Un anticuerpo de dominio único ( sdAb ), también conocido como nanocuerpo , es un fragmento de anticuerpo que consta de un único dominio de anticuerpo variable monomérico . Como un anticuerpo completo, puede unirse selectivamente a un antígeno específico . Con un peso molecular de solo 12 a 15 kDa , los anticuerpos de dominio único son mucho más pequeños que los anticuerpos comunes (150 a 160 kDa) que están compuestos por dos cadenas de proteínas pesadas y dos cadenas ligeras , e incluso más pequeños que los fragmentos Fab (~ 50 kDa , una cadena ligera y media cadena pesada) y fragmentos variables monocatenarios(~ 25 kDa, dos dominios variables, uno de una cadena ligera y otro de una pesada). [1]
Los primeros anticuerpos de dominio único se diseñaron a partir de anticuerpos de cadena pesada que se encuentran en los camélidos ; éstos se llaman V H fragmentos H . Los peces cartilaginosos también tienen anticuerpos de cadena pesada (IgNAR, 'receptor de nuevo antígeno de inmunoglobulina'), a partir de los cuales se pueden obtener anticuerpos de dominio único llamados fragmentos V NAR . [2] Un enfoque alternativo es dividir los dominios variables diméricos de la inmunoglobulina G común (IgG) de humanos o ratones en monómeros. Aunque la mayor parte de la investigación sobre anticuerpos de dominio único se basa actualmente en dominios variables de cadena pesada, también se ha demostrado que los nanocuerpos derivados de cadenas ligeras se unen específicamente a epítopos diana . [3]
Se ha demostrado que los anticuerpos de camélidos de dominio único son tan específicos como un anticuerpo normal y, en algunos casos, son más robustos. Además, se aíslan fácilmente utilizando el mismo procedimiento de cribado de fagos utilizado para los anticuerpos tradicionales, lo que les permite cultivar in vitro en grandes concentraciones. El tamaño más pequeño y el dominio único hacen que estos anticuerpos sean más fáciles de transformar en células bacterianas para la producción a granel, lo que los hace ideales para fines de investigación. [4]
Los anticuerpos de dominio único se están investigando para múltiples aplicaciones farmacéuticas y tienen potencial para su uso en el tratamiento del síndrome coronario agudo , el cáncer y la enfermedad de Alzheimer . [5] [6]
Propiedades
Un anticuerpo de dominio único es una cadena peptídica de aproximadamente 110 aminoácidos de longitud, que comprende un dominio variable (V H ) de un anticuerpo de cadena pesada o de una IgG común. Estos péptidos tienen una afinidad por los antígenos similar a la de los anticuerpos completos, pero son más resistentes al calor y estables frente a los detergentes y las altas concentraciones de urea . Los derivados de anticuerpos de camélidos y peces son menos lipofílicos y más solubles en agua, debido a su región determinante de complementariedad 3 (CDR3), que forma un bucle extendido (de color naranja en el diagrama de cinta anterior) que cubre el sitio lipofílico que normalmente se une a una cadena ligera. [7] [8] En contraste con los anticuerpos comunes, dos de los seis anticuerpos de dominio único sobrevivieron a una temperatura de 90 ° C (194 ° F) sin perder su capacidad para unirse a los antígenos en un estudio de 1999. [9] La estabilidad frente al ácido gástrico y las proteasas depende de la secuencia de aminoácidos. Se ha demostrado que algunas especies son activas en el intestino después de la aplicación oral, [10] [11] pero su baja absorción en el intestino impide el desarrollo de anticuerpos de dominio único administrados por vía oral sistémicamente activos.
La masa molecular comparativamente baja conduce a una mejor permeabilidad en los tejidos y a una vida media plasmática más corta , ya que se eliminan por vía renal . [1] A diferencia de los anticuerpos completos, no muestran citotoxicidad activada por el sistema del complemento porque carecen de una región Fc . Los sdAb derivados de camélidos y peces pueden unirse a antígenos ocultos que no son accesibles a los anticuerpos completos, por ejemplo, a los sitios activos de las enzimas . [12] Se ha demostrado que esta propiedad es el resultado de su bucle CDR3 extendido, que es capaz de penetrar en esos sitios enterrados. [8] [13] [12]
Producción
De anticuerpos de cadena pesada
Puede obtenerse un anticuerpo de dominio único mediante la inmunización de dromedarios , camellos , llamas , alpacas o tiburones con el antígeno deseado y el posterior aislamiento del ARNm que codifica los anticuerpos de cadena pesada. Mediante el uso de un método de construcción de bibliotecas basado en el ensamblaje de extensión por PCR y la autoligación (EASeL), se estableció una biblioteca de anticuerpos V NAR de gran tamaño con un tamaño de 1,2 × 10 10 a partir de tiburones nodriza ingenuos. [14] Las técnicas de detección como la presentación de fagos y la presentación de ribosomas ayudan a identificar los clones que se unen al antígeno. [15] [14]
De anticuerpos convencionales
Alternativamente, los anticuerpos de dominio único se pueden preparar a partir de IgG murina común , [16] de conejo [17] o humana con cuatro cadenas. [18] El proceso es similar, y comprende bibliotecas de genes de donantes inmunizados o no tratados previamente y técnicas de presentación para la identificación de los antígenos más específicos. Un problema con este enfoque es que la región de unión de la IgG común consta de dos dominios (V H y V L ), que tienden a dimerizarse o agregarse debido a su lipofilia. La monomerización generalmente se logra reemplazando los aminoácidos lipofílicos por hidrofílicos, pero a menudo resulta en una pérdida de afinidad por el antígeno. [19] Si se puede conservar la afinidad, los anticuerpos de dominio único también se pueden producir en E. coli , S. cerevisiae u otros organismos.
A partir de anticuerpos humanos de dominio único
En ocasiones, los seres humanos producen anticuerpos de dominio único mediante la creación aleatoria de un codón de parada en la cadena ligera. Los anticuerpos humanos de dominio único dirigidos a varios antígenos tumorales, incluida la mesotelina, [20] GPC2 [21] y GPC3 [22] [23], se generaron a partir de una biblioteca de presentación de fagos de dominio VH humano diseñada. [24] Los anticuerpos humanos de dominio único se han utilizado para crear inmunotoxinas (HN3-PE38, HN3-mPE24, HN3-T20) [23] [25] [26] y células T del receptor de antígeno quimérico (CAR) [21] para tratar el cáncer. El bloqueo del dominio de unión de Wnt en GPC3 por el anticuerpo de dominio único humano HN3 inhibe la activación de Wnt en las células de cáncer de hígado. [27]
Aplicaciones potenciales
Los anticuerpos de dominio único permiten una amplia gama de aplicaciones en biotecnología y uso terapéutico debido a su pequeño tamaño, producción simple y alta afinidad. [28] [29]
Biotecnológico y diagnóstico
La fusión de una proteína fluorescente a un nanocuerpo genera un llamado cromocuerpo . Los cromocuerpos se pueden usar para reconocer y rastrear objetivos en diferentes compartimentos de células vivas. Por lo tanto, pueden aumentar las posibilidades de la microscopía de células vivas y permitirán nuevos estudios funcionales. [30] El acoplamiento de un Nanocuerpo anti- GFP a una matriz monovalente, llamada GFP-nanotrap, permite el aislamiento de proteínas de fusión GFP y sus socios interactuantes para análisis bioquímicos adicionales. [31] La localización de una sola molécula con técnicas de imágenes de superresolución requiere la administración específica de fluoróforos en estrecha proximidad con una proteína objetivo. Debido a su gran tamaño, el uso de anticuerpos acoplados a colorantes orgánicos a menudo puede conducir a una señal engañosa debido a la distancia entre el fluoróforo y la proteína diana. La fusión de tintes orgánicos con nanocuerpos anti-GFP dirigidos a proteínas etiquetadas con GFP permite una resolución espacial nanométrica y un error de enlace mínimo debido al tamaño pequeño y la alta afinidad. [32] El dividendo de tamaño de los nanocuerpos también beneficia el estudio correlativo de microscopía electrónica de luz . Sin ningún agente de permeabilización, el citoplasma de las células fijadas químicamente son fácilmente accesibles a los nanocuerpos marcados con fluoróforo. Su pequeño tamaño también les permite penetrar más profundamente en muestras volumétricas que los anticuerpos normales. La alta calidad ultraestructural se conserva en el tejido del que se obtienen imágenes con microscopio de fluorescencia y luego con microscopio electrónico. Esto es especialmente útil para la investigación en neurociencia que requiere tanto el etiquetado molecular como la obtención de imágenes por microscopio electrónico. [33]
En aplicaciones de biosensores de diagnóstico , los nanocuerpos pueden usarse prospectivamente como una herramienta. Debido a su pequeño tamaño, se pueden acoplar más densamente en las superficies de los biosensores. Además de su ventaja para dirigirse a epítopos menos accesibles, su estabilidad conformacional también conduce a una mayor resistencia a las condiciones de regeneración de la superficie. Después de inmovilizar los anticuerpos de dominio único en las superficies del sensor, se probaron el antígeno prostático específico humano (hPSA). Los nanocuerpos superaron a los anticuerpos clásicos en la detección de concentraciones clínicamente significativas de hPSA. [34]
Para aumentar la probabilidad de cristalización de una molécula diana, los nanocuerpos se pueden utilizar como chaperonas de cristalización . Como proteínas auxiliares, pueden reducir la heterogeneidad conformacional uniendo y estabilizando solo un subconjunto de estados conformacionales. También pueden enmascarar superficies que interfieren con la cristalización mientras extienden regiones que forman contactos de cristal. [35] [29]
Terapéutico
Los anticuerpos de dominio único se han probado como una nueva herramienta terapéutica contra múltiples dianas. En ratones infectados con el subtipo H5N1 del virus de la influenza A , los nanocuerpos dirigidos contra la hemaglutinina suprimieron la replicación del virus H5N1 in vivo y redujeron la morbilidad y la mortalidad. [36] Se demostró que los nanocuerpos que se dirigen al dominio de unión al receptor celular de los factores de virulencia toxina A y toxina B de Clostridium difficile neutralizan los efectos citopáticos en fibroblastos in vitro . [37] Los conjugados de nanocuerpos que reconocen las células presentadoras de antígenos se han utilizado con éxito para la detección de tumores [38] o la administración de antígenos dirigida para generar una fuerte respuesta inmunitaria. [39]
Se han desarrollado y probado con éxito anticuerpos de dominio único disponibles por vía oral contra la diarrea inducida por E. coli en lechones. [11] Otras enfermedades del tracto gastrointestinal , como la enfermedad inflamatoria intestinal y el cáncer de colon , también son posibles objetivos de los anticuerpos de dominio único disponibles por vía oral. [40]
Se han diseñado especies estables a los detergentes que se dirigen a una proteína de superficie de Malassezia furfur para su uso en champús anticaspa . [7]
Como método para la terapia fototérmica, los nanocuerpos que se unen al antígeno HER2 , que se sobreexpresa en las células de cáncer de mama y de ovario, se conjugaron con nanopartículas de oro ramificadas (ver figura). Las células tumorales se destruyeron fototérmicamente usando un láser en un entorno de prueba. [41]
El caplacizumab , un anticuerpo de dominio único dirigido al factor von Willebrand, se encuentra en ensayos clínicos para la prevención de la trombosis en pacientes con síndrome coronario agudo. [42] En septiembre de 2009 se inició un estudio de fase II que examina ALX-0081 en una intervención coronaria percutánea de alto riesgo . [43]
Ablynx espera que sus nanocuerpos puedan atravesar la barrera hematoencefálica y penetrar en grandes tumores sólidos más fácilmente que los anticuerpos completos, lo que permitiría el desarrollo de fármacos contra los cánceres cerebrales . [40]
Recientemente se ha identificado un nanocuerpo que se une estrechamente al dominio RBD de la proteína de pico de los betacoronavirus (incluido el SARS-CoV-2 que causa el COVID-19 ) y bloquea las interacciones de pico con el receptor celular ACE2 [44].
Se ha informado de la aplicación de varios anticuerpos de dominio único (nanocuerpos) para la prevención y el tratamiento de la infección por varios coronavirus humanos altamente patógenos (HPhCoV). Las perspectivas, la potencia y los desafíos de desplegar nanocuerpos para unir y neutralizar el SARS-CoV-2 y afines se han destacado recientemente. [45]
Referencias
- ↑ a b Harmsen MM, De Haard HJ (noviembre de 2007). "Propiedades, producción y aplicaciones de fragmentos de anticuerpos de un solo dominio de camélidos" . Microbiología y Biotecnología Aplicadas . 77 (1): 13-22. doi : 10.1007 / s00253-007-1142-2 . PMC 2039825 . PMID 17704915 .
- ^ Inglés H, Hong J, Ho M (enero de 2020). "Secuencias de anticuerpos de dominio único NAR, bibliotecas de fagos y posibles aplicaciones clínicas" . Terapéutica de anticuerpos . 3 (1): 1–9. doi : 10.1093 / abt / tbaa001 . PMC 7034638 . PMID 32118195 .
- ^ Möller A, Pion E, Narayan V, Ball KL (diciembre de 2010). "Activación intracelular del factor regulador de interferón-1 por nanocuerpos al dominio multifuncional (Mf1)" . La revista de química biológica . 285 (49): 38348–61. doi : 10.1074 / jbc.M110.149476 . PMC 2992268 . PMID 20817723 .
- ^ Ghannam A, Kumari S, Muyldermans S, Abbady AQ (marzo de 2015). "Nanocuerpos de camélidos con alta afinidad por el virus del moteado de la haba: una posible herramienta prometedora para inmunomodular la resistencia de las plantas contra los virus". Biología Molecular Vegetal . 87 (4–5): 355–69. doi : 10.1007 / s11103-015-0282-5 . PMID 25648551 .
- ^ "Los nanocuerpos presagian una nueva era en la terapia del cáncer" . Las noticias médicas. 12 de mayo de 2004.
- ^ "Pipeline" . Ablynx . Consultado el 20 de enero de 2010 .
- ^ a b Dolk E, van der Vaart M, Lutje Hulsik D, Vriend G, de Haard H, Spinelli S, et al. (Enero de 2005). "Aislamiento de fragmentos de anticuerpos de llama para la prevención de la caspa mediante presentación de fagos en champú" . Microbiología aplicada y ambiental . 71 (1): 442–50. doi : 10.1128 / AEM.71.1.442-450.2005 . PMC 544197 . PMID 15640220 .
- ^ a b Stanfield RL, Dooley H, Flajnik MF, Wilson IA (septiembre de 2004). "Estructura cristalina de una región V de anticuerpo de dominio único de tiburón en complejo con lisozima". Ciencia . 305 (5691): 1770–3. Código Bibliográfico : 2004Sci ... 305.1770S . doi : 10.1126 / science.1101148 . PMID 15319492 .
- ^ van der Linden RH, Frenken LG, de Geus B, Harmsen MM, Ruuls RC, Stok W, et al. (Abril de 1999). "Comparación de propiedades físico-químicas de fragmentos de anticuerpos de llama VHH y anticuerpos monoclonales de ratón". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Estructura de proteínas y enzimología molecular . 1431 (1): 37–46. doi : 10.1016 / S0167-4838 (99) 00030-8 . PMID 10209277 .
- ^ Harmsen MM, van Solt CB, Hoogendoorn A, van Zijderveld FG, Niewold TA, van der Meulen J (noviembre de 2005). "Fragmentos de anticuerpos de dominio único de llama específicos de fimbrias de Escherichia coli F4 inhiben eficazmente la adhesión bacteriana in vitro pero protegen mal contra la diarrea". Microbiología veterinaria . 111 (1–2): 89–98. doi : 10.1016 / j.vetmic.2005.09.005 . PMID 16221532 .
- ^ a b Harmsen MM, van Solt CB, van Zijderveld-van Bemmel AM, Niewold TA, van Zijderveld FG (septiembre de 2006). "Selección y optimización de fragmentos de anticuerpos de un solo dominio de llama proteolíticamente estables para inmunoterapia oral" . Microbiología y Biotecnología Aplicadas . 72 (3): 544–51. doi : 10.1007 / s00253-005-0300-7 . PMID 16450109 .
- ^ a b c Ho M (junio de 2018). "Editorial Inaugural: Buscando balas mágicas" . Terapéutica de anticuerpos . 1 (1): 1–5. doi : 10.1093 / abt / tby001 . PMC 6086361 . PMID 30101214 .
- ^ Desmyter A, Transue TR, Ghahroudi MA, Thi MH, Poortmans F, Hamers R, et al. (Septiembre de 1996). "Estructura cristalina de un fragmento de anticuerpo VH de un solo dominio de camello en complejo con lisozima". Biología estructural de la naturaleza . 3 (9): 803-11. doi : 10.1038 / nsb0996-803 . PMID 8784355 .
- ^ a b Feng M, Bian H, Wu X, Fu T, Fu Y, Hong J, et al. (Enero de 2019). "Biblioteca de anticuerpos de dominio único NAR de seis tiburones nodriza ingenuos" . Terapéutica de anticuerpos . 2 (1): 1–11. doi : 10.1093 / abt / tby011 . PMC 6312525 . PMID 30627698 .
- ^ Arbabi Ghahroudi M, Desmyter A, Wyns L, Hamers R, Muyldermans S (septiembre de 1997). "Selección e identificación de fragmentos de anticuerpos de dominio único de anticuerpos de cadena pesada de camello" . Cartas FEBS . 414 (3): 521–6. doi : 10.1016 / S0014-5793 (97) 01062-4 . PMID 9323027 .
- ^ Ward ES, Güssow D, Griffiths AD, Jones PT, Winter G (octubre de 1989). "Actividades de unión de un repertorio de dominios variables de inmunoglobulina individuales secretados de Escherichia coli". Naturaleza . 341 (6242): 544–6. Código Bibliográfico : 1989Natur.341..544W . doi : 10.1038 / 341544a0 . PMID 2677748 .
- ^ Feng R, Wang R, Hong J, Dower CM, Croix BS, Ho M (enero de 2020). "Aislamiento de anticuerpos de dominio único de conejo para B7-H3 mediante inmunización de proteínas y presentación de fagos" . Terapéutica de anticuerpos . 3 (1): 10–17. doi : 10.1093 / abt / tbaa002 . PMC 7052794 . PMID 32166218 .
- ^ Holt LJ, Herring C, Jespers LS, Woolven BP, Tomlinson IM (noviembre de 2003). "Anticuerpos de dominio: proteínas para terapia". Tendencias en biotecnología . 21 (11): 484–90. doi : 10.1016 / j.tibtech.2003.08.007 . PMID 14573361 .
- ^ Borrebaeck CA, Ohlin M (diciembre de 2002). "Evolución de anticuerpos más allá de la naturaleza". Biotecnología de la naturaleza . 20 (12): 1189–90. doi : 10.1038 / nbt1202-1189 . PMID 12454662 .
- ^ Tang Z, Feng M, Gao W, Phung Y, Chen W, Chaudhary A, et al. (Abril 2013). "Un anticuerpo de dominio único humano provoca una potente actividad antitumoral al dirigirse a un epítopo en la mesotelina cerca de la superficie de la célula cancerosa" . Terapéutica del cáncer molecular . 12 (4): 416–26. doi : 10.1158 / 1535-7163.MCT-12-0731 . PMC 3624043 . PMID 23371858 .
- ^ a b Li N, Fu H, Hewitt SM, Dimitrov DS, Ho M (agosto de 2017). "Dirigirse terapéuticamente al glipicano-2 a través de inmunotoxinas y receptores de antígenos quiméricos basados en anticuerpos de un solo dominio en el neuroblastoma" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 114 (32): E6623 – E6631. doi : 10.1073 / pnas.1706055114 . PMC 5559039 . PMID 28739923 .
- ^ Feng M, Gao W, Wang R, Chen W, Man YG, Figg WD, et al. (Marzo de 2013). "Dirigirse terapéuticamente al glipicano-3 a través de un anticuerpo de dominio único específico de conformación en el carcinoma hepatocelular" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 110 (12): E1083-91. Código bibliográfico : 2013PNAS..110E1083F . doi : 10.1073 / pnas.1217868110 . PMC 3607002 . PMID 23471984 .
- ^ a b Gao W, Tang Z, Zhang YF, Feng M, Qian M, Dimitrov DS, Ho M (marzo de 2015). "La inmunotoxina dirigida al glipicano-3 retrocede el cáncer de hígado a través de la inhibición dual de la síntesis de proteínas y la señalización de Wnt" . Comunicaciones de la naturaleza . 6 : 6536. Bibcode : 2015NatCo ... 6.6536G . doi : 10.1038 / ncomms7536 . PMC 4357278 . PMID 25758784 .
- ^ Chen W, Zhu Z, Feng Y, Xiao X, Dimitrov DS (octubre de 2008). "Construcción de una gran biblioteca de dominios de anticuerpos humanos mostrados en fagos con un andamio basado en un dominio variable de cadena pesada estable, altamente soluble y recién identificado" . Revista de Biología Molecular . 382 (3): 779–89. doi : 10.1016 / j.jmb.2008.07.054 . PMC 2551765 . PMID 18687338 .
- ^ Wang C, Gao W, Feng M, Pastan I, Ho M (mayo de 2017). "Construcción de una inmunotoxina, HN3-mPE24, dirigida al glipicano-3 para la terapia del cáncer de hígado" . Oncotarget . 8 (20): 32450–32460. doi : 10.18632 / oncotarget.10592 . PMC 5464801 . PMID 27419635 .
- ^ Fleming BD, Urban DJ, Hall M, Longerich T, Greten T, Pastan I, Ho M (septiembre de 2019). "La inmunotoxina anti-GPC3 diseñada, HN3-ABD-T20, produce regresión en xenoinjertos de cáncer de hígado de ratón a través de la retención prolongada de suero" . Hepatología . 71 (5): 1696-1711. doi : 10.1002 / hep.30949 . PMC 7069773 . PMID 31520528 .
- ^ Li N, Wei L, Liu X, Bai H, Ye Y, Li D, et al. (Octubre de 2019). "Un dominio rico en cisteína similar al rizado en Glypican-3 media la unión de Wnt y regula el crecimiento tumoral de carcinoma hepatocelular en ratones" . Hepatología . 70 (4): 1231-1245. doi : 10.1002 / hep.30646 . PMC 6783318 . PMID 30963603 .
- ^ Muyldermans S (2013). "Nanocuerpos: anticuerpos de dominio único naturales". Revisión anual de bioquímica . 82 : 775–97. doi : 10.1146 / annurev-biochem-063011-092449 . PMID 23495938 .
- ^ a b Gulati S, Jin H, Masuho I, Orban T, Cai Y, Perdón E, et al. (Mayo de 2018). "Dirigirse a la señalización del receptor acoplado a proteína G a nivel de proteína G con un inhibidor selectivo de nanocuerpos" . Comunicaciones de la naturaleza . 9 (1): 1996. Bibcode : 2018NatCo ... 9.1996G . doi : 10.1038 / s41467-018-04432-0 . PMC 5959942 . PMID 29777099 .
- ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Tillib S, Nowak D, Schermelleh L, Gahl A y col. (Noviembre de 2006). "Dirigir y rastrear antígenos en células vivas con nanocuerpos fluorescentes". Métodos de la naturaleza . 3 (11): 887–9. doi : 10.1038 / nmeth953 . PMID 17060912 .
- ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Muyldermans S, Schepers A, Cardoso MC, Leonhardt H (febrero de 2008). "Un nanotrap versátil para estudios bioquímicos y funcionales con proteínas de fusión fluorescentes" . Proteómica molecular y celular . 7 (2): 282–9. doi : 10.1074 / mcp.M700342-MCP200 . PMID 17951627 .
- ^ Ries J, Kaplan C, Platonova E, Eghlidi H, Ewers H (junio de 2012). "Un método simple y versátil para microscopía de superresolución basada en GFP a través de nanocuerpos". Métodos de la naturaleza . 9 (6): 582–4. doi : 10.1038 / nmeth.1991 . PMID 22543348 .
- ^ Fang T, Lu X, Berger D, Gmeiner C, Cho J, Schalek R, et al. (Diciembre de 2018). "Inmunotinción de nanocuerpos para microscopía electrónica y de luz correlacionada con la preservación de la ultraestructura" . Métodos de la naturaleza . 15 (12): 1029–1032. doi : 10.1038 / s41592-018-0177-x . PMC 6405223 . PMID 30397326 .
- ^ Saerens D, Frederix F, Reekmans G, Conrath K, Jans K, Brys L, et al. (Diciembre de 2005). "Ingeniería de anticuerpos de dominio único de camello y química de inmovilización para detección de antígeno específico de próstata humana". Química analítica . 77 (23): 7547–55. doi : 10.1021 / ac051092j . PMID 16316161 .
- ^ Koide S (agosto de 2009). "Ingeniería de chaperonas de cristalización recombinante" . Opinión actual en biología estructural . 19 (4): 449–57. doi : 10.1016 / j.sbi.2009.04.008 . PMC 2736338 . PMID 19477632 .
- ^ Ibañez LI, De Filette M, Hultberg A, Verrips T, Temperton N, Weiss RA, et al. (Abril de 2011). "Los nanocuerpos con actividad neutralizante in vitro protegen a los ratones contra la infección por el virus de la influenza H5N1" . La Revista de Enfermedades Infecciosas . 203 (8): 1063–72. doi : 10.1093 / infdis / jiq168 . PMID 21450996 .
- ^ Hussack G, Arbabi-Ghahroudi M, van Faassen H, Songer JG, Ng KK, MacKenzie R, Tanha J (marzo de 2011). "Neutralización de la toxina A de Clostridium difficile con anticuerpos de dominio único dirigidos al dominio de unión al receptor celular" . La revista de química biológica . 286 (11): 8961–76. doi : 10.1074 / jbc.M110.198754 . PMC 3058971 . PMID 21216961 .
- ^ Fang T, Duarte JN, Ling J, Li Z, Guzman JS, Ploegh HL (febrero de 2016). "Conjugados de nanocuerpo-fármaco αMHC-II definidos estructuralmente: un sistema terapéutico y de imágenes para el linfoma de células B" . Angewandte Chemie . 55 (7): 2416–20. doi : 10.1002 / anie.201509432 . PMC 4820396 . PMID 26840214 .
- ^ Fang T, Van Elssen CH, Duarte JN, Guzman JS, Chahal JS, Ling J, Ploegh HL (agosto de 2017). "El suministro de antígeno dirigido por un MHC VHH anti-clase II provoca inmunidad a MUC1 (Tn) enfocada" . Ciencia química . 8 (8): 5591–5597. doi : 10.1039 / c7sc00446j . PMC 5618788 . PMID 28970938 .
- ^ a b "Nanocuerpos" . Nanobody.org. 2006.
- ^ Van de Broek B, Devoogdt N, D'Hollander A, Gijs HL, Jans K, Lagae L, et al. (Junio de 2011). "Orientación celular específica con nanopartículas de oro ramificadas conjugadas con nanocuerpos para terapia fototérmica". ACS Nano . 5 (6): 4319–28. doi : 10.1021 / nn1023363 . PMID 21609027 .
- ^ "Ablynx anuncia resultados provisionales del primer estudio de fase I de nanocuerpos de, ALX-0081 (ANTI-VWF)" . Bio-Medicine.org. 2 de julio de 2007.
- ^ Número de ensayo clínico NCT01020383 para "Estudio comparativo de ALX-0081 frente al inhibidor de GPIIb / IIIa en pacientes de intervención coronaria percutánea (PCI) de alto riesgo" en ClinicalTrials.gov
- ^ Wrapp, McLellan. "Base estructural para la neutralización potente de betacoronavirus por anticuerpos de camélidos de dominio único" . Celular . doi : 10.1016 / j.cell.2020.04.031 .
- ^ Konwarh, Rocktotpal (23 de junio de 2020). "Nanocuerpos: perspectivas de ampliar la gama de anticuerpos neutralizantes contra el nuevo coronavirus, SARS-CoV-2" . Fronteras en inmunología . doi : 10.3389 / fimmu.2020.01531 .
enlaces externos
- Molécula del mes: nanocuerpos , de RCSB PDB