Etest (anteriormente conocido como prueba Epsilometer ) es una forma de determinar la sensibilidad antimicrobiana colocando una tira impregnada con antimicrobianos en una placa de agar . Una cepa de bacteria u hongo no crecerá cerca de una concentración de antibiótico o antifúngico si es sensible. Para algunas combinaciones microbianas y antimicrobianas, los resultados pueden usarse para determinar una concentración inhibitoria mínima (MIC). Etest es un sistema patentado fabricado por bioMérieux. Es una prueba de laboratorio que se usa en entornos de atención médica para ayudar a guiar a los médicos al indicar qué concentración de antimicrobiano podría usarse con éxito para tratar las infecciones de los pacientes. [1]
Usar
Etest es una técnica cuantitativa para determinar la sensibilidad a los antibióticos y la concentración mínima inhibitoria (en µg / mL) de algunas bacterias, incluidas las bacterias aerobias Gram-negativas y Gram-positivas como Enterobacteriaceae , [2] Pseudomonas , [2] [3] [4 ] Burkholderia , [2] [5] Staphylococcus , [6] y Enterococcus [7] especies y bacterias exigentes, como anaerobios, N. gonorrhoeae , S. pneumoniae , Streptococcus y Haemophilius . [1] También se puede utilizar para determinar las CMI frente a determinados hongos. [8] [9]
Procedimiento
Etest es una tira reactiva de plástico no porosa preparada previamente con un gradiente de antibiótico predefinido, que cubre un rango de concentración continuo. Se aplica a la superficie de una placa de agar inoculada con la cepa de prueba, donde se libera el gradiente antimicrobiano del portador de plástico al agar para formar un gradiente estable y continuo debajo y cerca de la tira.
El tiempo que tarda una placa en estar lista depende de la bacteria que se esté analizando y de las condiciones de la placa de agar. El gradiente Etest predefinido permanece estable durante al menos 18 a 24 horas; es decir, un período que cubre los tiempos críticos de muchas especies de organismos fastidiosos y no fastidiosos.
Después de la prueba, el crecimiento bacteriano se vuelve visible después de la incubación y se observa una elipse de inhibición simétrica centrada a lo largo de la tira. El valor de MIC se lee en la escala en términos de µg / mL donde el borde de la elipse se cruza con la tira. Después del período de incubación requerido, se lee el valor inhibitorio mínimo donde el borde de la elipse de inhibición se cruza con el lado de la tira. La placa no debe leerse si el cultivo parece mezclado o si el césped de crecimiento es demasiado ligero o demasiado pesado.
Los criterios de valoración de la CMI de la prueba suelen ser claros, aunque se pueden observar diferentes patrones de crecimiento / inhibición según el antimicótico o antibiótico utilizado. [9]
Selección de medio de agar
Etest se puede utilizar con muchos tipos diferentes de medio de agar AST siempre que el medio admita un buen crecimiento del organismo de prueba y no interfiera con la actividad del agente antimicrobiano. Sin embargo, para maximizar la reproducibilidad, el medio elegido debe cumplir los requisitos básicos para un medio de prueba de susceptibilidad. Se recomienda el uso de los siguientes medios AST con Etest: [ cita requerida ]
- Aerobios: agar Mueller Hinton como MHE (bioMérieux)
- Anaerobios: agar sangre Brucella con suplementos adecuados
Estos medios pueden requerir nutrientes suplementarios para obtener un mayor crecimiento de organismos nutricionalmente exigentes como neumococos, estreptococos, abiotrofia , Haemophilus , gonococos, meningococos y Campylobacter . En general, las recomendaciones de los medios de comunicación del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI) y el Comité Europeo de Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos (EUCAST) se consideran apropiadas para Etest.
Disponibilidad
Hay disponibles productos de Etest para más de 100 agentes antimicrobianos, incluidos antibióticos, agentes antimicóticos y agentes antimicobacterianos. Además, se encuentran disponibles productos Etest específicos para la detección de mecanismos de resistencia específicos [por ejemplo, BLEE (Beta-Lactamasa de espectro extendido), MBL (Metalo Beta-Lactamasa), AmpC Beta-Lactamasa y VISA / h VISA].
Etest ha sido aprobado por la FDA y marcado CE para muchos organismos al compararlo con los métodos de referencia de dilución en caldo / agar convencionales y ha demostrado tener una excelente correlación.
Equipo de prueba
La familia de instrumentos Etest está diseñada para simplificar el uso diario de Etest. Simplex C76, Nema C88 y Retro C80 son fáciles de usar, lo que reduce la fatiga del operador, ahorra tiempo y mejora la calidad de los resultados al aumentar la reproducibilidad. Etest y los instrumentos relacionados ofrecen uno de los métodos más eficientes para generar valores de MIC a escala a través de 15 diluciones duplicadas para pruebas de susceptibilidad de una amplia gama de combinaciones de insectos y drogas, incluidos los organismos exigentes.
- Simplex C76 automatiza la colocación de 1 a 6 tiras Etest diferentes para simplificar la configuración de los paneles MIC. La aplicación de hasta 6 tiras para placas de agar grandes o hasta 2 tiras en placas pequeñas tarda <12 segundos.
- Retro C80 es una placa giratoria que simplifica y estandariza la inoculación de placas de agar pequeñas y grandes, lo que hace que Etest® sea más fácil de leer en comparación con el rayado manual.
- Nema C88 es un bolígrafo de vacío que simplifica la aplicación de las tiras Etest®. El aplicador se sostiene como un bolígrafo y el orificio de evacuación se cubre con la punta del dedo para crear succión. La ventosa se coloca sobre la tira para levantarla y luego colocarla sobre la superficie del agar. La tira se suelta quitando la punta del dedo del orificio de evacuación.
Historia
La tira Etest se describió por primera vez en 1988 y fue introducida comercialmente en 1991 por AB BIODISK. bioMérieux adquirió AB BIODISK en 2008 y continúa fabricando y comercializando esta gama de productos bajo la marca Etest.
Durante la década de 1950, Hans Ericsson (profesor de microbiología en el Hospital Karolinska y el Instituto Karolinska, Estocolmo), el fundador científico de AB BIODISK, desarrolló un método para estandarizar la prueba de difusión en disco y mejorar su reproducibilidad y confiabilidad para las predicciones de susceptibilidad clínica. Los tamaños de la zona de inhibición de los resultados de la prueba del disco se compararon con los valores de concentración inhibitoria mínima (MIC) basados en el procedimiento de dilución del agar de referencia . La correlación entre los tamaños de las zonas y los valores de CMI se evaluó luego mediante análisis de regresión y se utilizaron líneas de regresión para extrapolar los límites interpretativos de la zona que correspondían a los valores del punto de corte de CMI que definían los resultados categóricos susceptibles, intermedios y resistentes.
Etest se presentó por primera vez en la Conferencia Interscience sobre Agentes Antimicrobianos y Quimioterapia (ICAAC) en Los Ángeles en 1988 como un concepto de gradiente novedoso para las determinaciones de MIC. En septiembre de 1991, Etest se lanzó a nivel mundial como un producto MIC después de recibir la autorización de la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE. UU. (FDA).
Ver también
Referencias
- ^ a b bioMérieux. "ETEST®" . www.biomerieux-usa.com . bioMérieux . Consultado el 18 de marzo de 2021 .
- ^ a b c Goldstein FW, Ly A, Kitzis MD (mayo de 2007). "Comparación de Etest con dilución de agar para probar la susceptibilidad de Pseudomonas aeruginosa y otras bacterias multirresistentes a la colistina" . Revista de quimioterapia antimicrobiana . 59 (5): 1039–1040. doi : 10.1093 / jac / dkm046 . PMID 17437963 .
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