Minicírculo


Los minicírculos son replicones circulares pequeños (~ 4 kb ) . Ocurren naturalmente en algunos genomas de orgánulos eucariotas . En el cinetoplasto de tripanosomas derivado de mitocondrias , los minicírculos codifican ARN guía para la edición de ARN . [1] En Amphidinium , el genoma del cloroplasto está formado por minicírculos que codifican las proteínas del cloroplasto. [2] [3]

Los minicírculos son derivados de plásmidos circulares pequeños (~ 4kb) que se han liberado de todas las partes del vector procariótico . Se han aplicado como portadores de transgenes para la modificación genética de células de mamíferos, con la ventaja de que, dado que no contienen secuencias de ADN bacteriano , es menos probable que se perciban como extrañas y se destruyan. (Los métodos típicos de administración de transgén implican plásmidos, que contienen ADN extraño). El tamaño más pequeño de los minicírculos también amplía su capacidad de clonación y facilita su administración a las células.

El minicírculo purificado se puede transferir a la célula receptora mediante transfección o lipofección y a un tejido diferenciado mediante, por ejemplo, inyección a chorro .

Los minicírculos convencionales carecen de un origen de replicación , por lo que no se replican dentro de las células diana y los genes codificados desaparecerán a medida que la célula se divide (lo que puede ser una ventaja o una desventaja dependiendo de si la aplicación exige una expresión persistente o transitoria). Una adición novedosa al campo son los minicírculos autorreplicantes no virales , que deben esta propiedad a la presencia de un elemento S / MAR . Los minicírculos autorreplicantes son muy prometedores para la modificación sistemática de las células madre y ampliarán significativamente el potencial de sus formas precursoras plasmidas ("plásmidos parentales"), tanto más como se haya demostrado ampliamente la viabilidad principal de tal enfoque para su precursor plasmidal. formas. [6][7] [8] [9]


Preparación de minicírculos a partir de un plásmido parental. El plásmido parental contiene dos sitios diana de recombinasa (medias flechas negras). La recombinación entre estos sitios genera el minicírculo deseado (abajo a la derecha) junto con el miniplasmido (abajo a la izquierda). El gancho en el inserto de minicírculo rojo representa una región de unión de matriz de andamio ( S / MAR-Element ), que permite la replicación autónoma en la celda receptora.