Fosforamidita de nucleósidos
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Fosforamiditas de 2'-desoxinucleósido protegidas.

Las fosforamiditas de nucleósidos son derivados de nucleósidos naturales o sintéticos . Se utilizan para sintetizar oligonucleótidos , fragmentos relativamente cortos de ácido nucleico y sus análogos . Las fosforamiditas de nucleósidos fueron introducidas por primera vez en 1981 por Beaucage y Caruthers. [1]Para evitar reacciones secundarias no deseadas, los grupos hidroxi reactivos y amino exocíclicos presentes en nucleósidos naturales o sintéticos se protegen de manera apropiada. Siempre que un análogo de nucleósido contenga al menos un grupo hidroxi, el uso de la estrategia protectora apropiada permite convertirlo en la respectiva fosforamidita e incorporar esta última en ácidos nucleicos sintéticos. Para incorporarse en el medio de una cadena de oligonucleótidos usando la estrategia de fosforamidita, el análogo de nucleósido debe poseer dos grupos hidroxi o, con menos frecuencia, un grupo hidroxi y otro grupo nucleófilo (amino o mercapto). Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, nucleótidos alternativos , LNA , morfolino , nucleósidos modificados en la posición 2 '(OMe, NH protegido2 , F), nucleósidos que contienen bases no canónicas ( hipoxantina y xantina contenidas en nucleósidos naturales inosina y xantosina , respectivamente, bases tricíclicas como G-clamp, [2] etc.) o bases derivatizadas con un grupo fluorescente o un brazo enlazador .

Preparación

Hay tres métodos principales para la preparación de fosforamiditas de nucleósidos.

  • DMT = 4,4'-dimetoxitritilo; B = base nucleica opcionalmente protegida; R = grupo protector de fosfato
    El método común implica el tratamiento de un nucleósido protegido que lleva un solo grupo hidroxi libre con fosforodiamidita bajo la acción catalítica de un ácido débil. [3] [4] Aunque se informó que algunas bisamiditas eran compuestos térmicamente inestables, [5] 2-cianoetil N, N, N ', N'-tetraisopropilfosforodiamidita, la amidita utilizada para preparar fosforamiditas de nucleósidos comerciales es relativamente estable. Puede sintetizarse mediante un procedimiento de dos pasos en un recipiente y purificarse mediante destilación al vacío . [6] Una excelente revisión describe con gran detalle el uso de este último reactivo en la preparación de fosforamiditas nucleosídicas y no nucleosídicas. [7]
  • Síntesis de amidita Nucl2.png
    En el segundo método, el nucleósido protegido se trata con el fosforocloridito en presencia de una base orgánica, más comúnmente N-etil-N, N-diisopropilamina (base de Hunig). [8]
  • Síntesis de amidita Nucl3.png
    En el tercer método, [9] el nucleósido protegido se trata primero con cloro N, N, N ', N'-tetraisopropilfosforodiamidito en presencia de una base orgánica, más comúnmente N-etil-N, N-diisopropilamina (base de Hunig ) para formar una diamidita de nucleósido protegida. Este último se trata con un alcohol correspondiente al grupo protector de fosfito deseado, por ejemplo, 2-cianoetanol, en presencia de un ácido débil.

Las fosforamiditas de nucleósidos se purifican mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice . Para garantizar la estabilidad del resto de fosforamidita, es aconsejable equilibrar la columna con un eluyente que contenga del 3 al 5% de trietilamina y mantener esta concentración en el eluyente durante todo el transcurso de la separación. La pureza de una fosforamidita puede evaluarse por 31 P espectroscopía de RMN . Como el átomo de P (III) en un nucleósido fosforamidito es quiral, presenta dos picos a aproximadamente 149 ppm correspondientes a los dos diastereómeros del compuesto. La impureza de triéster de fosfito potencialmente presente muestra un pico a 138-140 ppm. Las impurezas de H-fosfonato muestran picos a 8 y 10 ppm.

Propiedades químicas de la fracción de fosforamidita

Las fosforamiditas de nucleósidos son compuestos relativamente estables con una vida útil prolongada cuando se almacenan como polvos en condiciones anhidras en ausencia de aire a temperaturas por debajo de 4 ° C. Las amiditas soportan condiciones básicas suaves. Por el contrario, en presencia de ácidos incluso suaves, las fosforamiditas mueren casi instantáneamente. Las fosforamiditas son relativamente estables a la hidrólisis en condiciones neutras. Por ejemplo, la vida media del 2-cianoetil 5'- O - (4,4'-dimetoxitritil) timidina -3'- O - (N, N-diisopropilamino) fosfito en acetonitrilo acuoso al 95% a 25 ° C es de 200 h . [10]

  • X = O, S, NH.
    La característica más importante de las fosforamiditas es su capacidad para experimentar la reacción de acoplamiento de la fosforamidita, es decir, reaccionar con grupos nucleofílicos en presencia de un catalizador de azol ácido , 1 H -tetrazol , 2-etiltiotetrazol, [11] 2-benciltiotetrazol, [12 ] [13] 4,5-diciano imidazol , [14] o varios compuestos similares. La reacción avanza extremadamente rápido. Esta misma característica hace que las fosforamiditas de nucleósidos sean intermedios útiles en la síntesis de oligonucleótidos . Estereoquímicamente, el acoplamiento de fosforamidita conduce a la epimerización (formación de diastereómeros) en el centro quiral P (III).

Cuando se sirve agua como nucleófilo, el producto es un diéster de H-fosfonato como se muestra en el esquema anterior. Debido a la presencia de agua residual en disolventes y reactivos, la formación de este último compuesto es la complicación más común en el uso preparativo de fosforamiditas, particularmente en la síntesis de oligonucleótidos.

  • X = S, Se.
    Las fosforamiditas se oxidan fácilmente con reactivos oxidantes débiles, por ejemplo, con yodo acuoso en presencia de bases débiles o con peróxido de hidrógeno [15] para formar los respectivos fosforamidatos.

De manera similar, las fosforamiditas reaccionan con otros calcógenos . Cuando se ponen en contacto con una solución de azufre [15] [16] o varios compuestos denominados colectivamente agentes sulfurantes , [17] [18] las fosforamiditas forman cuantitativamente fosforotioamidatos. La reacción con selenio [15] [16] o derivados de selenio [19] produce fosforoselenoamidatos. En todas las reacciones de este tipo, se conserva la configuración en el átomo de fósforo.

  • Las fosforamiditas de nucleósidos se someten a la reacción de Michaelis-Arbuzov para formar los respectivos fosfonamidatos. Un ejemplo describe la preparación de fosfonamidatos en presencia de acrilonitrilo. [20] Según se informa, a temperatura ambiente la reacción es estereoselectiva con la retención de la configuración en el centro del fósforo. Por el contrario, cuando se lleva a cabo a 55 ° C, la reacción conduce a productos racemizados .
  • De manera similar a las fosfinas y los fosfitos terciarios, las fosforamiditas experimentan fácilmente la reacción de Staudinger .

(RO) 2 P-N (R 1 ) 2 + R 2 -N 3 + H 2 O ---- (RO) 2 P (= O) -N (R 1 ) 2 + R 2 -NH 2 + N 2 ;

Estrategia de protección

Los nucleótidos de origen natural (nucleósido-3'- o 5'-fosfatos) y sus análogos de fosfodiéster son insuficientemente reactivos para proporcionar una preparación sintética rápida de oligonucleótidos con altos rendimientos. La selectividad y la velocidad de formación de enlaces internucleosídicos se mejoran drásticamente mediante el uso de 3'- O - ( N , N -diisopropilfosforamidita) derivados de nucleósidos (nucleósidos fosforamiditos) que sirven como bloques de construcción en la metodología del triéster de fosfito. Para evitar reacciones secundarias no deseadas, todos los demás grupos funcionales presentes en los nucleósidos deben volverse no reactivos (protegidos) mediante la unión de grupos protectores.. Una vez completado el ensamblaje de la cadena de oligonucleótidos, todos los grupos protectores se eliminan para producir los oligonucleótidos deseados. A continuación, se revisan brevemente los grupos protectores que se utilizan actualmente en [21] [22] [23] [24] [25] y los bloques de construcción de nucleósidos fosforamiditos más comunes:

  • El grupo 5'-hidroxilo está protegido por un grupo DMT (4,4'-dimetoxitritilo) lábil a los ácidos .
  • La timina y el uracilo , bases nucleicas de timidina y uridina , respectivamente, no tienen grupos amino exocíclicos y, por tanto, no requieren ninguna protección. Por el contrario, las bases nucleicas adenina , citosina y guanina portan los grupos amino exocíclicos, que son reactivos con las fosforamiditas activadas en las condiciones de la reacción de acoplamiento. Aunque, a expensas de pasos adicionales en el ciclo sintético, el ensamblaje de la cadena de oligonucleótidos puede llevarse a cabo utilizando fosforamiditas con grupos amino desprotegidos, [26]la mayoría de las veces, estos se mantienen permanentemente protegidos a lo largo de toda la longitud del ensamblaje de la cadena de oligonucleótidos. La protección de los grupos amino exocíclicos debe ser ortogonal a la del grupo 5'-hidroxi porque este último se elimina al final de cada ciclo sintético. La más sencilla de implementar y, por tanto, la más aceptada es la estrategia en la que los grupos amino exocíclicos llevan una protección lábil en base. Muy a menudo, se utilizan dos esquemas de protección.
  • En el primero, el esquema estándar y más robusto (Figura), la protección Bz (benzoilo) se usa para A, dA, C, dC, G y dG están protegidos con el grupo isobutirilo. Más recientemente, el grupo Ac (acetilo) se usa a menudo para proteger C y dC como se muestra en la Figura. [27]
  • En el segundo esquema de protección suave, A y dA están protegidos con grupos isobutirilo [28] o fenoxiacetilo (PAC). [29] C y dC llevan protección acetil, [27] y G y dG están protegidos con grupos 4-isopropilfenoxiacetil (i-Pr-PAC) [30] o dimetilformamidino (dmf) [31] . Los grupos protectores suaves se eliminan más fácilmente que los grupos protectores estándar. Sin embargo, las fosforamiditas que llevan estos grupos son menos estables cuando se almacenan en solución.
  • El grupo fosfito está protegido por un grupo 2-cianoetilo lábil en base . [32] Una vez que se ha acoplado una fosforamidita al oligonucleótido unido al soporte sólido y los restos de fosfito se han convertido en la especie P (V), la presencia de la protección de fosfato no es obligatoria para la conducción exitosa de reacciones de acoplamiento adicionales. [33]
Fosforamiditas de ribonucleósido protegidas con 2'- O.
  • En la síntesis de ARN, el grupo 2'-hidroxi está protegido con el grupo TBDMS ( t -butildimetilsililo). [34] [35] [36] [37] o con TOM (tri- iso grupo -propylsilyloxymethyl), [38] [39] siendo ambos extraíble por tratamiento con ion fluoruro.
  • El resto fosfito también porta un grupo diisopropilamino ( i Pr 2 N) reactivo en condiciones ácidas. Tras la activación, el grupo diisopropilamino se va, para ser sustituido por el grupo 5'-hidroxi del oligonucleótido unido al soporte.

Ver también

  • Síntesis de ADN
  • Análogos de ácidos nucleicos
  • Síntesis de oligonucleótidos

Referencias

  1. ^ Beaucage, SL; Caruthers MH (1981). "Fosforamiditas de desoxinucleósido: una nueva clase de intermedios clave para la síntesis de desoxipolinucleótidos". Letras de tetraedro . 22 (20): 1859–1862. doi : 10.1016 / S0040-4039 (01) 90461-7 .
  2. ^ Lin, K.-Y., Matteucci, MD (1998). "Un análogo de citosina capaz de unirse en forma de pinza a una guanina en ácidos nucleicos helicoidales". Mermelada. Chem. Soc . 120 (33): 8531–8532. doi : 10.1021 / ja981286z .CS1 maint: varios nombres: lista de autores ( enlace )
  3. ^ Nielsen, J .; Marugg, JE; Taagaard, M .; Van Boom, JH; Dahl, O. (1986). "Síntesis soportada por polímeros de desoxioligonucleótidos usando desoxinucleósido 2-cianoetil fosforamiditas preparadas in situ". Rec. Trav. Chim. Pays-Bas . 105 (1): 33–34. doi : 10.1002 / recl.19861050106 .
  4. ^ Nielsen, J .; Taagaard, M .; Marugg, JE; Van Boom, JH; Dahl, O. (1986). "Aplicación de 2-cianoetil N, N, N ', N'-tetraisopropilfosforodiamidito para la preparación in situ de desoxirribonucleósidos fosforamiditos y su uso en síntesis de oligodesoxirribonucleótidos soportada por polímeros" . Ácidos nucleicos Res . 14 (18): 7391–7403. doi : 10.1093 / nar / 14.18.7391 . PMC 311758 . PMID 3763407 .  
  5. ^ Nielsen, J .; Marugg, JE; Van Boom, JH; Honnens, J .; Taagaard, M .; Dahl, O. (1986). "Inestabilidad térmica de algunas alquil fosforodiamiditas". J. Chem Res. Sinopsis (1): 26-27.
  6. ^ Nielsen, J .; Dahl, O. (1987). "Síntesis mejorada de 2-cianoetil N, N, N ', N'-tetraisopropilfosforodiamidito (iPr2N) 2POCH2CH2CN)" . Ácidos nucleicos Res . 15 (8): 3626. doi : 10.1093 / nar / 15.8.3626 . PMC 340760 . PMID 3575107 .  
  7. ^ Beaucage, SL (2001). "2-Cianoetil tetraisopropilfosforodiamidito". Enciclopedia E-EROS de reactivos para síntesis orgánica . doi : 10.1002 / 047084289X.rn00312 . ISBN 0471936235.
  8. ^ Sinha, ND; Biernat, J .; Koester, H. (1983). "β-Cianoetil N, N-dialquilamino / N-morfolinomonocloro fosfoamiditas, nuevos agentes fosfitilantes que facilitan la desprotección y el tratamiento de los oligonucleótidos sintetizados". Tetrahedron Lett . 24 (52): 5843–5846. doi : 10.1016 / S0040-4039 (00) 94216-3 .
  9. ^ Marugg, JE; Burik, A .; Tromp, M .; Van der Marel, GA y Van Boom, JH (1986). "Un enfoque nuevo y versátil para la preparación de valiosos intermedios de desoxinucleósido 3'-fosfito". Tetrahedron Lett . 24 (20): 2271–22274. doi : 10.1016 / S0040-4039 (00) 84506-2 .
  10. ^ Guzaev, AP; Manoharan, M. (2001). "Grupo 2-benzamidoetilo - un nuevo tipo de grupo protector de fosfato para la síntesis de oligonucleótidos". Mermelada. Chem. Soc . 123 (5): 783–793. doi : 10.1021 / ja0016396 . PMID 11456611 . 
  11. ^ Sproat, B .; Colonna, F .; Mullah, B .; Tsou, D .; Andrus, A .; Hampel, A .; Vinayak, R. (febrero de 1995). "Un método eficaz para el aislamiento y purificación de oligoribonucleótidos". Nucleósidos y nucleótidos . 14 (1 y 2): 255–273. doi : 10.1080 / 15257779508014668 . ISSN 0261-3166 . 
  12. ^ Stutz, A .; Hobartner, C .; Pitsch, S. (septiembre de 2000). "Nuevos grupos protectores de nucleobase lábiles al fluoruro para la síntesis de secuencias de ARN 3 '(2') - O-amino-acilado". Helv. Chim. Acta . 83 (9): 2477–2503. doi : 10.1002 / 1522-2675 (20000906) 83: 9 <2477 :: aid-hlca2477> 3.0.co; 2-9 . ISSN 0018-019X . 
  13. ^ Welz, R .; Muller, S. (enero de 2002). "5- (Bencilmercapto) -1H-tetrazol como activador de bloques de construcción de fosforamidita 2'-O-TBDMS en la síntesis de ARN". Letras de tetraedro . 43 (5): 795–797. doi : 10.1016 / S0040-4039 (01) 02274-2 . ISSN 0040-4039 . 
  14. ^ Vargeese, C .; Carter, J .; Yegge, J .; Krivjansky, S .; Settle, A .; Kropp, E .; Peterson, K .; Pieken, W. (1998). "Activación eficiente de fosforamiditas de nucleósidos con 4,5-dicianoimidazol durante la síntesis de oligonucleótidos" . Ácidos nucleicos Res . 26 (4): 1046-1050. doi : 10.1093 / nar / 26.4.1046 . ISSN 0305-1048 . PMC 147346 . PMID 9461466 .   
  15. ↑ a b c Gacs-Baitz, E .; Sipos, F .; Egyed, O .; Sagi, G. (2009). "Síntesis y estudio estructural de derivados diastereoméricos de 5'-dimetoxitritil-timidina-3'-O- [O- (2-cianoetil) -N, N-diisopropil] -fosforamidita oxidados diversamente. Comparación de los efectos de P = O, P = S y P = Se funciona en las propiedades cromatográficas y espectrales de RMN ". Quiralidad . 21 (7): 663–673. doi : 10.1002 / chir.20653 . PMID 18937288 . 
  16. ^ a b Nemer, MJ; Ogilvie, KK (1980). "Análogos de fosforamidato de monofosfatos de diribonucleósido". Tetrahedron Lett . 21 (43): 4153–4154. doi : 10.1016 / s0040-4039 (00) 93675-x .
  17. ^ Wilk, A .; Uznanski, B .; Stec, WJ (1991). "Asignación de configuración absoluta en fósforo en ditimidilil (3 ', 5') fosforforfolidatos y -fosforfolidotioatos". Nucleósidos y nucleótidos . 10 (1–3): 319–322. doi : 10.1080 / 07328319108046469 .
  18. ^ Guzaev, AP (2011). "Reactividad de 3H-1,2,4-ditiazol-3-tionas y 3H-1,2-ditiol-3-tionas como agentes sulfurantes para la síntesis de oligonucleótidos". Letras de tetraedro . 52 (3): 434–437. doi : 10.1016 / j.tetlet.2010.11.086 .
  19. ^ Holloway, GA; Pavot, C .; Scaringe, SA; Lu, Y .; Rauchfuss, TB (2002). "Una ruta organometálica a oligonucleótidos que contienen fosforoselenoato". ChemBioChem . 3 (11): 1061–1065. doi : 10.1002 / 1439-7633 (20021104) 3:11 <1061 :: aid-cbic1061> 3.0.co; 2-9 . PMID 12404630 . 
  20. ^ Ravikumar, VT; Kumar, RK (2004). "Síntesis estereoselectiva de alquilfosfonatos: un reordenamiento fácil de fosforamiditos de nucleósidos protegidos con cianoetilo". Org. Proceso Res. Dev . 8 (4): 603–608. doi : 10.1021 / op030035u .
  21. ^ "Beta-cianoetil fosforamiditas" . Products.appliedbiosystems.com . Consultado el 12 de mayo de 2009 .
  22. ^ "Tecnologías de biosearch" . Biosearchtech.com . Consultado el 12 de mayo de 2009 .
  23. ^ "ChemGenes Corporation, una empresa de biotecnología" . Chemgenes.com . Consultado el 12 de mayo de 2009 .
  24. ↑ M. Powell (17 de enero de 2008). "Instrumentos de biosistemas aplicados" . Glenresearch.com . Consultado el 12 de mayo de 2009 .
  25. ^ "Síntesis y etiquetado de ácidos nucleicos" . Thermo.com. 2008-08-16. Archivado desde el original el 28 de febrero de 2009 . Consultado el 12 de mayo de 2009 .
  26. ^ Gryaznov, SM; Letsinger, RL (1991). "Síntesis de oligonucleótidos vía monómeros con bases desprotegidas". Mermelada. Chem. Soc . 113 (15): 5876–5877. doi : 10.1021 / ja00015a059 .
  27. ^ a b Reddy, diputado; Hanna, NB; Farooqui, F. (1997). "Escisión ultrarrápida y desprotección de síntesis de oligonucleótidos y uso de derivados de C Ac ". Nucleósidos y nucleótidos . 16 (7-9): 1589-1598. doi : 10.1080 / 07328319708006236 .
  28. ^ McMinn, D. (1997). "Síntesis de oligonucleótidos que contienen 3'-alquilaminas usando fosforamidita deoxiadenosina protegida con N-isobutirilo". Tetrahedron Lett . 38 (18): 3123. doi : 10.1016 / S0040-4039 (97) 00568-6 .
  29. ^ Schulhof, JC; Molko, D .; Teoule, R. (1987). "El paso de desprotección final en la síntesis de oligonucleótidos se reduce a un tratamiento con amoníaco suave y rápido mediante el uso de grupos protectores de bases lábiles" . Ácidos nucleicos Res . 15 (2): 397–416. doi : 10.1093 / nar / 15.2.397 . PMC 340442 . PMID 3822812 .  
  30. ^ Zhu, Q. (2001). "Observación y eliminación de N-acetilación de oligonucleótidos preparados utilizando fosforamiditas de desprotección rápida y desprotección ultra suave". Bioorg. Medicina. Chem. Lett . 11 (9): 1105–7. doi : 10.1016 / S0960-894X (01) 00161-5 . PMID 11354354 . 
  31. ^ McBride, LJ; Kierzek, R .; Beaucage, SL; Caruthers, MH (1986). "Química de nucleótidos. 16. Grupos protectores de amidina para la síntesis de oligonucleótidos". Mermelada. Chem. Soc . 108 (8): 2040. doi : 10.1021 / ja00268a052 .
  32. ^ Sinha, ND; Biernat, J .; McManus, J .; Koester, H. (1984). “Síntesis de oligonucleótidos de soporte de polímero. XVIII: uso de β-cianoetil-N, N-dialquilamino- / N-morfolino fosforamidita de desoxinucleósidos para la síntesis de fragmentos de ADN simplificando la desprotección y aislamiento del producto final” . Ácidos nucleicos Res . 12 (11): 4539–4557. doi : 10.1093 / nar / 12.11.4539 . PMC 318857 . PMID 6547529 .  
  33. ^ Guzaev, AP; Manoharan, M. (2001). "Acoplamiento de fosforamidita a oligonucleótidos que llevan restos de fosfato internucleosídico desprotegidos". J. Org. Chem . 66 (5): 1798–1804. doi : 10.1021 / jo001591e . PMID 11262130 . 
  34. ^ Ogilvie, KK; Theriault, N .; Sadana, KL (1977). "Síntesis de oligoribonucleótidos". Mermelada. Chem. Soc . 99 (23): 7741–7743. doi : 10.1021 / ja00465a073 . PMID 915168 . 
  35. ^ Usman, N .; Ogilvie, KK; Jiang, MI; Cedergren, RJ (1987). "La síntesis química automatizada de oligoribuncleótidos largos utilizando ribonucleósido 2'-O-sililado 3'-O-fosforamiditas en un soporte de vidrio de poro controlado: síntesis de una secuencia de 43 nucleótidos similar a la mitad 3'-molécula de una formilmetionina de Escherichia coli ARNt ". Mermelada. Chem. Soc . 109 (25): 7845–7854. doi : 10.1021 / ja00259a037 .
  36. ^ Usman, N .; Pon, RT; Ogilvie, KK (1985). "Preparación de ribonucleósidos 3'-O-fosforamiditos y su aplicación a la síntesis automatizada de oligonucleótidos en fase sólida". Tetrahedron Lett . 26 (38): 4567–4570. doi : 10.1016 / S0040-4039 (00) 98753-7 .
  37. ^ Scaringe, SA; Francklyn, C .; Usman, N. (1990). "Síntesis química de oligoribonucleótidos biológicamente activos usando fosforamiditas de ribonucleósido protegidas con β-cianoetilo" . Ácidos nucleicos Res . 18 (18): 5433–5441. doi : 10.1093 / nar / 18.18.5433 . PMC 332221 . PMID 2216717 .  
  38. ^ Pitsch, S .; Weiss, PA; Wu, X .; Ackermann, D .; Honegger, T. (1999). "Síntesis automatizada rápida y confiable de ARN y precursores parcialmente protegidos en 2'-O (" ARN enjaulado ") basada en dos nuevos grupos ortogonales protectores de 2'-O". Helv. Chim. Acta . 82 (10): 1753-1761. doi : 10.1002 / (SICI) 1522-2675 (19991006) 82:10 <1753 :: AID-HLCA1753> 3.0.CO; 2-Y .
  39. ^ Pitsch, S .; Weiss, PA; Jenny, L .; Stutz, A .; Wu, X. (2001). "Síntesis química confiable de oligoribonucleótidos (ARN) con fosforamiditas protegidas con 2'-O - [(triisopropilsilil) oxi] metil (2'-O-tom)". Helv. Chim. Acta . 84 (12): 3773–3795. doi : 10.1002 / 1522-2675 (20011219) 84:12 <3773 :: AID-HLCA3773> 3.0.CO; 2-E .

Otras lecturas

  • Química integral de productos naturales, volumen 7: ADN y aspectos de la biología molecular. Kool, Eric T .; Editor. Neth. (1999), 733 págs. Editor: (Elsevier, Amsterdam, Neth.)
  • Beaucage SL, Iyer RP (1992). "Avances en la síntesis de oligonucleótidos por el enfoque de la fosforamidita" . Tetraedro . 48 (12): 2223–2311. doi : 10.1016 / s0040-4020 (01) 88752-4 .
  • Beaucage SL, Iyer RP (1993). "La funcionalización de oligonucleótidos mediante derivados de fosforamidita" . Tetraedro . 49 (10): 1925–1963. doi : 10.1016 / s0040-4020 (01) 86295-5 .
  • Beaucage SL, Iyer RP (1993). "La síntesis de oligonucleótidos modificados por el enfoque de la fosforamidita y sus aplicaciones" . Tetraedro . 49 (28): 6123–6194. doi : 10.1016 / s0040-4020 (01) 87958-8 .
  • Beaucage, S L. "Síntesis de oligodesoxirribonucleótidos. Enfoque de fosforamidita. Methods in Molecular Biology (Totowa, NJ, Estados Unidos) (1993), 20 (Protocolos para oligonucleótidos y análogos), 33-61.
  • Reese CB (2002). "La síntesis química de oligo y polinucleótidos: un comentario personal". Tetraedro . 58 (44): 8893–8920. doi : 10.1016 / s0040-4020 (02) 01084-0 .
  • Brown T., Brown DJS 1991. En Oligonucleotides and Analogues. Un enfoque práctico, ed. F Eckstein, págs. 1 - 24. Oxford: IRL
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