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El escarabajo de cuernos largos , Leptura quadrifasciata , es un ejemplo de un insecto visitante de flores encontrado en un estudio que mostró que el ADN ambiental (eDNA) de los artrópodos se deposita en las flores silvestres después de las interacciones  [1]

El ADN ambiental o eDNA es ADN que se recolecta de una variedad de muestras ambientales como suelo , agua de mar , nieve o incluso aire [2] en lugar de tomarse muestras directamente de un organismo individual. A medida que varios organismos interactúan con el medio ambiente, el ADN se expulsa y se acumula en su entorno de diversas fuentes. [3] Las fuentes de ejemplo de eDNA incluyen, pero no se limitan a, heces , moco , gametos , muda de piel, cadáveres y cabello . [3] [4]Estas muestras pueden analizarse mediante métodos de secuenciación de ADN de alto rendimiento , conocidos como metagenómica , metabarcoding y detección de una sola especie, [5] para un seguimiento y medición rápidos de la biodiversidad . Para diferenciar mejor entre organismos dentro de una muestra, se utiliza la codificación de metabarras de ADN en la que se analiza la muestra y se utilizan bibliotecas de ADN previamente estudiadas, como BLAST , para determinar qué organismos están presentes. [6]

eDNA metabarcoding es un método novedoso para evaluar la biodiversidad en el que se toman muestras del medio ambiente a través del agua, sedimento o aire del cual se extrae el ADN, y luego se amplifican usando cebadores generales o universales en la reacción en cadena de la polimerasa y se secuencian usando secuenciación de próxima generación para generar miles a millones de lecturas. A partir de estos datos, se puede determinar la presencia de especies y evaluar la biodiversidad general. Es un método interdisciplinario que combina la ecología tradicional basada en el campo con métodos moleculares en profundidad y herramientas computacionales avanzadas. [7]

El análisis de eDNA tiene un gran potencial, no solo para monitorear especies comunes, sino para detectar e identificar genéticamente otras especies existentes que podrían influir en los esfuerzos de conservación. [8] Este método permite el biomonitoreo sin requerir la recolección del organismo vivo, creando la capacidad de estudiar organismos que son invasores, elusivos o en peligro sin introducir estrés antropogénico en el organismo. El acceso a esta información genética hace una contribución fundamental a la comprensión del tamaño de la población, la distribución de las especies y la dinámica de la población de especies que no están bien documentadas. Es importante destacar que el eDNA suele ser más rentable en comparación con los métodos de muestreo tradicionales. [9] La integridad de las muestras de eDNA depende de su conservación en el medio ambiente.

El suelo, el permafrost , el agua dulce y el agua de mar son macroambientes bien estudiados de los que se han extraído muestras de eDNA, cada uno de los cuales incluye muchos más subambientes condicionados . [10] Debido a su versatilidad, el eDNA se aplica en muchos subambientes , como muestreo de agua dulce, muestreo de agua de mar, muestreo de suelo terrestre (tundra permafrost), muestreo de suelo acuático (río, lago, estanque y sedimento oceánico), [11] u otros entornos donde los procedimientos normales de muestreo pueden resultar problemáticos. [10]

Resumen [ editar ]

El ADN ambiental o eDNA describe el material genético presente en muestras ambientales como sedimentos, agua y aire, incluidas células completas, ADN extracelular y organismos potencialmente completos. [12] [13] El eDNA puede capturarse de muestras ambientales y conservarse, extraerse, amplificarse, secuenciarse y clasificarse en función de su secuencia. [14] A partir de esta información, es posible la detección y clasificación de especies. El eDNA puede provenir de piel, mucosas, saliva, esperma, secreciones, huevos, heces, orina, sangre, raíces, hojas, frutos, polen y cuerpos en descomposición de organismos más grandes, mientras que los microorganismos pueden obtenerse en su totalidad. [15] [16] [13]La producción de eDNA depende de la biomasa, la edad y la actividad alimentaria del organismo, así como de la fisiología, el ciclo de vida y el uso del espacio. [3] [17] [13] [18] [19] [7]

Seguimiento de la biodiversidad y los ecosistemas mundiales
con metabarcoding de ADN ambiental  [7]

A pesar de ser un método de levantamiento relativamente nuevo, el eDNA ya ha demostrado tener un enorme potencial en el monitoreo biológico. Los métodos convencionales para estudiar la riqueza y la abundancia están limitados por la identificación taxonómica, pueden causar perturbaciones o destrucción del hábitat y pueden depender de métodos en los que es difícil detectar especies pequeñas o esquivas, lo que imposibilita las estimaciones para comunidades enteras. El eDNA puede complementar estos métodos al apuntar a diferentes especies, muestrear una mayor diversidad y aumentar la resolución taxonómica . [20] Además, el eDNA es capaz de detectar especies raras, [21] [17]pero no para determinar información sobre la calidad de la población, como la proporción de sexos y las condiciones corporales, por lo que es ideal para complementar los estudios tradicionales. [18] [20] Independientemente, tiene aplicaciones útiles en la detección de las primeras apariciones de especies invasoras, la presencia continua de especies nativas que se cree que están extintas o amenazadas, y otras especies esquivas que ocurren en densidades bajas que serían difíciles de detectar por medios tradicionales. [7]

La degradación del eDNA en el medio ambiente limita el alcance de los estudios de eDNA, ya que a menudo solo quedan pequeños segmentos de material genético, particularmente en las regiones tropicales cálidas. Además, los diferentes períodos de tiempo hasta la degradación basados ​​en las condiciones ambientales y el potencial del ADN para viajar a través de medios como el agua pueden afectar la inferencia de tendencias espacio-temporales a escala fina de especies y comunidades. [17] [22] [15] [23] [18] [20] [19] A pesar de estos inconvenientes, el eDNA todavía tiene el potencial de determinar la abundancia relativa o de rango, ya que algunos estudios han encontrado que se corresponde con la biomasa, aunque la variación inherente a las muestras ambientales hace que sea difícil de cuantificar. [16] [13]Si bien el eDNA tiene numerosas aplicaciones en conservación, monitoreo y evaluación de ecosistemas, así como otras aún por describir, las concentraciones altamente variables de eDNA y la heterogeneidad potencial a través del cuerpo de agua hacen que sea esencial que el procedimiento se optimice, idealmente con un estudio piloto. para cada nueva aplicación para asegurar que el diseño de muestreo sea apropiado para detectar el objetivo. [24] [18] [20] [7]

ADN de la comunidad [ editar ]

Si bien la definición de eDNA parece sencilla, las líneas entre las diferentes formas de ADN se vuelven borrosas, particularmente en comparación con el ADN comunitario , que se describe como muestras de organismos a granel. [20] Surge una pregunta con respecto a los microorganismos completos capturados en muestras de eDNA: ¿estos organismos alteran la clasificación de la muestra a una muestra de ADN de la comunidad? Además, la clasificación del material genético de las heces es problemática y, a menudo, se denomina eDNA. [20] La diferenciación entre los dos es importante ya que el ADN de la comunidad indica la presencia de un organismo en un momento y lugar en particular, mientras que el eDNA puede provenir de una ubicación diferente, de heces de depredadores o de una presencia pasada; sin embargo, esta diferenciación a menudo es imposible. [25][20] Sin embargo, el eDNA puede clasificarse libremente en el sentido de que incluye muchos sectores de la investigación de la biodiversidad del ADN, incluido el análisis fecal y las muestras a granel cuando son aplicables a la investigación de la biodiversidad y al análisis de ecosistemas. [7]

metabarcoding de eDNA [ editar ]

Aplicaciones de la metabarcoding de ADN ambiental en ecosistemas acuáticos y terrestres  [7]

Para 2019, los métodos de investigación de eDNA se habían ampliado para poder evaluar comunidades enteras a partir de una sola muestra. Este proceso implica la codificación de metabarras , que se puede definir con precisión como el uso de cebadores de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) generales o universales en muestras mixtas de ADN de cualquier origen seguido de secuenciación de próxima generación (NGS) de alto rendimiento para determinar la composición de especies muestra. Este método ha sido común en microbiología durante años, pero apenas está encontrando su base en la evaluación de macroorganismos. [26] [22] [25] [20]Las aplicaciones de la metabarcoding de eDNA en todo el ecosistema tienen el potencial no solo para describir comunidades y biodiversidad, sino también para detectar interacciones y ecología funcional en grandes escalas espaciales, aunque puede estar limitada por lecturas falsas debido a contaminación u otros errores. [26] [16] [27] [25] [19] En conjunto, la codificación de metabarras de eDNA aumenta la velocidad, la precisión y la identificación en comparación con los códigos de barras tradicionales y reduce el costo, pero debe estandarizarse y unificarse, integrando taxonomía y métodos moleculares para un estudio ecológico completo . [22] [28] [29] [30] [19] [7]

La metabarcoding de eDNA tiene aplicaciones para el monitoreo de la diversidad en todos los hábitats y grupos taxonómicos, la reconstrucción de ecosistemas antiguos, las interacciones planta-polinizador , el análisis de la dieta, la detección de especies invasoras, las respuestas a la contaminación y el monitoreo de la calidad del aire. La codificación de metabarras de eDNA es un método único que aún se encuentra en desarrollo y probablemente permanecerá en proceso de cambio durante algún tiempo a medida que los avances tecnológicos y los procedimientos se estandaricen. Sin embargo, a medida que se optimiza la codificación de metabarras y se generaliza su uso, es probable que se convierta en una herramienta esencial para el seguimiento ecológico y el estudio de la conservación global. [7]

ADN extracelular y reliquia [ editar ]

Dinámica del ADN de las reliquias [31]

El ADN extracelular, a veces llamado ADN reliquia, es ADN de microbios muertos. El ADN extracelular desnudo (eDNA), la mayor parte liberado por la muerte celular, es casi omnipresente en el medio ambiente. Su concentración en el suelo puede ser tan alta como 2 μg / L, y su concentración en ambientes acuáticos naturales puede ser tan alta como 88 μg / L. [32] Se han propuesto varias funciones posibles para el eDNA: puede estar involucrado en la transferencia horizontal de genes ; [33] puede proporcionar nutrientes; [34] y puede actuar como un amortiguador para reclutar o valorar iones o antibióticos. [35] El ADN extracelular actúa como un componente funcional de la matriz extracelular en las biopelículas.de varias especies bacterianas. Puede actuar como un factor de reconocimiento para regular la unión y dispersión de tipos celulares específicos en la biopelícula; [36] puede contribuir a la formación de biopelículas; [37] y puede contribuir a la fuerza física y resistencia de la biopelícula al estrés biológico. [38]

Bajo el nombre de ADN ambiental, el eDNA se ha visto cada vez más utilizado en las ciencias naturales como una herramienta de estudio para la ecología , monitoreando los movimientos y la presencia de especies en el agua, el aire o en la tierra, y evaluando la biodiversidad de un área. [39] [40]

En el diagrama de la derecha, la cantidad de ADN reliquia en un entorno microbiano está determinada por las entradas asociadas con la mortalidad de individuos viables con ADN intacto y por las pérdidas asociadas con la degradación del ADN reliquia. Si la diversidad de secuencias contenidas en el grupo de ADN de reliquia es lo suficientemente diferente de la del grupo de ADN intacto, entonces el ADN de reliquia puede sesgar las estimaciones de la biodiversidad microbiana (como lo indican los recuadros de diferentes colores) cuando se toman muestras del ADN total (intacto + reliquia) piscina. [31] Se han propuesto datos estandarizados sobre iniciativas (STARDIT) como una forma de estandarizar tanto los datos sobre los métodos de muestreo y análisis como las relaciones taxonómicas y ontológicas. [41]

ARN ambiental [ editar ]

Colección [ editar ]

Extracción continua de sedimentos acuáticos subglaciales
La plataforma cilíndrica puede atravesar el pozo de acceso y penetrar el sedimento. Los cables de plomo se unen entre el cabrestante de superficie y la plataforma submarina y el descorazonador suspendido por cable puede penetrar repetidamente en el mismo pozo de sedimentos guiado por los cables de plomo. [42]

Sedimentos terrestres [ editar ]

La importancia del análisis de eDNA surgió del reconocimiento de las limitaciones que presentan los estudios basados ​​en la cultura . [8] Los organismos se han adaptado para prosperar en las condiciones específicas de sus entornos naturales. Aunque los científicos trabajan para imitar estos entornos, muchos organismos microbianos no pueden eliminarse y cultivarse en un laboratorio. [10] La primera versión de este análisis comenzó con ARN ribosómico ( ARNr ) en microbios para comprender mejor los microbios que viven en entornos hostiles. [43] La composición genética de algunos microbios solo es accesible a través del análisis de eDNA. Las técnicas analíticas de eDNA se aplicaron por primera vez a sedimentos terrestres.produciendo ADN de mamíferos, pájaros, insectos y plantas extintos y existentes. [44] Las muestras extraídas de estos sedimentos terrestres se denominan comúnmente "ADN sedimentario antiguo" ( ADN de seda o ADN de suciedad ). [45] El análisis de eDNA también se puede utilizar para estudiar las comunidades forestales actuales, desde aves y mamíferos hasta hongos y gusanos. [10] Se pueden obtener muestras de suelo, heces, 'mordida de ADN' de donde se han mordido las hojas, plantas y hojas donde han estado los animales, y de la sangre de mosquitos capturados que pueden haber comido sangre de cualquier animal de la zona. . [46] Algunos métodos también pueden intentar capturar células con trampas de pelo y papel de lija en áreas comúnmente atravesadas por especies objetivo.

Sedimentos acuáticos [ editar ]

El sedaDNA se utilizó posteriormente para estudiar la diversidad de animales antiguos y se verificó utilizando registros fósiles conocidos en sedimentos acuáticos. [10] Los sedimentos acuáticos están privados de oxígeno y, por lo tanto, protegen el ADN de la degradación. [10] Aparte de los estudios antiguos, este enfoque se puede utilizar para comprender la diversidad animal actual con una sensibilidad relativamente alta. Si bien las muestras de agua típicas pueden degradar el ADN con relativa rapidez, las muestras de sedimentos acuáticos pueden tener ADN útil dos meses después de la presencia de la especie. [47] Un problema con los sedimentos acuáticos es que se desconoce dónde depositó el organismo el eDNA, ya que podría haberse movido en la columna de agua.

Acuático (columna de agua) [ editar ]

El estudio de eDNA en la columna de agua puede indicar la composición comunitaria de una masa de agua. Antes de eDNA, la principal forma de estudiar la diversidad de aguas abiertas era utilizar la pesca y la captura, lo que requiere recursos como financiación y mano de obra calificada, mientras que eDNA solo necesita muestras de agua. [11] Este método es eficaz ya que el pH del agua no afecta al ADN tanto como se pensaba anteriormente, y la sensibilidad se puede incrementar con relativa facilidad. [11] [48] ​​La sensibilidad es la probabilidad de que el marcador de ADN esté presente en el agua muestreada y se puede aumentar simplemente tomando más muestras, teniendo muestras más grandes y aumentando la PCR . [48]El eDNA se degrada relativamente rápido en la columna de agua, lo cual es muy beneficioso en estudios de conservación a corto plazo, como identificar qué especies están presentes. [10]

Investigadores del Experimental Lakes Area en Ontario, Canadá y la Universidad McGill han descubierto que la distribución del eDNA refleja la estratificación de los lagos . [49] A medida que cambian las estaciones y la temperatura del agua, la densidad del agua también cambia de manera que forma capas distintas en pequeños lagos boreales en verano e invierno. Estas capas se mezclan durante la primavera y el otoño. [50] El uso del hábitat de los peces se correlaciona con la estratificación (por ejemplo, un pez de agua fría como la trucha de lago permanecerá en agua fría) y también la distribución de eDNA, como encontraron estos investigadores. [49]

Esquema de un buque de perforación que recupera un núcleo de sedimento para el análisis de sedaADN y la composición hipotética de la comunidad marina pasada. Esquema no a escala. [51]
Esquema de diferentes enfoques metodológicos en genómica marina moderna y antigua. (a) La codificación metabar es la amplificación y el análisis de fragmentos de ADN de igual tamaño de un extracto de ADN total. (b) La metagenómica es la extracción, amplificación y análisis de todos los fragmentos de ADN independientemente del tamaño. (c) Target-capture describe el enriquecimiento y análisis de fragmentos de ADN específicos (elegidos) independientemente del tamaño de un extracto de ADN total. [51]

En el diagrama de arriba a la izquierda, la línea punteada rosa indica el uso de un trazador químico para rastrear la contaminación durante la extracción de núcleos. La línea discontinua blanca representa el núcleo del sedimento. Los círculos amarillos pequeños indican intervalos teóricos de muestreo de ADN seda, correspondientes a los gráficos circulares de la derecha. Los gráficos circulares representan paleocomunidades hipotéticas detectables a partir del análisis de escopeta de sedaDNA, donde la mayoría (~ 75%) de las secuencias de sedaDNA recuperadas se originan en bacterias, y donde el sedaDNA de taxones fosilizantes / formadores de quistes aumenta en relación con los no fosilizantes / no quísticos taxones formadores con profundidad bajo el suelo (asumiendo que el ADN sedante de los taxones fosilizantes / formadores de quistes se conserva mejor que el de los taxones no fosilizantes / no formadores de quistes). El tamaño decreciente de los gráficos circulares con la profundidad del subsuelo indica una disminución esperada en sedaDNA.[51]

Monitoreo de especies [ editar ]

El eDNA se puede utilizar para monitorear especies durante todo el año y puede ser muy útil en el monitoreo de la conservación. [17] [52] [53] El análisis de eDNA ha logrado identificar muchos taxones diferentes de plantas acuáticas, [54] mamíferos acuáticos, [21] [17] peces, [26] [53] mejillones, [52] hongos [ 55] [56] e incluso parásitos. [57] [43] El eDNA se ha utilizado para estudiar especies mientras se minimiza cualquier interacción humana que induzca estrés, lo que permite a los investigadores monitorear la presencia de especies a escalas espaciales más grandes de manera más eficiente. [58] [59]El uso más frecuente en la investigación actual es el uso de eDNA para estudiar la ubicación de especies en riesgo, especies invasoras y especies clave en todos los entornos. [58] El eDNA es especialmente útil para estudiar especies con poblaciones pequeñas porque el eDNA es lo suficientemente sensible como para confirmar la presencia de una especie con relativamente poco esfuerzo para recopilar datos, lo que a menudo se puede hacer con una muestra de suelo o de agua. [8] [58] El eDNA se basa en la eficiencia de la secuenciación y el análisis genómico, así como en los métodos de encuesta utilizados, que continúan siendo más eficientes y más baratos. [60] Algunos estudios han demostrado que el eDNA muestreado de la corriente y el entorno costero decayó a un nivel indetectable en unas 48 horas. [61] [62]

El ADN ambiental se puede aplicar como una herramienta para detectar organismos de baja abundancia tanto en forma activa como pasiva. Los estudios de eDNA activos se dirigen a especies individuales o grupos de taxones para su detección mediante el uso de PCR cuantitativa en tiempo real altamente sensible para especies específicas [63] o marcadores de PCR de gotitas digitales . [64] La metodología CRISPR-Cas también se ha aplicado a la detección de una sola especie a partir de eDNA; [65] utilizando la enzima Cas12a y permitiendo una mayor especificidad al detectar taxones simpátricos. Las encuestas de eDNA pasivas emplean una secuenciación de ADN masivamente paralela para amplificar todas las moléculas de eDNA en una muestra sin un objetivo a priori en mente, proporcionando evidencia de ADN general de la composición de la comunidad biótica. [66]

Declive de los artrópodos terrestres [ editar ]

Diferenciación de comunidades de artrópodos por especies vegetales.
Gráfico bipartito para el gen COI . La figura muestra de qué plantas se obtiene cada familia de artrópodos. Nombres de plantas: Angeli ( Angelica archangelica ), Centau ( Centaurea jacea ), Daucus ( Daucus carota ), Echium ( Echium vulgare ), Eupato ( Eupatorium cannabinum ), Solida ( Solidago canadensis ), Tanace ( Tanacetum vulgare ). [1]
          Muestras de transectos recolectadas con una distancia de 10 m entre cada

Los artrópodos terrestres están experimentando una disminución masiva en Europa y en todo el mundo, [67] [68] [69] [70] aunque solo se ha evaluado una fracción de las especies y la mayoría de los insectos aún no están descritos en la ciencia. [71] Como ejemplo, los ecosistemas de pastizales albergan diversos grupos taxonómicos y funcionales de artrópodos terrestres , como polinizadores , insectos fitófagos y depredadores, que utilizan néctar y polen como fuente de alimento, y tejido de tallos y hojas para su alimentación y desarrollo. Estas comunidades albergan especies en peligro de extinción , ya que muchos hábitatshan desaparecido o se encuentran bajo una amenaza significativa. [72] [73] Por lo tanto, se están realizando grandes esfuerzos para restaurar los ecosistemas de pastizales europeos y conservar la biodiversidad . [74] Por ejemplo, los polinizadores como las abejas y las mariposas representan un grupo ecológico importante que ha sufrido un grave declive en Europa, lo que indica una pérdida dramática de la biodiversidad de los pastizales. [75] [76] [77] [78] La gran mayoría de las plantas con flores son polinizadas por insectos y otros animales tanto en las regiones templadas como en los trópicos. [79]La mayoría de las especies de insectos son herbívoros que se alimentan de diferentes partes de las plantas, y la mayoría de ellos son especialistas que dependen de una o unas pocas especies de plantas como principal recurso alimenticio. [80] Sin embargo, dada la brecha en el conocimiento sobre las especies de insectos existentes, y el hecho de que la mayoría de las especies aún no están descritas, está claro que para la mayoría de las especies de plantas en el mundo, existe un conocimiento limitado sobre las comunidades de artrópodos que albergan y interactuar con. [1]

Las comunidades de artrópodos terrestres se han recolectado y estudiado tradicionalmente utilizando métodos, como las trampas Malaise y las trampas de caída , que son métodos muy efectivos pero algo engorrosos y potencialmente invasivos. En algunos casos, estas técnicas no logran realizar estudios eficientes y estandarizados, debido, por ejemplo, a la plasticidad fenotípica , las especies estrechamente relacionadas y las dificultades para identificar los estadios juveniles. Además, la identificación morfológica depende directamente de la experiencia taxonómica , que está en declive. [81] [82] [83]Todas estas limitaciones del monitoreo tradicional de la biodiversidad han creado una demanda de enfoques alternativos. Mientras tanto, el avance en las tecnologías de secuenciación de ADN proporciona continuamente nuevos medios para obtener datos biológicos. [84] [85] [86] [87] Por lo tanto, recientemente se han sugerido varios enfoques moleculares nuevos para obtener datos rápidos y eficientes sobre las comunidades de artrópodos y sus interacciones a través de técnicas genéticas no invasivas. Esto incluye la extracción de ADN de fuentes como muestras a granel o sopas de insectos, [88] [89] [90] [91] minas de hojas vacías, [92] telas de araña, [93] fluido de plantas de jarra, [94]muestras ambientales como suelo y agua (ADN ambiental [eDNA]), [95] [96] [97] [98] identificación de plantas hospedadoras y dieta depredadora a partir de extractos de ADN de insectos, [99] [100] y excrementos de depredadores de murciélagos. [101] [102] Recientemente, también se ha utilizado el ADN del polen adherido a los insectos para recuperar información sobre las interacciones planta-polinizador . [103] [104] Muchos de estos estudios recientes se basan en la codificación de metabarras de ADN: secuenciación de alto rendimiento de amplicones de PCR utilizando cebadores genéricos. [105] [106] [1]

Mamíferos [ editar ]

Huellas de un lince canadiense en la nieve.

Huellas de nieve [ editar ]

Los investigadores de vida silvestre en áreas nevadas también usan muestras de nieve para recopilar y extraer información genética sobre especies de interés. Se ha utilizado ADN de muestras de huellas de nieve para confirmar la presencia de especies raras y escurridizas como osos polares, zorros árticos, linces, glotones y pescadores. [107] [108] [109] [110]

ADN del aire [ editar ]

En 2021, los investigadores demostraron que el eDNA se puede recolectar del aire y usar para identificar mamíferos. [111] [112]

Gestión de la pesca [ editar ]

La sobrepesca de la pesquería de bacalao del norte de Canadá provocó un colapso catastrófico  [113]
En este ejemplo, un pez deja el eDNA en un rastro mientras se mueve por el agua, pero el rastro se disipa lentamente con el tiempo.

La ordenación exitosa de la pesca comercial se basa en encuestas estandarizadas para estimar la cantidad y distribución de las poblaciones de peces . El bacalao del Atlántico (Gadus morhua) es un ejemplo icónico que demuestra cómo los datos mal limitados y la toma de decisiones mal informadas pueden resultar en una disminución catastrófica de las poblaciones y los consiguientes problemas económicos y sociales. [114] Las evaluaciones tradicionales de poblaciones de especies de peces demersales se han basado principalmente en prospecciones de arrastre , que han proporcionado un valioso flujo de información a los responsables de la toma de decisiones. [115] Sin embargo, hay algunos inconvenientes notables de las prospecciones de arrastre demersal, incluido el costo,[116] selectividad / capturabilidad de los artes, [117] destrucción del hábitat [118] y cobertura restringida (por ejemplo, ambientes de fondo de sustrato duro, áreas marinas protegidas). [119]

El ADN ambiental (eDNA) ha surgido como una alternativa potencialmente poderosa para estudiar la dinámica de los ecosistemas. La constante pérdida y desprendimiento de material genético de macroorganismos imparte una huella molecular en las muestras ambientales que pueden analizarse para determinar la presencia de especies objetivo específicas  [120] [121] o caracterizar la biodiversidad. [122] [123] La combinación de secuenciación de próxima generación y muestreo de eDNA se ha aplicado con éxito en sistemas acuáticos para documentar patrones espaciales y temporales en la diversidad de la fauna de peces. [124] [125] [126] [127]Para desarrollar aún más la utilidad del eDNA para la gestión de la pesca, comprender la capacidad de las cantidades de eDNA para reflejar la biomasa de peces en el océano es un paso importante a seguir. [119]

En sistemas experimentales se han demostrado relaciones positivas entre las cantidades de eDNA y la biomasa y abundancia de peces . [128] [129] [130] Sin embargo, se prevé que las variaciones conocidas entre la producción de eDNA  [131] [132] y las tasas de degradación  [133] [134] [135] [136] compliquen estas relaciones en los sistemas naturales. Además, en los sistemas oceánicos, es probable que los grandes volúmenes de hábitat y las fuertes corrientes provoquen la dispersión física de los fragmentos de ADN lejos de los organismos objetivo. [137] Anteriormente se había considerado que estos factores de confusión restringían la aplicación del monitoreo cuantitativo del eDNA en entornos oceánicos. [138][119]

A pesar de estas limitaciones potenciales, numerosos estudios en entornos marinos han encontrado relaciones positivas entre las cantidades de eDNA y los esfuerzos complementarios de prospección que incluyen marcado por radio, [139] prospecciones visuales, [127] [140] eco-sondas  [141] y prospecciones de arrastre. [126] [142] Sin embargo, los estudios que cuantifican las concentraciones de eDNA objetivo de especies de peces comerciales con estudios de arrastre estandarizados en ambientes marinos son mucho más escasos. [142] En este contexto, comparaciones directas de las concentraciones de eDNA con métricas de evaluación de biomasa y stock, como la captura por unidad de esfuerzo(CPUE), son necesarios para comprender la aplicabilidad del monitoreo de eDNA para contribuir a los esfuerzos de ordenación pesquera. [119]

Sedimentos de aguas profundas [ editar ]

Red OTU (unidad taxonómica operativa) de las reservas de ADN extracelular de los sedimentos de los diferentes márgenes continentales. [143]

El ADN extracelular de los sedimentos superficiales de las profundidades marinas es, con mucho, el mayor depósito de ADN de los océanos del mundo. [144] Las principales fuentes de ADN extracelular en dichos ecosistemas están representadas por la liberación in situ de ADN de organismos bentónicos muertos y / u otros procesos, incluida la lisis celular debida a infección viral, exudación celular y excreción de células viables, descomposición de virus y alóctonos. insumos de la columna de agua. [144] [145] [146] [147] Estudios anteriores proporcionaron evidencia de que una fracción importante de ADN extracelular puede escapar de los procesos de degradación y permanecer preservada en los sedimentos. [148] [149]Este ADN representa, potencialmente, un depósito genético que registra los procesos biológicos que ocurren a lo largo del tiempo. [150] [151] [143]

Investigaciones recientes revelaron que el ADN conservado en sedimentos marinos se caracteriza por un gran número de secuencias de genes muy diversas. [150] [151] [152] [153] [154] En particular, el ADN extracelular se ha utilizado para reconstruir la diversidad procariota y eucariota del pasado en ecosistemas bentónicos caracterizados por bajas temperaturas y / o condiciones permanentemente anóxicas. [154] [155] [156] [157] [158] [143]

El diagrama de la derecha muestra la red OTU ( unidad taxonómica operativa ) de las reservas de ADN extracelular de los sedimentos de los diferentes márgenes continentales. El tamaño de los puntos dentro de la red es proporcional a la abundancia de secuencias para cada OTU. Los puntos encerrados en un círculo en rojo representan las OTU centrales extracelulares, los puntos encerrados en un círculo en amarillo son OTU parcialmente compartidas (entre dos o más grupos), los puntos encerrados en un círculo en negro son las OTU exclusivas de cada grupo. Se muestran las OTU centrales que contribuyen al menos a 20 secuencias. Los números entre paréntesis representan el número de conexiones entre las OTU y las muestras: 1 para las OTU exclusivas, 2–3 para las OTU parcialmente compartidas y 4 para las OTU centrales. [143]

Estudios anteriores sugirieron que la preservación del ADN también podría verse favorecida en sistemas bentónicos caracterizados por altos aportes de materia orgánica y tasas de sedimentación, como los márgenes continentales, [159] [160] . Estos sistemas, que representan ca. El 15% del lecho marino global también son puntos críticos de diversidad procariota bentónica, [161] [162] [163] y, por lo tanto, podrían representar sitios óptimos para investigar la diversidad procariota conservada dentro del ADN extracelular. [143]

La distribución espacial de la diversidad procariota se ha estudiado intensamente en los ecosistemas bénticos de aguas profundas  [164] [165] [166] [167] mediante el análisis del "ADN ambiental" (es decir, el material genético obtenido directamente de muestras ambientales sin signos obvios de material de origen biológico). [168] Sin embargo, se desconoce hasta qué punto las secuencias de genes contenidas en el ADN extracelular pueden alterar las estimaciones de la diversidad de los conjuntos procarióticos actuales. [169] [143]

ADN sedimentario antiguo [ editar ]

Los análisis de ADN antiguo conservado en varios archivos han transformado la comprensión de la evolución de especies y ecosistemas. Mientras que los estudios anteriores se han concentrado en el ADN extraído de muestras taxonómicamente restringidas (como huesos o tejido congelado), los avances en la secuenciación de alto rendimiento y la bioinformática ahora permiten el análisis de ADN antiguo extraído de archivos sedimentarios, [170] llamado sedaADN. La acumulación y preservación de sedaDNA enterrado en sedimentos terrestres y lacustres ha sido objeto de una investigación e interpretación activas. [171] Sin embargo, estudiar la deposición de ADN en el fondo del océano y su conservación en sedimentos marinos es más complejo porque el ADN tiene que viajar a través de una columna de agua.durante varios kilómetros. [172] . A diferencia del entorno terrestre, con el transporte generalizado de biomasa subfósil desde la tierra, la mayor parte del ADN sedante marino se deriva de la comunidad planctónica , que está dominada por microbios marinos y protistas marinos . [173] Después de la muerte del plancton de superficie, su ADN está sujeto a un transporte a través de la columna de agua, durante el cual se sabe que gran parte de la materia orgánica asociada se consume y respira . [174] Este transporte podría tardar entre 3 y 12 días, según el tamaño y la morfología de la prueba. [175]Sin embargo, no está claro cómo exactamente el eDNA planctónico, definido como el ADN total presente en el medio ambiente después, [176] sobrevive a este transporte, si la degradación o el transporte están asociados con la clasificación o la advección lateral y, finalmente, si el eDNA que llega a el fondo marino se conserva en sedimentos marinos sin más distorsión de su composición. [177]

A pesar de la larga exposición a la degradación en condiciones óxicas durante el transporte en la columna de agua, y una concentración sustancialmente menor de materia orgánica en el fondo marino, hay evidencia de que el eDNA planctónico se conserva en sedimentos marinos y contiene señales ecológicas explotables. [178] Estudios anteriores han demostrado la preservación del ADN de sedación en sedimentos marinos depositados bajo anoxia con cantidades inusualmente altas de materia orgánica preservada, [179] , pero investigaciones posteriores indican que el ADN de sedación también se puede extraer de sedimentos marinos normales, dominados por fracciones minerales clásticas o biogénicas. . [180] [181] [182]Además, la baja temperatura del agua de aguas profundas (0–4 ° C) asegura una buena conservación del ADN sedante. [176] [178] Utilizando foraminíferos planctónicos como una "piedra de Rosetta", lo que permite la evaluación comparativa de las firmas de ADN de sedación mediante pruebas de fósiles coexistentes de estos organismos, Morard et al. demostró en 2017 que la huella dactilar del eDNA de plancton que llega al fondo marino conserva la firma ecológica de estos organismos a gran escala geográfica. [179]Esto indica que el eDNA de la comunidad planctónica se deposita en el lecho marino debajo, junto con agregados, esqueletos y otro material planctónico que se hunde. Si esto es cierto, el sedaADN debería poder registrar firmas de la hidrografía oceánica superficial, afectando la composición de las comunidades de plancton, con la misma resolución espacial que los restos esqueléticos del plancton. Además, si el eDNA de plancton llega al fondo marino en asociación con agregados o conchas, es posible que resista el transporte a través de la columna de agua por fijación sobre superficies minerales. Se ha propuesto el mismo mecanismo para explicar la preservación de sedaADN en sedimentos, [180] [181] [182] lo que implica que el flujo de eDNA planctónico encapsulado enLa prueba de calcita que llega al lecho marino está condicionada para su conservación en el momento del entierro. [177]

SedaDNA de foraminíferos planctónicos es un proxy ideal tanto “horizontalmente” para evaluar la resolución espacial de la reconstrucción de características hidrográficas oceánicas superficiales pasadas como “verticalmente”, para rastrear sin ambigüedades el enterramiento de su señal a lo largo de la columna de sedimento. De hecho, el flujo de eDNA de foraminíferos planctónicos debería ser proporcional al flujo de conchas de foraminíferos muertos que se hunden en el lecho marino, lo que permite una evaluación comparativa independiente de la señal de eDNA. El eDNA es una herramienta poderosa para estudiar el ecosistema porque no requiere conocimiento taxonómico directo, lo que permite recopilar información sobre cada organismo presente en una muestra, incluso a nivel críptico . Sin embargo, la asignación de las secuencias de eDNA a organismos conocidos se realiza mediante la comparación con secuencias de referencia (o códigos de barras) disponibles en repositorios públicos o bases de datos seleccionadas. [183] La taxonomía de los foraminíferos planctónicos se comprende bien  [1] </ref> y existen códigos de barras que permiten un mapeo casi completo de los amplicones de eDNA en la taxonomía basada en la morfología de la prueba de los foraminíferos. [184] [185] Es importante destacar que la composición de las comunidades de foraminíferos planctónicos está estrechamente relacionada con la hidrografía de la superficie y esta señal se conserva mediante pruebas fósiles depositadas en el lecho marino. [186] [187] Dado que se puede recuperar el eDNA de foraminíferos acumulado en el sedimento oceánico, podría utilizarse para analizar los cambios en las comunidades planctónicas y bentónicas a lo largo del tiempo. [188] [189] [190] [191] [177]

Investigación participativa y ciencia ciudadana [ editar ]

La relativa simplicidad del muestreo de ADN electrónico se presta a proyectos que buscan involucrar a las comunidades locales en ser parte de proyectos de investigación, incluida la recolección y análisis de muestras de ADN. Esto puede empoderar a las comunidades locales (incluidos los pueblos indígenas) para que participen activamente en el seguimiento de las especies en un entorno y ayudar a tomar decisiones informadas como parte del modelo de investigación-acción participativa. Un ejemplo de un proyecto de este tipo ha sido demostrado por la organización benéfica Science for All con el proyecto 'Wild DNA'. [192]

Ver también [ editar ]

  • Circulando ADN libre
  • ARN extracelular
  • ADN exógeno

Referencias [ editar ]

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Más referencias [ editar ]

  • Schallenberg, Lena; Wood, Susie A .; Pochon, Xavier; Pearman, John K. (2020). "¿Qué nos puede decir el ADN en el medio ambiente sobre un ecosistema?". Fronteras para las mentes jóvenes . 7 . doi : 10.3389 / frym.2019.00150 . S2CID  210714520 .

Enlaces externos [ editar ]

  • EXPLOSIÓN
  • Guía del biomema de eDNA