El medio NYC (ciudad de Nueva York ) o agar medio GC ( Neisseria gonorrhoeae ) se utiliza para aislar gonococos . [1]
Composición
La base de agar está compuesta por: [1]
Ingredientes | Gramos por litro |
---|---|
Peptona proteosa | 15 |
Maicena | 1 |
Glucosa | 5 |
Cloruro de sodio | 5 |
Hidrogenofosfato dipotásico | 4 |
Dihidrógeno fosfato de potasio | 1 |
Agar | 20 |
PH final (a 25 ° C) 7,4 ± 0,2
Antecedentes y principios
NYC Agar Base fue desarrollado originalmente por Fauer, Weisburd y Wilson [1] [2] [3] en el Departamento de Salud de la Ciudad de Nueva York para el aislamiento selectivo de especies patógenas de Neisseria a partir de muestras clínicas. Consiste principalmente en una base de agar peptona-almidón de maíz tamponada con fosfatos y complementada con plasma de caballo , hemoglobina de caballo , dextrosa , autolisado de levadura y antibióticos . [1] [2] Este medio es superior a otros medios generalmente empleados para el aislamiento de especies de Neisseria . [1] [4] [5] La naturaleza transparente del medio ayuda a estudiar los tipos coloniales. [6]
La peptona proteosa, el plasma de caballo y la hemoglobina proporcionan nutrientes para el crecimiento de N. gonorrhoeae y N. meningitidis . El fosfato amortigua el medio. El suplemento selectivo agregado contiene los antibióticos vancomicina , colistina , nistatina y trimetoprima , para suprimir la flora acompañante. La vancomicina es inhibidora para gram-positivas bacterias. La colistina inhibe las bacterias gramnegativas , incluidas las especies de Pseudomonas , mientras que Proteus es inhibida por la trimetoprima . [7] La combinación de trimetoprima y colistina actúa de forma sinérgica contra los bacilos gramnegativos . [8] El almidón neutraliza los metabolitos tóxicos producidos por Neisseria . El suplemento de autolisado de levadura cumple con los requisitos de CO2 necesarios para mejorar el crecimiento de Neisseria . La levadura contiene ácido oxaloacético que es metabolizado por gonococos para producir suficiente CO2 para el crecimiento de gonococos capnofílicos. [9] Además, la presencia de autolisado de levadura reduce la fase de retraso del crecimiento de Neisseria , lo que mejora tanto el tamaño como el número de colonias. La muestra se puede sembrar directamente sobre el medio para obtener el máximo aislamiento.
Procedimiento
Separe la muestra lo antes posible después de recibirla en el laboratorio . Si el material se está cultivando directamente de un hisopo , proceda de la siguiente manera: [10]
- Enrolle el hisopo directamente sobre el medio en una "Z" grande para proporcionar una exposición adecuada del hisopo al medio para la transferencia de organismos .
- Haga una trama cruzada del patrón en “Z” con un lazo de alambre estéril , preferiblemente en la clínica . Si no se ha realizado previamente, el rayado cruzado debe realizarse en el laboratorio.
- Coloque el cultivo lo antes posible en un ambiente aeróbico enriquecido con dióxido de carbono .
- Incubar a 35 ± 2 ° C y examinar después de la incubación durante la noche y nuevamente después de aproximadamente 48 horas.
- El subcultivo para la identificación de N. gonorrhoeae debe realizarse en un plazo de 18 a 24 horas. Si se envían después de la incubación, las colonias deben subcultivarse antes de realizar las pruebas de identificación bioquímica para garantizar que se logre una viabilidad adecuada.
Resultados previstos
La morfología colonial típica es la siguiente: [7]
N. gonorrhoeae puede aparecer como colonias mucoides pequeñas (0,5–1,0 mm) de color blanco grisáceo a incoloras. N. meningitidis aparece como grandes colonias mucoides de incoloras a gris azulado.
Las colonias se pueden seleccionar para tinción de Gram , subcultivo u otros procedimientos de diagnóstico.
Referencias
- ^ a b c d e Fauer, Weisburd, Wilson y mayo de 1973, Laboratorio de salud. Sci., 10:44.
- ^ a b Fauer, Weisburd y Wilson, 1973, Laboratorio de salud. Sci., 10:55.
- ^ Fauer YC, Weisburd MH y Wilson ME, 1973, Health Lab Sci., 10 (2) 61.
- ^ Granato, Schneible-Smith y Weiner, 1981, J. Clin. Microbiol 13: 963.
- ^ Griffin PJ y Reider SV, 1957, J. Biol. Med., 29, 613
- ^ MacFaddin JF, 1985, Medios para aislamiento-cultivo-identificación-mantenimiento de bacterias médicas, vol. 1, Williams y Wilkins, Baltimore
- ^ a b Knapp y Koumans. 1999. En Murray, Baron, Pfaller, Tenover y Yolken (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 7ª ed. Sociedad Estadounidense de Microbiología, Washington, DC
- ^ . Simmons NA, 1970, J. Clin. Pathol., 23, 757.
- ^ Lawton y Koch, 1982, J. Clin. Microbiol., 20: 905.
- ^ Centro de Control de Enfermedades. 1975. Criterios y técnicas para el diagnóstico de gonorrea, USPHS, Atlanta, Ga.