minicírculo


Los minicírculos son replicones circulares pequeños (~4 kb ) . Ocurren naturalmente en algunos genomas de orgánulos eucarióticos . En el cinetoplasto de tripanosomas derivado de mitocondrias , los minicírculos codifican ARN guía para la edición de ARN . [1] En Amphidinium , el genoma del cloroplasto está formado por minicírculos que codifican proteínas del cloroplasto. [2] [3]

Los minicírculos son derivados de plásmidos circulares pequeños (~4 kb) que se han liberado de todas las partes del vector procariótico . Se han aplicado como portadores de transgenes para la modificación genética de células de mamíferos, con la ventaja de que, dado que no contienen secuencias de ADN bacteriano , es menos probable que se perciban como extraños y se destruyan. (Los métodos típicos de administración de transgenes involucran plásmidos, que contienen ADN extraño). El tamaño más pequeño de los minicírculos también amplía su capacidad de clonación y facilita su administración a las células.

El minicírculo purificado se puede transferir a la célula receptora mediante transfección o lipofección ya un tejido diferenciado, por ejemplo, mediante inyección a chorro .

Los minicírculos convencionales carecen de un origen de replicación , por lo que no se replican dentro de las células diana y los genes codificados desaparecerán a medida que la célula se divida (lo que puede ser una ventaja o una desventaja dependiendo de si la aplicación exige una expresión persistente o transitoria). Una nueva adición al campo son los minicírculos autorreplicantes no virales , que deben esta propiedad a la presencia de un elemento S/MAR . Los minicírculos autorreplicantes son muy prometedores para la modificación sistemática de células madre y ampliarán significativamente el potencial de sus formas precursoras de plásmidos ("plásmidos parentales"), tanto más cuanto que la viabilidad principal de tal enfoque ha sido ampliamente demostrada para su precursor plásmido. formularios [6][7] [8] [9]


Preparación de minicírculos a partir de un plásmido parental. El plásmido parental contiene dos sitios diana de recombinasa (medias flechas negras). La recombinación entre estos sitios genera el minicírculo deseado (extremo inferior derecho) junto con el miniplásmido (extremo inferior izquierdo). El gancho en el inserto de minicírculo rojo representa una región de unión de matriz de andamio ( Elemento S/MAR ), que permite la replicación autónoma en la célula receptora.