Un secuenciador de ADN es un instrumento científico que se utiliza para automatizar el proceso de secuenciación del ADN . Dada una muestra de ADN , se utiliza un secuenciador de ADN para determinar el orden de las cuatro bases: G ( guanina ), C ( citosina ), A ( adenina ) y T ( timina ). Esto luego se informa como una cadena de texto , llamada lectura. Algunos secuenciadores de ADN también pueden considerarse instrumentos ópticos, ya que analizan señales de luz que se originan en fluorocromos unidos a nucleótidos .
Fabricantes | Roche , Illumina , Life Technologies , Beckman Coulter , Pacific Biosciences , MGI / BGI , Oxford Nanopore Technologies |
---|
El primer secuenciador de ADN automatizado, inventado por Lloyd M. Smith , fue introducido por Applied Biosystems en 1987. [1] Utilizaba el método de secuenciación de Sanger , una tecnología que formó la base de la "primera generación" de secuenciadores de ADN [2] [ 3] y permitió la finalización del proyecto del genoma humano en 2001. [4] Esta primera generación de secuenciadores de ADN son esencialmente sistemas de electroforesis automatizados que detectan la migración de fragmentos de ADN marcados. Por lo tanto, estos secuenciadores también se pueden usar en el genotipado de marcadores genéticos donde solo se necesita determinar la longitud de un fragmento de ADN (por ejemplo , microsatélites , AFLP ).
El Proyecto Genoma Humano estimuló el desarrollo de plataformas más baratas, de alto rendimiento y más precisas conocidas como Secuenciadores de Próxima Generación (NGS) para secuenciar el genoma humano . Estos incluyen las plataformas de secuenciación de ADN 454, SOLiD e Illumina . Las máquinas de secuenciación de próxima generación han aumentado sustancialmente la tasa de secuenciación de ADN, en comparación con los métodos Sanger anteriores. Las muestras de ADN se pueden preparar automáticamente en tan solo 90 minutos, [5] mientras que un genoma humano se puede secuenciar con una cobertura de 15 veces en cuestión de días. [6]
Los secuenciadores de ADN de tercera generación más recientes, como SMRT y Oxford Nanopore, miden la adición de nucleótidos a una sola molécula de ADN en tiempo real.
Debido a las limitaciones en la tecnología del secuenciador de ADN, estas lecturas son cortas en comparación con la longitud de un genoma, por lo que las lecturas deben ensamblarse en contigs más largos . [7] Los datos también pueden contener errores, causados por limitaciones en la técnica de secuenciación del ADN o por errores durante la amplificación por PCR . Los fabricantes de secuenciadores de ADN utilizan varios métodos diferentes para detectar qué bases de ADN están presentes. Los protocolos específicos aplicados en diferentes plataformas de secuenciación tienen un impacto en los datos finales que se generan. Por lo tanto, comparar la calidad y el costo de los datos entre diferentes tecnologías puede ser una tarea abrumadora. Cada fabricante proporciona sus propias formas de informar los errores de secuenciación y las puntuaciones. Sin embargo, los errores y las puntuaciones entre diferentes plataformas no siempre se pueden comparar directamente. Dado que estos sistemas se basan en diferentes enfoques de secuenciación de ADN, la elección del mejor secuenciador y método de ADN dependerá típicamente de los objetivos del experimento y el presupuesto disponible. [2]
Historia
Los primeros métodos de secuenciación del ADN fueron desarrollados por Gilbert (1973) [8] y Sanger (1975). [9] Gilbert introdujo un método de secuenciación basado en la modificación química del ADN seguida de escisión en bases específicas, mientras que la técnica de Sanger se basa en la terminación de la cadena de didesoxinucleótidos . El método Sanger se hizo popular debido a su mayor eficiencia y baja radiactividad. El primer secuenciador de ADN automatizado fue el AB370A, introducido en 1986 por Applied Biosystems . El AB370A pudo secuenciar 96 muestras simultáneamente, 500 kilobases por día y alcanzar longitudes de lectura de hasta 600 bases. Este fue el comienzo de la "primera generación" de secuenciadores de ADN, [2] [3] que implementó la secuenciación de Sanger, didesoxi nucleótidos fluorescentes y gel de poliacrilamida intercalados entre placas de vidrio: geles en placa. El siguiente gran avance fue el lanzamiento en 1995 del AB310, que utilizaba un polímero lineal en un capilar en lugar del gel en placa para la separación de las cadenas de ADN por electroforesis. Estas técnicas formaron la base para la finalización del proyecto del genoma humano en 2001. [4] El proyecto del genoma humano estimuló el desarrollo de plataformas más baratas, de alto rendimiento y más precisas conocidas como secuenciadores de próxima generación (NGS). En 2005, 454 Life Sciences lanzó el secuenciador 454, seguido de Solexa Genome Analyzer y SOLiD (Supported Oligo Ligation Detection) de Agencourt en 2006. Applied Biosystems adquirió Agencourt en 2006, y en 2007 Roche compró 454 Life Sciences, mientras que Illumina compró Solexa . Ion Torrent entró en el mercado en 2010 y fue adquirido por Life Technologies (ahora Thermo Fisher Scientific). Y BGI comenzó a fabricar secuenciadores en China después de adquirir Complete Genomics bajo su brazo MGI . Estos siguen siendo los sistemas NGS más comunes debido a su costo competitivo, precisión y rendimiento.
Más recientemente, se introdujo una tercera generación de secuenciadores de ADN. Los métodos de secuenciación aplicados por estos secuenciadores no requieren amplificación de ADN (reacción en cadena de la polimerasa - PCR), lo que acelera la preparación de la muestra antes de la secuenciación y reduce los errores. Además, se recopilan datos de secuenciación de las reacciones provocadas por la adición de nucleótidos en la hebra complementaria en tiempo real. Dos empresas introdujeron diferentes enfoques en sus secuenciadores de tercera generación. Los secuenciadores de Pacific Biosciences utilizan un método llamado Monolécula en tiempo real (SMRT), donde los datos de secuenciación son producidos por la luz (capturada por una cámara) emitida cuando se agrega un nucleótido a la hebra complementaria por enzimas que contienen tintes fluorescentes. Oxford Nanopore Technologies es otra empresa que desarrolla secuenciadores de tercera generación que utilizan sistemas electrónicos basados en tecnologías de detección de nanoporos.
Fabricantes de secuenciadores de ADN
Los secuenciadores de ADN han sido desarrollados, fabricados y vendidos por las siguientes empresas, entre otras.
Roche
El secuenciador de ADN 454 fue el primer secuenciador de próxima generación en tener éxito comercial. [10] Fue desarrollado por 454 Life Sciences y comprado por Roche en 2007. 454 utiliza la detección de pirofosfato liberado por la reacción de la ADN polimerasa al agregar un nucleótido a la cepa molde.
Roche fabrica actualmente dos sistemas basados en su tecnología de pirosecuenciación: el GS FLX + y el GS Junior System. [11] El sistema GS FLX + promete longitudes de lectura de aproximadamente 1000 pares de bases, mientras que el sistema GS Junior promete lecturas de 400 pares de bases. [12] [13] Un predecesor de GS FLX +, el sistema 454 GS FLX Titanium se lanzó en 2008, logrando una salida de 0,7 G de datos por ejecución, con una precisión del 99,9% después del filtro de calidad y una longitud de lectura de hasta 700 pb . En 2009, Roche lanzó GS Junior, una versión de sobremesa del secuenciador 454 con una longitud de lectura de hasta 400 pb, y una preparación de la biblioteca y un procesamiento de datos simplificados.
Una de las ventajas de los sistemas 454 es su velocidad de funcionamiento. La mano de obra se puede reducir con la automatización de la preparación de bibliotecas y la semiautomatización de la PCR en emulsión. Una desventaja del sistema 454 es que es propenso a errores al estimar el número de bases en una cadena larga de nucleótidos idénticos. Esto se conoce como error de homopolímero y ocurre cuando hay 6 o más bases idénticas en fila. [14] Otra desventaja es que el precio de los reactivos es relativamente más caro en comparación con otros secuenciadores de próxima generación.
En 2013, Roche anunció que suspendería el desarrollo de la tecnología 454 y eliminaría 454 máquinas por completo en 2016. [15] [16]
Roche produce una serie de herramientas de software que están optimizadas para el análisis de 454 datos de secuenciación. [17] GS Run Processor [18] convierte las imágenes sin procesar generadas por una secuencia de ejecución en valores de intensidad. El proceso consta de dos pasos principales: procesamiento de imágenes y procesamiento de señales. El software también aplica normalización, corrección de señal, llamadas de base y puntuaciones de calidad para lecturas individuales. El software genera datos en archivos de formato de diagrama de flujo estándar (o SFF) para ser utilizados en aplicaciones de análisis de datos (GS De Novo Assembler, GS Reference Mapper o GS Amplicon Variant Analyzer). GS De Novo Assembler es una herramienta para el ensamblaje de novo de genomas completos de hasta 3 GB de tamaño a partir de lecturas de escopeta solas o combinadas con datos finales emparejados generados por 454 secuenciadores. También admite el ensamblaje de novo de transcripciones (incluido el análisis) y también la detección de variantes de isoformas. [17] GS Reference Mapper asigna lecturas cortas a un genoma de referencia, generando una secuencia de consenso. El software puede generar archivos de salida para evaluación, indicando inserciones, eliminaciones y SNP. Puede manejar genomas grandes y complejos de cualquier tamaño. [17] Finalmente, el GS Amplicon Variant Analyzer alinea las lecturas de las muestras de amplicones con una referencia, identificando variantes (vinculadas o no) y sus frecuencias. También se puede utilizar para detectar variantes desconocidas y de baja frecuencia. Incluye herramientas gráficas para análisis de alineaciones. [17]
Illumina
Illumina produce una serie de máquinas secuenciadoras de próxima generación que utilizan tecnología adquirida de Manteia Predictive Medicine y desarrollada por Solexa. [19] Illumina fabrica varias máquinas de secuenciación de próxima generación que utilizan esta tecnología, incluidos HiSeq, Genome Analyzer IIx, MiSeq y HiScanSQ, que también pueden procesar microarrays . [20]
La tecnología que conduce a estos secuenciadores de ADN fue lanzada por primera vez por Solexa en 2006 como Genome Analyzer. [10] Illumina compró Solexa en 2007. El analizador de genomas utiliza un método de secuenciación por síntesis. El primer modelo produjo 1G por ejecución. Durante el año 2009, la producción se incrementó de 20G por corrida en agosto a 50G por corrida en diciembre. En 2010, Illumina lanzó HiSeq 2000 con una producción de 200 y luego 600G por ejecución, lo que llevaría 8 días. En su lanzamiento, HiSeq 2000 proporcionó una de las plataformas de secuenciación más baratas a $ 0.02 por millón de bases según los costos del Instituto de Genómica de Beijing .
En 2011, Illumina lanzó un secuenciador de sobremesa llamado MiSeq. En su lanzamiento, MiSeq podría generar 1,5 G por ejecución con lecturas de extremo emparejado de 150 pb. Se puede realizar una secuenciación en 10 horas cuando se utiliza la preparación automática de muestras de ADN. [10]
Illumina HiSeq utiliza dos herramientas de software para calcular el número y la posición de los grupos de ADN para evaluar la calidad de la secuenciación: el sistema de control HiSeq y el analizador en tiempo real. Estos métodos ayudan a evaluar si los grupos cercanos están interfiriendo entre sí. [10]
Tecnologías de vida
Life Technologies (ahora Thermo Fisher Scientific) produce secuenciadores de ADN bajo las marcas Applied Biosystems e Ion Torrent . Applied Biosystems fabrica la plataforma de secuenciación de próxima generación SOLiD, [21] y secuenciadores de ADN basados en Sanger como el 3500 Genetic Analyzer. [22] Bajo la marca Ion Torrent, Applied Biosystems produce cuatro secuenciadores de próxima generación: los sistemas Ion PGM, Ion Proton System, Ion S5 e Ion S5xl. [23] También se cree que la compañía está desarrollando su nuevo secuenciador de ADN capilar llamado SeqStudio que se lanzará a principios de 2018. [24]
Los sistemas SOLiD fueron adquiridos por Applied Biosystems en 2006. SOLiD aplica secuenciación por ligadura y codificación de base dual . El primer sistema SOLiD se lanzó en 2007, generando longitudes de lectura de 35 pb y datos 3G por ejecución. Después de cinco actualizaciones, el sistema de secuenciación 5500xl se lanzó en 2010, aumentando considerablemente la longitud de lectura a 85 pb, mejorando la precisión hasta un 99,99% y produciendo 30G por ejecución de 7 días. [10]
La longitud de lectura limitada de SOLiD sigue siendo una deficiencia significativa [25] y hasta cierto punto ha limitado su uso a experimentos donde la longitud de lectura es menos vital, como resecuenciación y análisis de transcriptomas y, más recientemente, ChIP-Seq y experimentos de metilación. [10] El tiempo de preparación de la muestra de ADN para los sistemas SOLiD se ha vuelto mucho más rápido con la automatización de las preparaciones de bibliotecas de secuenciación, como el sistema Tecan. [10]
Los datos del espacio de color producidos por la plataforma SOLiD se pueden decodificar en bases de ADN para un análisis posterior, sin embargo, el software que considera la información del espacio de color original puede proporcionar resultados más precisos. Life Technologies ha lanzado BioScope, [26] un paquete de análisis de datos para resecuenciación, ChiP-Seq y análisis de transcriptomas. Utiliza el algoritmo MaxMapper para mapear las lecturas del espacio de color.
Beckman Coulter
Beckman Coulter (ahora Danaher ) ha fabricado secuenciadores de ADN basados en electroforesis capilar y terminación de cadena con el nombre de modelo CEQ, incluido el CEQ 8000. La compañía ahora produce el Sistema de análisis genético GeXP, que utiliza secuenciación de terminación de colorante . Este método utiliza un termociclador de la misma manera que la PCR para desnaturalizar, aparear y extender fragmentos de ADN, amplificando los fragmentos secuenciados. [27] [28]
Biociencias del Pacífico
Pacific Biosciences produce los sistemas de secuenciación PacBio RS y Sequel utilizando un método de secuenciación en tiempo real de una sola molécula , o SMRT. [29] Este sistema puede producir longitudes de lectura de varios miles de pares de bases. Los errores de lectura en bruto más altos se corrigen utilizando consenso circular, donde se lee la misma hebra una y otra vez, o utilizando estrategias de ensamblaje optimizadas . [30] Los científicos han informado de una precisión del 99,9999% con estas estrategias. [31] El sistema Sequel se lanzó en 2015 con una mayor capacidad y un precio más bajo. [32] [33]
Oxford Nanopore
Oxford Nanopore Technologies ha comenzado a enviar las primeras versiones de su secuenciador MinION de secuenciación de nanoporos a laboratorios seleccionados. El dispositivo tiene cuatro pulgadas de largo y recibe energía de un puerto USB . MinION decodifica el ADN directamente a medida que la molécula se extrae a una velocidad de 450 bases / segundo a través de un nanoporo suspendido en una membrana. Los cambios en la corriente eléctrica indican qué base está presente. Tiene una precisión del 60 al 85 por ciento, en comparación con el 99,9 por ciento de las máquinas convencionales. Incluso los resultados inexactos pueden resultar útiles porque producen lecturas de gran longitud. GridION es un secuenciador un poco más grande que procesa hasta cinco celdas de flujo MinION a la vez. PromethION es otro producto (inédito) que utilizará hasta 100.000 poros en paralelo, más adecuado para la secuenciación de alto volumen. [35]
Comparación
Las ofertas actuales en tecnología de secuenciación de ADN muestran un jugador dominante: Illumina (diciembre de 2019), seguido de PacBio , MGI / BGI y Oxford Nanopore .
Secuenciador | Ion Torrent PGM [5] [37] [38] | 454 GS FLX [10] | HiSeq 2000 [5] [10] | SOLiDv4 [10] | PacBio [5] [39] | Sanger 3730xl [10] |
---|---|---|---|---|---|---|
Fabricante | Ion Torrent (Tecnologías de la vida) | 454 Ciencias de la vida (Roche) | Illumina | Biosistemas aplicados (tecnologías de la vida) | Biociencias del Pacífico | Biosistemas aplicados (tecnologías de la vida) |
Química de secuenciación | Secuenciación de semiconductores de iones | Pirosecuenciación | Secuencia por síntesis basada en polimerasa | Secuenciación basada en ligadura | Nucleótidos fluorescentes fosfolincados | Terminación de la cadena didesoxi |
Enfoque de amplificación | PCR en emulsión | PCR en emulsión | Amplificación de puente | PCR en emulsión | Molécula única; sin amplificación | PCR |
Salida de datos por ejecución | 100-200 Mb | 0,7 Gb | 600 Gb | 120 Gb | 0,5 - 1,0 Gb | 1,9∼84 Kb |
Precisión | 99% | 99,9% | 99,9% | 99,94% | 88,0% (> 99,9999% CCS o HGAP) | 99,999% |
Tiempo por ejecución | 2 horas | 24 horas | 3 a 10 días | 7-14 días | 2-4 horas | 20 minutos - 3 horas |
Longitud de lectura | 200-400 pb | 700 pb | Extremo emparejado 100x100 bp | Extremo emparejado de 50x50 pb | 14.000 pb ( N50 ) | 400-900 pb |
Costo por carrera | $ 350 USD | $ 7,000 USD | $ 6,000 USD (30 veces el genoma humano) | $ 4,000 USD | $ 125–300 USD | $ 4 USD (lectura / reacción única) |
Costo por Mb | $ 1.00 USD | $ 10 USD | 0,07 USD | 0,13 USD | $ 0.13 - $ 0.60 USD | $ 2400 dólares |
Costo por instrumento | $ 80,000 USD | $ 500,000 USD | $ 690,000 USD | $ 495,000 USD | $ 695,000 USD | $ 95,000 USD |
Referencias
- ^ Cook-Deegan, Robert Mullan (1991). "Orígenes del proyecto del genoma humano" . Revista FASEB . Universidad de Washington. 5 (1): 8-11. doi : 10.1096 / fasebj.5.1.1991595 . PMID 1991595 . S2CID 37792736 . Consultado el 20 de octubre de 2014 .
- ^ a b c Metzker, ML (2005). "Tecnologías emergentes en secuenciación de ADN" . Genome Res . 15 (12): 1767-1776. doi : 10.1101 / gr.3770505 . PMID 16339375 .
- ^ a b Hutchison, CA III. (2007). "Secuenciación de ADN: del banco a la cabecera y más allá" . Ácidos nucleicos Res . 35 (18): 6227–6237. doi : 10.1093 / nar / gkm688 . PMC 2094077 . PMID 17855400 .
- ^ a b FS Collins; M. Morgan; A. Patrinos (2003). "El proyecto del genoma humano: lecciones de la biología a gran escala" . Ciencia . 300 (5617): 286–290. Código Bibliográfico : 2003Sci ... 300..286C . doi : 10.1126 / science.1084564 . PMID 12690187 . S2CID 22423746 .
- ^ a b c d Michael A Quail, Miriam Smith, Paul Coupland, Thomas D Otto, Simon R Harris, Thomas R Connor, Anna Bertoni, Harold P Swerdlow y Yong Gu (2012) Una historia de tres plataformas de secuenciación de próxima generación: comparación de Secuenciadores Ion Torrent, Pacific Biosciences e Illumina MiSeq . BMC Genomics.
- ^ Michael A. Quail; Iwanka Kozarewa; Frances Smith; Aylwyn Scally; Philip J. Stephens; Richard Durbin; Harold Swerdlow; Daniel J. Turner (2008). "Mejoras de un gran centro de genoma en el sistema de secuenciación de Illumina" . Métodos Nat . 5 (12): 1005–1010. doi : 10.1038 / nmeth.1270 . PMC 2610436 . PMID 19034268 .
- ^ Heng Li, Jue Ruan y Richard Durbin (2008) http://genome.cshlp.org/content/18/11/1851 Mapeo de lecturas de secuenciación de ADN cortas y variantes de llamada utilizando puntuaciones de calidad de mapeo. Investigación del genoma.
- ^ Gilbert W., Maxam A. (1973). "La secuencia de nucleótidos del operador lac" . Proc Natl Acad Sci USA . 70 (12): 13581–3584. Código Bibliográfico : 1973PNAS ... 70.3581G . doi : 10.1073 / pnas.70.12.3581 . PMC 427284 . PMID 4587255 .
- ^ Sanger F, Coulson AR (mayo de 1975). "Un método rápido para la determinación de secuencias de ADN mediante síntesis cebada con ADN polimerasa". J. Mol. Biol . 94 (3): 441–8. doi : 10.1016 / 0022-2836 (75) 90213-2 . PMID 1100841 .
- ^ a b c d e f g h yo j k Lin Liu; Yinhu Li; Siliang Li; Ni Hu; Yimin He; Ray Pong; Danni Lin; Lihua Lu; Ley de Maggie (2012). "Comparación de sistemas de secuenciación de próxima generación" . Revista de Biomedicina y Biotecnología . 2012 : 251364. doi : 10.1155 / 2012/251364 . PMC 3398667 . PMID 22829749 .
- ^ "Productos: 454 Life Sciences, una empresa de Roche" . Archivado desde el original el 13 de septiembre de 2012 . Consultado el 5 de septiembre de 2012 .
- ^ "Productos - Sistema GS FLX +: 454 Life Sciences, una empresa de Roche" . Archivado desde el original el 5 de septiembre de 2012 . Consultado el 5 de septiembre de 2012 .
- ^ "Productos - GS Junior System: 454 Life Sciences, una empresa de Roche" . Archivado desde el original el 13 de septiembre de 2012 . Consultado el 5 de septiembre de 2012 .
- ^ Mardis, Elaine R. (1 de septiembre de 2008). "Métodos de secuenciación de ADN de próxima generación". Revisión anual de genómica y genética humana . 9 (1): 387–402. doi : 10.1146 / annurev.genom.9.081307.164359 . PMID 18576944 . S2CID 2484571 .
- ^ http://www.genomeweb.com/sequencing/roche-shutting-down-454-sequencing-business Roche cierra el negocio de secuenciación 454
- ^ http://www.bio-itworld.com/2013/4/23/roche-shuts-down-third-generation-ngs-research-programs.html Roche cierra los programas de investigación de NGS de tercera generación
- ^ a b c d "Productos - Software de análisis: 454 Life Science, una empresa de Roche" . Archivado desde el original el 19 de febrero de 2009 . Consultado el 23 de octubre de 2013 .
- ^ Manual de software del sistema Genome Sequencer FLX, versión 2.3
- ^ El progreso de Solexa está en los genes - Businessweek
- ^ Sistemas Illumina
- ^ SOLID
- ^ Secuenciación de Sanger | Tecnologías de vida
- ^ http://www.thermofisher.com/iontorrent Ion Torrent
- ^ "Analizador genético Applied Biosystems SeqStudio - EE . UU . " .
- ^ Precisión del sistema SOLiD
- ^ Software SOLiD BioScope | Tecnologías de vida
- ^ Rai, Alex J .; Kamath, Rashmi M .; Gerald, William; Fleisher, Martin (29 de octubre de 2008). "Validación analítica del analizador GeXP y diseño de un flujo de trabajo para el descubrimiento de biomarcadores de cáncer utilizando perfiles de expresión génica multiplexados". Química analítica y bioanalítica . 393 (5): 1505-1511. doi : 10.1007 / s00216-008-2436-7 . PMID 18958454 . S2CID 46721686 .
- ^ Beckman Coulter, Inc - Sistema de análisis genético GenomeLab GeXP
- ^ Biociencias del Pacífico: Sistemas PacBio
- ^ Koren, S; Schatz, MC; Walenz, BP; Martin, J; Howard, JT; Ganapatía, G; Wang, Z; Rasko, DA; McCombie, WR; Jarvis, ED; Phillippy, AM (1 de julio de 2012). "Corrección de errores híbridos y ensamblaje de novo de lecturas de secuenciación de una sola molécula" . Biotecnología de la naturaleza . 30 (7): 693–700. doi : 10.1038 / nbt.2280 . PMC 3707490 . PMID 22750884 .
- ^ Chin, Chen-Shan; Alexander, David H .; Marks, Patrick; Klammer, Aaron A .; Drake, James; Heiner, Cheryl; Clum, Alicia; Copeland, Alex; Huddleston, John; Eichler, Evan E .; Turner, Stephen W .; Korlach, Jonas (2013). "Ensambles de genoma microbiano no híbridos, terminados a partir de datos de secuenciación SMRT de lectura larga". Métodos de la naturaleza . 10 (6): 563–569. doi : 10.1038 / nmeth.2474 . PMID 23644548 . S2CID 205421576 .
- ^ "Bio-IT World" .
- ^ "PacBio lanza un sistema de secuenciación de una sola molécula de mayor rendimiento y menor costo" .
- ^ Gaskill, Melissa (29 de agosto de 2016). "Primera secuenciación de ADN en el espacio un cambio de juego" . NASA . Consultado el 26 de octubre de 2016 .
- ^ Regalado, Antonio (17 de septiembre de 2014). "Nuevo secuenciador de ADN radical finalmente llega a manos de los investigadores" . Revisión de tecnología . Consultado el 3 de octubre de 2014 .
- ^ Shendure, J .; Ji, H. (2008). "Secuenciación de ADN de próxima generación". Nat. Biotechnol . 26 (10): 1135-1145. doi : 10.1038 / nbt1486 . PMID 18846087 . S2CID 6384349 .
- ^ Karow, J. (2010) Ion Torrent Systems presenta secuenciador electrónico de $ 50.000 en AGBT . En secuencia.
- ^ "Ion PGM - Ion Torrent" . Archivado desde el original el 20 de septiembre de 2012 . Consultado el 13 de febrero de 2013 .
- ^ Biociencias del Pacífico