Tinción supravital
La tinción supravital es un método de tinción utilizado en microscopía para examinar células vivas que se han eliminado de un organismo. Se diferencia de la tinción intravital , que se realiza inyectando o introduciendo la tinción en el cuerpo. Por lo tanto, una tinción supravital puede tener una mayor toxicidad , ya que solo unas pocas células necesitan sobrevivir por un corto tiempo. Algunos autores utilizan el término " tinción vital " para referirse específicamente a una tinción intravital, y otros de manera intercambiable con una tinción supravital, siendo el concepto central que la célula que se examina todavía está viva. Como las células están vivas y no fijadas, fuera del cuerpo, las manchas supravitales son de naturaleza temporal. [1] [2]
La tinción supravital más común se realiza en reticulocitos utilizando azul de metileno nuevo o azul de cresilo brillante , lo que permite ver el patrón reticulofilamentoso de los ribosomas precipitado característicamente en estos eritrocitos vivos inmaduros por las tinciones supravitales. Contando el número de tales células se puede determinar la tasa de formación de glóbulos rojos, lo que proporciona una idea de la actividad de la médula ósea y la anemia . [3] Esto contrasta con la tinción vital , cuando el tinte empleado es uno que está excluidode las células vivas de modo que solo las células muertas se tiñen positivamente. (Las tinciones vitales incluyen tintes como el azul tripán y el yoduro de propidio , que son demasiado voluminosos o demasiado cargados para cruzar la membrana celular, o que las células vivas bombean de forma activa y rápida).
La tinción supravital se puede combinar con la tinción de anticuerpos de la superficie celular ( inmunofluorescencia ) para aplicaciones como el análisis FACS . [4] La inmunofluorescencia también se puede realizar dentro del interior de las células vivas mediante permeabilización celular reversible utilizando el detergente Triton X-100 . Ajustado cuidadosamente a la concentración apropiada para el número de células, el pretratamiento puede permitir el acceso de moléculas entre 1 y 150 kilodaltons al interior de la célula. [5] Aunque los anticuerpos pueden usarse de una manera similar en este contexto, el término "tinción supravital" se reserva típicamente para productos químicos más pequeños que poseen propiedades adecuadas intrínsecamente.
Ejemplos de tintes supravitales comunes
Colorantes supravitales para glóbulos rojos: [6]
Referencias
- ^ "Diccionario médico inglés" .
- ^ N. Chandler Foot (1954). "Tinción vital". Anales de la Academia de Ciencias de Nueva York . 59 (2): 259–267. doi : 10.1111 / j.1749-6632.1954.tb45936.x . PMID 13229212 .
- ^ John P. Greer; Maxwell Myer Wintrobe (2008). Hematología clínica de Wintrobe . ISBN 9780781765077.
- ^ Tina Carlsen; Richard Langlois; Erin Bissell. "Informe final de prueba de concepto de inmunoensayo / sistema de tinción vital (IVSS)" (PDF) . Laboratorio Nacional Lawrence Livermore.
- ^ Anne L van de Ven, Karen Adler-Storthz y Rebecca Richards-Kortum (2009). "Entrega de agentes de contraste óptico utilizando Triton-X100, parte 1: permeabilización reversible de células vivas para marcaje intracelular" . J Biomed Opt . 14 (2): 021012. doi : 10.1117 / 1.3090448 . PMC 2748244 . PMID 19405725 . CS1 maint: varios nombres: lista de autores ( enlace )
- ^ 2011 Glosario de hematología, microscopía clínica y fluidos corporales por CAP
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