La capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno ( ORAC ) fue un método para medir las capacidades antioxidantes en muestras biológicas in vitro . [1] [2] Debido a que no existían pruebas fisiológicas in vivo que respaldaran la teoría de los radicales libres o que ORAC proporcionara información relevante sobre el potencial antioxidante biológico, se retiró en 2012. [3] [4]
Se probaron varios alimentos utilizando este método, con ciertas especias , bayas y legumbres calificadas altamente en tablas extensas una vez publicadas por el Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA). Las mediciones alternativas incluyen el reactivo de Folin-Ciocalteu y el ensayo de capacidad antioxidante equivalente de Trolox .
Método
El ensayo mide la degradación oxidativa de la molécula fluorescente (ya sea beta-ficoeritrina o fluoresceína ) después de mezclarse con generadores de radicales libres como compuestos azoiniciadores . Se considera que los azoiniciadores producen el radical peroxilo por calentamiento, lo que daña la molécula fluorescente y da como resultado la pérdida de fluorescencia. Se considera que los antioxidantes protegen la molécula fluorescente de la degeneración oxidativa. El grado de protección se cuantifica con un fluorómetro . Actualmente, la fluoresceína se utiliza principalmente como sonda fluorescente. Los equipos que pueden medir y calcular automáticamente la capacidad están disponibles comercialmente (Biotek, Roche Diagnostics).
La intensidad fluorescente disminuye a medida que avanza la degeneración oxidativa, y esta intensidad se registra típicamente durante 35 minutos después de la adición del azoiniciador (generador de radicales libres). Hasta ahora, AAPH (2,2'-azobis (2-amidino-propano) diclorhidrato) es el único generador de radicales libres utilizado. La degeneración (o descomposición) de la fluoresceína se mide a medida que la presencia del antioxidante ralentiza la disminución de la fluorescencia. Se registran las curvas de desintegración (intensidad de fluorescencia frente al tiempo) y se calcula el área entre las dos curvas de desintegración (con o sin antioxidante). Posteriormente, se cuantifica el grado de protección mediada por antioxidantes utilizando el antioxidante trolox (un análogo de la vitamina E) como estándar. Se utilizan diferentes concentraciones de trolox para hacer una curva estándar, y las muestras de prueba se comparan con esta. Los resultados de las muestras de prueba (alimentos) se han publicado como "equivalentes de trolox" o TE. [5] [6]
Un beneficio de utilizar el método ORAC para evaluar las capacidades antioxidantes de las sustancias es que tiene en cuenta muestras con y sin fases de retraso de sus capacidades antioxidantes. Esto es especialmente beneficioso cuando se miden alimentos y suplementos que contienen ingredientes complejos con varios antioxidantes de acción lenta y rápida, así como ingredientes con efectos combinados que no se pueden calcular previamente.
Los inconvenientes de este método son: 1) solo se mide la actividad antioxidante contra radicales particulares (probablemente principalmente peroxilo); sin embargo, nunca se ha probado la formación de radicales peroxilo; 2) no se caracteriza la naturaleza de la reacción dañina; 3) no hay evidencia de que los radicales libres estén involucrados en esta reacción; y 4) no hay evidencia de que los valores ORAC tengan algún significado biológico luego del consumo de cualquier alimento. Además, no se ha establecido la relación entre los valores ORAC y un beneficio para la salud.
Como resultado de la refutación científica de la importancia fisiológica de ORAC, el USDA, que había estado recopilando y publicando datos de ORAC durante más de una década, retiró su publicación web de los valores de ORAC para alimentos estadounidenses comunes en mayo de 2012. [3]
Se han propuesto varios métodos ORAC modificados. La mayoría de ellos emplean el mismo principio (es decir, medición del daño de fluoresceína mediado por radicales AAPH); sin embargo, ORAC-EPR, el método ORAC basado en resonancia paramagnética de electrones, mide directamente la disminución del nivel de radicales AAPH mediante la acción depuradora de la sustancia antioxidante. [7]
Orientación regulatoria
En la siguiente discusión, el término "antioxidante" se refiere principalmente a compuestos no nutritivos en los alimentos, como los polifenoles , que tienen capacidad antioxidante in vitro , por lo que proporcionan un índice artificial de fuerza antioxidante: la medida ORAC.
Aparte de las vitaminas antioxidantes de la dieta ( vitamina A , vitamina C y vitamina E) , no se ha demostrado la eficacia antioxidante de ningún compuesto alimentario in vivo . [ cita requerida ] En consecuencia, las agencias reguladoras como la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos y la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA) han publicado una guía que prohíbe que las etiquetas de los productos alimenticios afirmen o impliquen un beneficio antioxidante cuando no existe tal evidencia fisiológica. [8] [9] Esta guía para los Estados Unidos y la Unión Europea establece que es ilegal implicar posibles beneficios para la salud en las etiquetas de los paquetes de productos con alto ORAC.
Contexto fisiológico
Aunque la investigación in vitro indica que los polifenoles son buenos antioxidantes y probablemente influyen en el valor ORAC, los efectos antioxidantes in vivo probablemente sean insignificantes o inexistentes. [3] [10] Mediante mecanismos no antioxidantes aún sin definir, los flavonoides y otros polifenoles pueden reducir el riesgo de enfermedad cardiovascular y cáncer. [11]
Según lo interpretado por el Instituto Linus Pauling , la EFSA y el USDA, los polifenoles dietéticos tienen poco o ningún valor alimenticio antioxidante directo después de la digestión. [3] [9] [10] [12] A diferencia de las condiciones controladas de probeta, el destino de los polifenoles in vivo muestra que están mal conservados (menos del 5%), y la mayor parte de lo que se absorbe existe como metabolitos químicamente modificados destinados a excreción rápida. [13]
El aumento de la capacidad antioxidante de la sangre que se observa después del consumo de alimentos ricos en polifenoles (ricos en ORAC) no es causado directamente por los polifenoles, pero es muy probable que se deba a un aumento de los niveles de ácido úrico derivado del metabolismo de los flavonoides. [12] [13] Según Frei, "ahora podemos seguir la actividad de los flavonoides en el cuerpo, y una cosa que está clara es que el cuerpo los ve como compuestos extraños y está tratando de deshacerse de ellos". [13]
Fuentes de comida
Los valores se expresan como la suma de las fracciones de antioxidantes solubles en lípidos (p. Ej., Carotenoides ) y solubles en agua (p. Ej., Fenólicos ) (es decir, "ORAC total") expresadas como equivalentes de micromoles trolox (TE) por 100 gramos de muestra, y se comparan con evaluaciones del contenido total de polifenoles en las muestras.
Estos valores son considerados biológicamente irrelevantes por la EFSA y el USDA. [3] [9]
Comida | Tamaño de la porción | ORAC, Trolox equiv., Μmol por 100 g |
---|---|---|
Ciruela pasa | 1 taza | 14.582 |
Frijol rojo pequeño | ½ taza de frijoles secos | 13,727 |
Arándano salvaje | 1 taza | 13,427 |
Frijol rojo | ½ taza de frijoles secos | 13,259 |
Judía pinta | ½ taza | 11,864 |
Arándano | 1 taza cruda (bayas enteras) | 9.584 |
Arándano | 1 taza cruda (bayas cultivadas) | 9.019 |
Corazones de alcachofa | 1 taza, cocida | 7,904 |
Grano de cacao crudo sin procesar | 1 onza | 7.840 |
Mora | 1 taza cruda (bayas cultivadas) | 7.701 |
Frambuesa | 1 taza | 6.058 |
fresa | 1 taza | 5.938 |
Manzana Red Delicious | 1 manzana | 5.900 |
Manzana Granny Smith | 1 manzana | 5.381 |
Pacana | 1 onza | 5.095 |
Cereza dulce | 1 taza | 4.873 |
Ciruela negra | 1 ciruela | 4.844 |
Papa rojiza | 1, cocido | 4.649 |
Chokeberry | 1 onza | 4.497 |
Frijol negro | ½ taza de frijoles secos | 4.181 |
Ciruela | 1 ciruela | 4.118 |
Manzana gala | 1 manzana | 3.903 |
Granada | 100 gramos | 2.860 |
Con casi todas las verduras, la ebullición convencional puede reducir el valor de ORAC hasta en un 90%, mientras que la cocción al vapor retiene más antioxidantes. [14] Ganoderma
Comparaciones de valores ORAC
El Departamento de Agricultura de los Estados Unidos, anteriormente editor de datos ORAC, retiró su publicación web de los valores ORAC para alimentos estadounidenses comunes en 2012 debido a la ausencia de evidencia científica de que ORAC tiene algún significado biológico. [3]
Al comparar los datos de ORAC, se debe tener cuidado para asegurarse de que las unidades y los alimentos que se comparan sean similares. Algunas evaluaciones compararán las unidades de ORAC por gramo de peso seco del alimento intacto o su polvo molido, otras evaluarán las unidades de ORAC en peso húmedo fresco o congelado, y otras verán las unidades de ORAC por porción. Bajo cada evaluación, diferentes alimentos pueden parecer tener valores ORAC más altos. Por ejemplo, aunque una uva no tiene más potencial antioxidante que la uva de la que se secó, las pasas parecerán tener un valor ORAC más alto por gramo de peso húmedo que las uvas debido a su contenido reducido de agua. Del mismo modo, el gran contenido de agua en la sandía puede hacer que parezca que esta fruta tiene un bajo contenido de ORAC. Del mismo modo, se debe considerar la cantidad típica de alimentos utilizados; Las hierbas y especias pueden tener un alto contenido de ORAC, pero se aplican en cantidades mucho más pequeñas en comparación con los alimentos integrales intactos. [15]
Numerosas empresas y comercializadores de alimentos y bebidas saludables han capitalizado erróneamente la calificación ORAC promocionando productos que se dice que tienen un "alto ORAC". Dado que la mayoría de estos valores de ORAC no se han validado de forma independiente ni se han sometido a revisión por pares para su publicación en la literatura científica, siguen sin estar confirmados, no son científicamente creíbles y pueden inducir a error a los consumidores.
Ver también
- Lista de antioxidantes en los alimentos
- Antioxidantes de polifenoles
- Potencial de reducción
- Trolox ( TEAC )
Referencias
- ^ Cao G, Alessio HM, Cutler RG (1993). "Ensayo de capacidad de absorbancia de radicales de oxígeno para antioxidantes" (PDF) . Radic libre. Biol. Med . 14 (3): 303-11. doi : 10.1016 / 0891-5849 (93) 90027-R . PMID 8458588 . Archivado desde el original el 24 de julio de 2018 . Consultado el 11 de septiembre de 2019 .
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enlaces externos
- Xu, Baojun; Chang, Sam KC (2008). "Efecto de remojar, hervir y cocer al vapor sobre el contenido fenólico total y las actividades antioxidantes de las legumbres alimentarias de estación fría". Química de los alimentos . 110 (1): 1–13. doi : 10.1016 / j.foodchem.2008.01.045 . PMID 26050159 .