Célula de ovario de hámster chino
De ovario de hámster chino ( CHO ) las células son un epitelial línea celular derivada del ovario del hámster chino , a menudo utilizado en biológica y la investigación médica y comercialmente en la producción de terapéuticos recombinantes proteínas . [1] Han encontrado un amplio uso en estudios de genética, detección de toxicidad, nutrición y expresión génica, particularmente para expresar proteínas recombinantes . Las células CHO son los huéspedes mamíferos más comúnmente utilizados para la producción industrial de terapias de proteínas recombinantes. [1]
Los hámsteres chinos se han utilizado en la investigación desde 1919, donde se utilizaron en lugar de ratones para tipificar neumococos . Posteriormente se descubrió que eran excelentes vectores para la transmisión de kala-azar ( leishmaniasis visceral ), lo que facilitaba la investigación de Leishmania .
En 1948, el hámster chino se utilizó por primera vez en los Estados Unidos para la reproducción en laboratorios de investigación. En 1957, Theodore T. Puck obtuvo una hembra de hámster chino del laboratorio del Dr. George Yerganian en la Boston Cancer Research Foundation y la utilizó para derivar la línea celular original de ovario de hámster chino (CHO). Desde entonces, las células CHO han sido una línea celular de elección debido a su rápido crecimiento en cultivo en suspensión y alta producción de proteínas. [2]
Al tener un número de cromosomas muy bajo (2n = 22) para un mamífero , el hámster chino también es un buen modelo para la citogenética de radiación y el cultivo de tejidos. [3]
Todas las líneas celulares CHO son deficientes en la síntesis de prolina . [4] Además, las células CHO no expresan el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), lo que las hace ideales en la investigación de varias mutaciones de EGFR. [5]
Desde que se describió la línea celular CHO original en 1956, se han desarrollado muchas variantes de la línea celular para diversos propósitos. [4] En 1957, CHO-K1 se generó a partir de un solo clon de células CHO, [6] CHO-K1 se mutagenizó con metanosulfonato de etilo para generar una línea celular que carece de actividad dihidrofolato reductasa (DHFR), denominada CHO-DXB11 ( también conocido como CHO-DUKX). [7] Sin embargo, estas células, cuando se mutagenizan, podrían revertir a la actividad DHFR, lo que hace que su utilidad para la investigación sea algo limitada. [7] Posteriormente, las células CHO se mutagenizaron con radiación gamma para producir una línea celular en la que ambos alelosdel locus DHFR se eliminaron por completo, denominado CHO-DG44 [8] Estas cepas deficientes en DHFR requieren glicina , hipoxantina y timidina para su crecimiento. [8] Las líneas celulares con DHFR mutado son útiles para la manipulación genética como células transfectadas con un gen de interés junto con una copia funcional del DHFR.El gen puede detectarse fácilmente en medios que carecen de timidina. Debido a esto, las células CHO que carecen de DHFR son las células CHO más utilizadas para la producción de proteínas industriales. Más recientemente, otros sistemas de selección se han vuelto populares y con los sistemas de vectores que pueden dirigirse de manera más eficiente a la cromatina activa en las células CHO, también se puede usar la selección de antibióticos (puromicina) para generar células recombinantes que expresan proteínas a un alto nivel. Para ello, se ha descubierto que otras células huésped, que siguen utilizando los nombres aplicados durante los años 60 a 80 (CHO-K1, CHO-S, CHO-Pro minus, etc.) producen niveles excelentes de proteínas. Dado que las células CHO tienen una propensión muy alta a la inestabilidad genética (como todas las células inmortalizadas), no se debe asumir que los nombres aplicados indican su utilidad para fines de fabricación. Más,si no, todas las líneas celulares de CHO utilizadas industrialmente se cultivan ahora en medios libres de componentes animales o en medios químicamente definidos, y se utilizan en biorreactores a gran escala en cultivo en suspensión.[4] Se discutió extensamente la compleja genética de las células CHO y las cuestiones relativas a la derivación clonal de la población celular. [9]
