tinción
La tinción es una técnica utilizada para mejorar el contraste en las muestras, generalmente a nivel microscópico . Las tinciones y colorantes se utilizan con frecuencia en histología (estudio microscópico de tejidos biológicos) y en los campos médicos de histopatología , hematología y citopatología que se centran en el estudio y diagnóstico de enfermedades a nivel microscópico. Las tinciones pueden utilizarse para definir tejidos biológicos (resaltando, por ejemplo, fibras musculares o tejido conjuntivo ), poblaciones celulares (clasificando diferentesglóbulos ), u orgánulos dentro de células individuales.
En bioquímica , implica agregar un colorante específico de clase ( ADN , proteínas , lípidos , carbohidratos ) a un sustrato para calificar o cuantificar la presencia de un compuesto específico. La tinción y el marcado fluorescente pueden tener propósitos similares. La tinción biológica también se utiliza para marcar células en citometría de flujo y para marcar proteínas o ácidos nucleicos en electroforesis en gel . Los microscopios ópticos se utilizan para ver muestras teñidas con gran aumento, normalmente con iluminación de campo brillante o epifluorescencia.
La tinción no se limita a los materiales biológicos, también se puede utilizar para estudiar la estructura de otros materiales, por ejemplo, las estructuras laminares de los polímeros semicristalinos o las estructuras de dominio de los copolímeros en bloque .
La tinción in vivo (también llamada tinción vital o tinción intravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Al hacer que ciertas células o estructuras adquieran colores contrastantes, su forma ( morfología ) o posición dentro de una célula o tejido se puede ver y estudiar fácilmente. El propósito habitual es revelar detalles citológicos que de otro modo podrían no ser evidentes; sin embargo, la tinción también puede revelar dónde tienen lugar ciertas sustancias químicas o reacciones químicas específicas dentro de las células o tejidos.
La tinción in vitro consiste en colorear células o estructuras que se han eliminado de su contexto biológico. Ciertas manchas a menudo se combinan para revelar más detalles y características que una sola mancha. En combinación con protocolos específicos para la fijación y preparación de muestras, los científicos y los médicos pueden utilizar estas técnicas estándar como herramientas de diagnóstico consistentes y repetibles. Una contratinción es una tinción que hace que las células o estructuras sean más visibles, cuando no son completamente visibles con la tinción principal.
Mientras que ex vivo, muchas células continúan viviendo y metabolizando hasta que se "fijan". Algunos métodos de tinción se basan en esta propiedad. Las tinciones excluidas por las células vivas pero absorbidas por las células ya muertas se denominan tinciones vitales (p. ej. , azul de tripano o yoduro de propidio para las células eucariotas). Las que penetran y tiñen las células vivas se denominan tinciones supravitales (p. ej., nuevo azul de metileno y azul de cresilo brillante para reticulocitos ).tinción). Sin embargo, estas manchas acaban siendo tóxicas para el organismo, unas más que otras. En parte debido a su interacción tóxica dentro de una célula viva, cuando las tinciones supravitales ingresan a una célula viva, pueden producir un patrón característico de tinción diferente de la tinción de una célula ya fijada (por ejemplo, apariencia de "reticulocitos" versus "policromasia difusa"). Para lograr los efectos deseados, los tintes se utilizan en soluciones muy diluidas que van desde 1 : 5 000 a 1 : 500 000 (Howey, 2000). Tenga en cuenta que se pueden usar muchas tinciones tanto en células vivas como fijas.
