Fluoresceína
La fluoresceína es un compuesto y colorante orgánico . Está disponible como un polvo de color naranja oscuro / rojo ligeramente soluble en agua y alcohol. Es ampliamente utilizado como un fluorescente trazador para muchas aplicaciones. [1]
La fluoresceína es un fluoróforo comúnmente utilizado en microscopía , en un tipo de láser de colorante como medio de ganancia , en medicina forense y serología para detectar manchas de sangre latentes y en el rastreo de tintes . La fluoresceína tiene un máximo de absorción a 494 nm y un máximo de emisión de 512 nm (en agua). Los principales derivados son el isotiocianato de fluoresceína (FITC) y, en la síntesis de oligonucleótidos , la fosforamidita 6-FAM .
El color de su solución acuosa varía de verde a naranja en función de la forma en que se observa: por reflejo o por transmisión, como se puede notar en los niveles de burbuja , por ejemplo, en los que se añade fluoresceína como colorante al relleno de alcohol . el tubo para aumentar la visibilidad de la burbuja de aire contenida en su interior (mejorando así la precisión del instrumento). Las soluciones más concentradas de fluoresceína pueden incluso aparecer rojas.
En biología celular, el derivado isotiocianato de la fluoresceína se usa a menudo para marcar y rastrear células en aplicaciones de microscopía de fluorescencia (por ejemplo, citometría de flujo ). También se pueden unir a la fluoresceína moléculas biológicamente activas adicionales (como los anticuerpos ), lo que permite a los biólogos dirigir el fluoróforo a proteínas o estructuras específicas dentro de las células. Esta aplicación es común en la exhibición de levadura .
La fluoresceína también puede conjugarse con nucleósidos trifosfatos e incorporarse en una sonda enzimáticamente para la hibridación in situ . El uso de amidita de fluoresceína, que se muestra a continuación a la derecha, permite sintetizar oligonucleótidos marcados con el mismo propósito. Aún otra técnica denominada balizas moleculares hace uso de oligonucleótidos sintéticos marcados con fluoresceína. Se pueden obtener imágenes de las sondas marcadas con fluoresceína usando FISH , o se pueden dirigir anticuerpos usando inmunohistoquímica . Esta última es una alternativa común a la digoxigenina., y los dos se utilizan juntos para marcar dos genes en una muestra. [3]
La fluoresceína sódica, la sal sódica de la fluoresceína, se usa ampliamente como herramienta de diagnóstico en el campo de la oftalmología y la optometría , donde la fluoresceína tópica se usa en el diagnóstico de abrasiones corneales , úlceras corneales e infecciones corneales herpéticas . También se utiliza en la adaptación de lentes de contacto rígidos permeables a los gases para evaluar la capa lagrimal debajo de la lente. Está disponible en sobres estériles de un solo uso que contienen aplicadores de papel sin pelusa empapados en solución de fluoresceína sódica. [4]
