Calcofluor-white o CFW es un tinte azul fluorescente que se usa para unirse a los polímeros polisacáridos de los quistes amebianos. Funciona al poder unirse a los polisacáridos 1-3 beta y 1-4 beta de la quitina y la celulosa que están presentes en las paredes celulares de los hongos, las plantas y las algas.
En la investigación de biología de células vegetales , se utiliza para teñir las paredes celulares tanto de algas como de plantas superiores . [1] [2]
También es útil en medicina y biología animal para la identificación de hongos en el tejido , [1] [3] [4] (se une a la quitina en las paredes celulares de los hongos).
Uso
Medicamento
CFW se puede utilizar tanto en micología clínica como en parasitología. Las amebas de vida libre en especies oculares pueden tener quistes que se pueden ver vívidamente con la tinción. Estos se han visto en estaciones de lavado de ojos en laboratorios. [5] CFW se puede utilizar con la tinción de Papanicolaou para ayudar a fortalecer la respuesta de las levaduras en las pruebas de Papanicolaou. [6]
Investigar
En la investigación, el calcofluor-white también se usa para teñir las cicatrices de las yemas de las células de levadura porque las cicatrices de las yemas tienen un mayor contenido de quitina, lo que las tiñe más que el resto de la membrana celular. Debido a esta mancha, es posible contar las cicatrices de las yemas, lo que es una indicación de la edad de la célula. Muestra patrones de tinción similares a los de la aglutinina de germen de trigo (WGA) . Es especialmente útil para la identificación de Mucor y los agentes causantes de la cigomicosis . Calcofluor-white se puede utilizar para teñir placas tecales en dinoflagelados blindados . [7] Calcofluor también se usa como tinte en ropa de color blanco, y da como resultado el aspecto característico bajo "iluminación negra".
Textiles
CFW es un tinte para iluminar telas. Es soluble en agua e incoloro al principio. Tiene un efecto de brillo óptico que se utiliza desde la década de 1940 para dar un aspecto más blanco a los textiles. También se agrega comercialmente a los detergentes para ropa como abrillantador. [8]
Fluorescencia
Las soluciones que son acuosas para calcofluor-white tienen un espectro de absorción de 300 a 412 nm con un pico a 347 nm. El pico de fluorescencia se produce mejor con luz ultravioleta , pero el violeta / azul violeta también da excelentes resultados de fluorescencia. Calcofluor-White es un tinte fluorescente , lo que significa que tiene una longitud de onda de excitación y emisión que difiere entre sí. La longitud de onda de excitación es de 380 nm mientras que la emisión es de 475 nm. La fluorescencia se puede ver mejor con luz ultravioleta, pero también se puede ver con violeta o azul violeta.
Los hongos tienden a mostrar un color verde brillante bajo luz ultravioleta / violeta / violeta-azul debido a los filtros de barrera utilizados en microscopía para fluorescencia. El blanco de calcofluor debe interpretarse con cuidado de la tinción, ya que algunas reacciones inespecíficas pueden hacer que el fondo se vea de un color amarillo verdoso fluorescente. Esto se puede reducir mirando las celdas bajo luz azul o con otros filtros para ver la mejor imagen posible. El azul de Evans es una contratinción para el blanco de calcofluor, ya que puede ayudar a disminuir los tejidos y células de fondo con la luz azul. [9]
Estudios comparativos
En un estudio comparativo de cultivos de KOH , Calcofluor-White y hongos para diagnosticar la onicomicosis fúngica , el CFW se consideró el método más sensible para detectar la infección en humanos. El estudio vio que de 150 pacientes, el CFW dio positivo en 95 de ellos. El estudio también revisó las ventajas clave del uso de la tinción Calcofluor-White sobre KOH. Se discutió que CFW requiere un tiempo de detección rápido, ya que se puede ver en objetivos de baja potencia y se puede hacer en un minuto, mientras que KOH requiere alrededor de 3 a 4 minutos para cada diapositiva. Es un método de detección más rápido y sensible que el KOH, y el material de fondo se puede desviar utilizando CFC. [10]
En un estudio de métodos para diagnosticar micosis, una infección por hongos en humanos, se comparó CFW con KOH y Chicago Sky Blue 6B. CFW mostró pruebas positivas en el 53,4% de los casos que tenían sospechas de infecciones por micosis, mientras que Chicago Sky Blue 6B tuvo un 55% de precisión. El estudio mostró que el CFW es menos eficaz en la detección rápida en comparación con el Chicago Sky Blue 6B, pero es una forma eficaz de detectar la infección por hongos. [6]
Un estudio que investigó la detección de Candida en lesiones cancerosas o precancerosas utilizando CFW con microscopía fluorescente. El estudio quería ver la eficacia de Calcofluor-White contra una especie de infecciones micóticas que pueden causar la muerte o lesiones graves en pacientes inmunodeprimidos. También investigó la sensibilidad del tinte en comparación con la tinción de Gram y la tinción de PAS. El estudio concluyó que era una forma rápida y fácil de diagnosticar en citopatología e histopatología, pero era relativamente cara. El estudio también mostró que no se necesitaban técnicas especiales para que la tinción fuera efectiva. El tinte tampoco interfiere con la tinción de PAS o Gram. Para la citología , Pap-CFW dio una respuesta positiva 50 de 135 veces, y para histopatología , dio una respuesta positiva 43 de 135 solo para la tinción CFW. El estudio mostró que la tinción mejoró con una combinación de Pap y CFW. Los resultados dieron como resultado que el tinte era increíblemente efectivo en términos de rápido diagnóstico y efectividad, lo que lo hacía superior a los Gram positivos y al PAS en este estudio en particular. [11] En general, la tinción tiene ventajas clave para fines de investigación y diagnóstico, pero tiene el problema de ser un poco costosa y no puede ser tan precisa para ciertas especies.
Problemas con la tinción con blanco de calcofluor
Se han realizado estudios que muestran que el CFW no fluoresce bien con Coccidioides immitis a pesar de ser un hongo. Histoplasma capsulatum y Cryptococcus neoformans también tienden a tener problemas para mostrar la fluorescencia de CFW. En otro informe se observó que el Pneumocystis carinii en biopsias pulmonares tenía que teñirse a temperatura ambiente durante cinco minutos y luego a 65 ° C durante cinco minutos para ver mejor la fluorescencia. La fluorescencia con hongos de pigmentación oscura puede tener resultados engañosos, ya que depende de qué tan pigmentados estén los hongos y qué tan bien funcione la mancha. [5]
Referencias
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|journal=
( ayuda ) - ^ a b Afshar, Parvaneh; Larijani, Laleh Vahedi; Rouhanizadeh, Hamed (2012-2018). "Una comparación de los métodos rápidos convencionales en el diagnóstico de micosis superficiales y cutáneas basados en KOH, azul cielo de Chicago 6B y manchas blancas de calcofluor" . Revista iraní de microbiología . 10 (6): 433–440. ISSN 2008-3289 . PMC 6414738 . PMID 30873272 .
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enlaces externos
- Página de documentación del producto de Fluka.
- [1]