903026500 . PMID 19562616 .