Oligodesoxinucleótido CpG
Los oligodesoxinucleótidos CpG (o CpG ODN ) son moléculas cortas de ADN sintético monocatenario que contienen un desoxinucleótido de citosina trifosfato ("C") seguido de un desoxinucleótido de guanina trifosfato ("G"). La "p" se refiere al enlace fosfodiéster entre nucleótidos consecutivos, aunque algunos ODN tienen una estructura de fosforotioato (PS) modificada en su lugar. Cuando estos motivos CpG no están metilados , actúan como inmunoestimulantes . [1] Los motivos CpG se consideran patrones moleculares asociados a patógenos ( PAMP) debido a su abundancia en genomas microbianos pero su rareza en genomas de vertebrados. [2] El CpG PAMP es reconocido por el receptor de reconocimiento de patrones ( PRR ) Toll-Like Receptor 9 ( TLR9 ), que se expresa constitutivamente solo en células B y células dendríticas plasmocitoides (pDC) en humanos y otros primates superiores. [3]
Desde 1893, se ha reconocido que la toxina de Coley , una mezcla de lisado de células bacterianas, tiene propiedades inmunoestimuladoras que podrían reducir la progresión de algunos carcinomas , [4] pero no fue hasta 1983 que Tokunaga et al. identificó específicamente el ADN bacteriano como el componente subyacente del lisado que provocó la respuesta. [5] Luego, en 1995 Krieg et al. demostraron que el motivo CpG dentro del ADN bacteriano era responsable de los efectos inmunoestimuladores y desarrollaron CpG ODN sintéticos. [6] Desde entonces, los ODN de CpG sintéticos han sido el foco de una intensa investigación debido a la respuesta proinflamatoria de Tipo I que provocan y su uso exitoso como adyuvantes de vacunas..
Los CpG ODN sintéticos se diferencian del ADN microbiano en que tienen un esqueleto parcial o completamente fosforotioado (PS) en lugar del esqueleto típico de fosfodiéster y una cola de poli G en el extremo 3 ', extremo 5' o ambos. La modificación de PS protege al ODN de ser degradado por nucleasas como DNasa en el cuerpo y la cola de poli G mejora la captación celular. [7] Las colas de poli G forman tétradas intermoleculares que dan como resultado agregados de alto peso molecular. Estos agregados son responsables del aumento de actividad que imparte la secuencia poli G; no la secuencia en sí. [8] Se ha demostrado que numerosas secuencias estimulan TLR9con variaciones en el número y ubicación de los dímeros CpG, así como las secuencias de bases precisas que flanquean los dímeros CpG. Esto llevó a la creación de cinco clases o categorías no oficiales de CpG ODN basadas en su secuencia, estructuras secundarias y efecto sobre las células mononucleares de sangre periférica humana ( PBMC ). Las cinco clases son Clase A (Tipo D), Clase B (Tipo K), Clase C, Clase P y Clase S. [9]Es importante señalar que durante el proceso de descubrimiento, las "Clases" no se definieron hasta mucho más tarde, cuando se hizo evidente que los ODN con ciertas características provocaban respuestas específicas. Debido a esto, la mayoría de los ODN mencionados en la literatura utilizan números (es decir, ODN 2006, ODN 2007, ODN 2216, ODN D35, ODN K3, etc.). Los números son arbitrarios y provienen de probar un gran número de ODN con ligeras variaciones en los intentos de encontrar la secuencia óptima. Además, algunos artículos darán nombres diferentes a las ODN descritas anteriormente, lo que complicará aún más la convención de nomenclatura.
Uno de los primeros ODN de clase A, ODN 2216, fue descrito en 2001 por Krug et al. [10] Esta clase de ODN era claramente diferente del ODN de clase B descrito anteriormente (es decir, ODN 2006) en que estimulaba la producción de grandes cantidades de interferones de tipo I , el más importante de los cuales era el IFNα, e inducía la maduración del plasmacitoide. células dendríticas. Los ODN de clase A también son fuertes activadores de las células NK a través de la señalización indirecta de citocinas .
