Los estudios de mezcla son pruebas que se realizan en el plasma sanguíneo de pacientes o sujetos de prueba para distinguir las deficiencias del factor de los inhibidores del factor , como el anticoagulante lúpico , o los inhibidores específicos del factor, como los anticuerpos dirigidos contra el factor VIII . [1] El propósito básico de estas pruebas es determinar la causa de la prolongación del tiempo de protrombina (TP), del tiempo de tromboplastina parcial o, a veces, del tiempo de trombina (TT). Los estudios de mezcla aprovechan el hecho de que los niveles de factor que son 50 por ciento de lo normal deberían dar un tiempo de protrombina (TP) normal oResultado del tiempo de tromboplastina parcial (PTT). [2] Los plasmas deficientes en factores (plasma adsorbido y plasma envejecido, etc.) se utilizan en estudios de mezcla. El plasma con deficiencias conocidas de factor está disponible comercialmente, pero es muy caro, por lo que a menudo se prepara en el laboratorio y luego se puede utilizar para experimentos de mezcla.
El plasma normal fresco tiene todos los factores de coagulación sanguínea con niveles normales. El plasma de pacientes que reciben anticoagulantes orales ( warfarina, etc.) durante 48-72 horas es deficiente en factor VII . El plasma adsorbido o el plasma de pacientes que toman anticoagulantes orales ( warfarina, etc.) durante una semana o más es deficiente en factor II, factor VII, factor IX y factor X. El plasma envejecido es deficiente en factor V y factor VIII C. El suero es deficiente en los factores I, V y VIIIC.
Si el problema es una deficiencia de factor simple, mezclar el plasma del paciente 1: 1 con plasma que contiene el 100% del nivel normal de factor da como resultado un nivel ≥50% en la mezcla (digamos que el paciente tiene una actividad del 0%; el promedio de 100% + 0% = 50%). [3] El PT o PTT será normal (el estudio de mezcla muestra una corrección). La corrección con mezcla indica deficiencia de factor; si no se corrige indica un inhibidor. Realizar un tiempo de trombina en el plasma de prueba puede proporcionar información adicional útil para la interpretación de las pruebas de mezcla.
Algunos inhibidores dependen del tiempo. En otras palabras, se necesita tiempo para que el anticuerpo reaccione e inactive el factor de coagulación agregado. La prueba de coagulación realizada inmediatamente después de mezclar las muestras puede mostrar una corrección porque el anticuerpo no ha tenido tiempo de inactivar su factor diana. Una prueba realizada después de que la mezcla se incubó durante 1 a 2 horas a 37 ° C mostrará una prolongación significativa sobre el tiempo de coagulación obtenido después de la mezcla inmediata. Los inhibidores inespecíficos como el anticoagulante lúpico generalmente no dependen del tiempo; la mezcla inmediata mostrará una prolongación. Muchos inhibidores de factores específicos dependen del tiempo y el inhibidor no se detectará a menos que se repita la prueba después de la incubación (los inhibidores del factor VIII son conocidos por esto). [6]
Un problema común es un aumento inexplicable del PT y / o PTT. Si se observa esto, la prueba debe repetirse con una muestra nueva. Otra consideración es la heparina . Es posible que la muestra de sangre se extrajera por error a través de una línea de ejecución. La interferencia de la heparina se puede detectar absorbiendo la heparina con una resina ("Heparsorb") o utilizando una enzima para digerir la heparina ("Hepzyme [7] "). Además, se debe verificar la historia del paciente , especialmente con respecto al uso de anticoagulantes o enfermedad hepática.. Siempre que el resultado anormal se reproduzca en una muestra nueva y no exista una explicación obvia del historial, se debe realizar un estudio de mezcla. Si el estudio de mezcla muestra corrección y no prolongación con la incubación, se debe buscar la deficiencia de factor, comenzando con VIII y IX. Se deben considerar factores dependientes de vitamina K y no dependientes de vitamina K para descartar la ingestión accidental o subrepticia de warfarina .