Autorradiografía
Una autorradiografía es una imagen en una película de rayos X o emulsión nuclear producida por el patrón de emisiones de desintegración (p. ej., partículas beta o rayos gamma ) de una distribución de una sustancia radiactiva . Alternativamente, la autorradiografía también está disponible como una imagen digital (autoradiografía digital), debido al reciente desarrollo de detectores de gas de centelleo [1] o sistemas de imágenes de fósforo de tierras raras. [2] La película o emulsión se coloca sobre la sección de tejido marcada para obtener la autorradiografía (también denominada autorradiografía). el auto-prefijo indica que la sustancia radiactiva está dentro de la muestra, a diferencia del caso de la historradiografía o microrradiografía, en el que la muestra se marca utilizando una fuente externa. Algunas autorradiografías se pueden examinar microscópicamente para localizar granos de plata (como en el interior o exterior de células u orgánulos), en lo que el proceso se denomina microautorradiografía. Por ejemplo, se utilizó microautorradiografía para examinar si la atrazina estaba siendo metabolizada por la planta de antocerote o por microorganismos epífitos en la capa de biopelícula que rodea la planta. [3]
En biología , esta técnica se puede utilizar para determinar la localización tisular (o celular) de una sustancia radiactiva, ya sea introducida en una vía metabólica, unida a un receptor [4] [5] o enzima, o hibridada con un ácido nucleico. [6] Las aplicaciones de la autorradiografía son amplias y van desde la biomedicina hasta las ciencias ambientales y la industria.
El uso de ligandos radiomarcados para determinar las distribuciones tisulares de los receptores se denomina autorradiografía del receptor in vivo o in vitro si el ligando se administra a la circulación (con posterior extracción y corte del tejido) o se aplica a las secciones de tejido, respectivamente. [7] Una vez que se conoce la densidad del receptor, la autorradiografía in vitro también se puede utilizar para determinar la distribución anatómica y la afinidad de un fármaco radiomarcado hacia el receptor. para in vitroautorradiografía, el radioligando se aplicó directamente sobre secciones de tejido congeladas sin administración al sujeto. Por lo tanto, no puede seguir completamente la situación de distribución, metabolismo y degradación en el cuerpo vivo. Pero debido a que el objetivo en las criosecciones está ampliamente expuesto y puede tener contacto directo con el radioligando, la autorradiografía in vitro sigue siendo un método rápido y fácil para detectar candidatos a fármacos, PET y ligandos SPECT . Los ligandos generalmente se marcan con 3 H ( tritio ), 18 F ( flúor ), 11 C ( carbono ) o 125 I ( yodo radioactivo ). Comparar conSe realizaron autorradiografías in vitro y ex vivo después de la administración de radioligando en el cuerpo, lo que puede disminuir los artefactos y estar más cerca del ambiente interno.
La distribución de transcritos de ARN en secciones de tejido mediante el uso de oligonucleótidos complementarios radiomarcados o ácidos ribonucleicos ("ribosondas") se denomina histoquímica de hibridación in situ . Los precursores radiactivos de ADN y ARN, [ 3H ] -timidina y [ 3H ] -uridina respectivamente, pueden introducirse en células vivas para determinar el momento de varias fases del ciclo celular. Las secuencias virales de ARN o ADN también se pueden localizar de esta manera. Estas sondas suelen estar marcadas con 32 P, 33 P o 35S. En el ámbito de la endocrinología conductual, la autorradiografía se puede utilizar para determinar la captación hormonal e indicar la ubicación del receptor; a un animal se le puede inyectar una hormona radiomarcada o el estudio se puede realizar in vitro .
La velocidad de replicación del ADN en una célula de ratón que crece in vitro se midió mediante autorradiografía como 33 nucleótidos por segundo. [8] La tasa de elongación del ADN del fago T4 en E. coli infectada con fago también se midió mediante autorradiografía como 749 nucleótidos por segundo durante el período de aumento exponencial del ADN a 37 °C. [9]
