TRIzol es una solución química utilizada en la extracción de ADN , ARN y proteínas de las células. La solución fue utilizada y publicada inicialmente por Piotr Chomczyński y Nicoletta Sacchi en 1987. [1]
TRIzol es la marca de tiocianato de guanidinio de la parte Ambion de Life Technologies , [2] y Tri-Reagent es la marca de MRC, [3] que fue fundada por Chomczynski.
Usos en extracción
El nombre correcto del método es extracción con tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo . El uso de TRIzol puede resultar en rendimientos de ADN y ARN comparables a otros métodos de extracción. Un método alternativo para la extracción de ARN es la extracción con fenol y la precipitación con TCA / acetona. El cloroformo debe cambiarse por 1-bromo-3-cloropropano cuando se utiliza el reactivo TRI de nueva generación.
El ADN y el ARN de TRIzol y el reactivo TRI también se pueden extraer utilizando el kit Direct-zol Miniprep de Zymo Research . [4] Este método elimina completamente el uso de cloroformo y 1-bromo-3-cloropropano, sin pasar por los pasos de separación de fases y precipitación. [5]
TRIzol es sensible a la luz y, a menudo, se almacena en un recipiente de vidrio de color oscuro cubierto con papel de aluminio. Se almacena a temperatura ambiente.
Cuando se usa, se asemeja al jarabe para la tos, de color rosa brillante. El olor del fenol es extremadamente fuerte. TRIzol actúa manteniendo la integridad del ARN durante la homogeneización del tejido, mientras que al mismo tiempo interrumpe y descompone las células y los componentes celulares.
Peligros
Se debe tener precaución al usar TRIzol (debido al fenol y al cloroformo ).
La exposición al TRIzol puede representar un grave peligro para la salud. La exposición puede provocar quemaduras químicas graves y cicatrices permanentes. Se recomienda una bata de laboratorio, guantes y un delantal de plástico. [6] [7]
Referencias
- ^ Chomczynski, P; Sacchi, N (abril de 1987). "Método de un solo paso de aislamiento de ARN por extracción ácida de tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo". Anal. Biochem . 162 : 156–9. doi : 10.1006 / abio.1987.9999 . PMID 2440339 .
- ^ Tecnologías de la vida
- ^ Centro de investigación molecular, Inc.
- ^ https://www.zymoresearch.com/collections/direct-zol-rna-kits/products/direct-zol-rna-microprep-kits
- ^ https://patents.google.com/patent/EP2770056A1
- ^ Ficha de datos de seguridad de materiales de Life Technologies. Archivado el 21 de julio de 2008 en la Wayback Machine.
- ^ Hoja de datos de seguridad de materiales de MRC Archivada el 28 de diciembre de 2008 en la Wayback Machine.
enlaces externos
- Extracción de ARN mediante el protocolo trizol en OpenWetWare