SH-SY5Y
SH-SY5Y es una línea celular de origen humano utilizada en la investigación científica. La línea celular original, llamada SK-N-SH, a partir de la cual se subclonó, se aisló de una biopsia de médula ósea de una niña de cuatro años con neuroblastoma . Las células SH-SY5Y se utilizan a menudo como modelos in vitro de función y diferenciación neuronal. Tienen un fenotipo adrenérgico pero también expresan marcadores dopaminérgicos y, como tales, se han utilizado para estudiar la enfermedad de Parkinson , la neurogénesis y otras características de las células cerebrales.
SH-SY5Y fue clonado a partir de una línea derivada de una biopsia de médula ósea llamada SK-N-SH por el laboratorio de June Biedler y se informó por primera vez en 1973. [1] Un subclón de SK-N-SH parecido a un neuroblasto, llamado SH-SY, se subclonó como SH-SY5, que se subclonó por tercera vez para producir la línea SH-SY5Y, descrita por primera vez en 1978. [2] El proceso de clonación implicaba la selección de células individuales o grupos que expresaban características similares a las de las neuronas. La línea SH-SY5Y es genéticamente femenina con dos cromosomas X y ninguno Y, como era de esperar dado el origen de una niña de cuatro años.
Las células crecen típicamente en cultivo de tejidos de dos formas distintas. Algunos se convierten en grupos de células que flotan en el medio, mientras que otros forman grupos que se adhieren al plato. Las células SH-SY5Y pueden interconvertirse espontáneamente entre dos fenotipos in vitro, las células similares a neuroblastos y las células similares a epiteliales, aunque no se comprenden los mecanismos subyacentes a este proceso. Sin embargo, se aprecia que la línea celular es de tipo N (neuronal), dada su morfología y la capacidad de diferenciar las células a lo largo del linaje neuronal (en contraste con la línea celular subclonada SH-EP de tipo S, también derivada de SK -N-SH). [3] Células con neuritas espinosas cortas-procesos similares migran fuera de estos grupos adherentes. Las células SH-SY5Y poseen un cromosoma 1 anormal, donde hay una copia adicional de un segmento 1q y se denomina trisomía 1q. Se sabe que las células SH-SY5Y son activas en dopamina beta hidroxilasa, acetilcolinérgicas, glutamatérgicas y adenosinérgicas. Las células tienen fases de crecimiento muy diferentes, descritas en las imágenes circundantes. Las células se propagan a través de la mitosis y se diferencian extendiendo las neuritas al área circundante. Mientras se dividen, las células agregadaspueden verse tan diferentes de las células diferenciadas siguiendo la celularidad tumoral del índice K'annul (TNF, por Tumor Necrosis Factor), que los nuevos científicos a menudo confunden una u otra con contaminación. Las células en división pueden formar grupos de células que recuerdan su naturaleza cancerosa, pero ciertos tratamientos como el ácido retinoico , el BDNF o el TPA pueden obligar a las células a dendrizarse y diferenciarse. Además, la inducción por ácido retinoico da como resultado la inhibición del crecimiento celular y una mayor producción de noradrenalina de las células SH-SY5Y [4] [5]
El cóctel de cultivo más común que se usa es una mezcla 1:1 de DMEM y medio Ham's F12 y suero fetal bovino suplementario al 10 % . El DMEM normalmente contiene 3,7 g/L de bicarbonato de sodio , L-Glutamina 2 mM, piruvato de sodio 1 mM y aminoácidos no esenciales 0,1 mM . Las células siempre se cultivan a 37 grados centígrados con un 95 % de aire y un 5 % de dióxido de carbono.. Se recomienda cultivar las células en frascos que estén recubiertos para la adhesión del cultivo celular, esto ayudará en la diferenciación y dendrificación del neuroblastoma. En general, las células son bastante robustas y crecerán en los medios de cultivo de tejidos más utilizados. Sin embargo, se ha establecido recientemente que DMEM es superior a DMEM:F12 para la propagación de SH-SY5Y. [6]
SH-SY5Y tiene una actividad de dopamina-β-hidroxilasa y puede convertir la dopamina en norepinefrina. También formará tumores en ratones desnudos en alrededor de 3 a 4 semanas. La pérdida de características neuronales se ha descrito con un número creciente de pases. Por lo tanto, se recomienda no utilizar después del paso 20 o verificar características específicas como la captación de noradrenalina o marcadores de tumores neuronales.
